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《浙江大学》 2002年
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角膜碱烧伤后新生血管增殖的实验研究

邱培瑾  
【摘要】: 角膜新生血管增殖是多种生长因子和调节因子参与的病理过程。1975年,Fromer和Klintworth通过实验得出结论:多形核白细胞浸润可以导致角膜新生血管增殖,角膜炎症细胞浸润和新生血管增殖之间是“原因—结果”的关系。炎症细胞分泌多种促新生血管增殖因子和趋化因子,包括碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子和前列腺素等,导致血管内皮细胞增殖、分化、迁徙和趋化,参与新生血管的构建。碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮细胞生长因子是目前已知最强的促新生血管增殖因子,被广泛应用于诱导新生血管增殖的实验研究。已有证据表明:这两种促血管增殖因子参与了炎症性角膜新生血管增殖的调控,但是,目前尚不完全清楚:这二种促血管增殖因子对角膜碱烧伤后新生血管增殖的调控机制,包括二者被分泌的时间,在角膜中的来源以及在角膜哪个组织层次中发挥其促新生血管增殖效应。 本研究采用碱性化学药物烧灼大鼠角膜制备角膜碱烧伤后新生血管增殖的动物模型:分别通过免疫印迹法和免疫组织化学法检测bFGF和VEGF在角膜碱烧灼后的不同时间段在角膜中的表达以及在角膜不同组织层次中的表达,研究bFGF和VEGF对角膜碱性烧伤后新生血管增殖的调控机制。 羊膜具有促进角膜上皮化,抗炎和抗新生血管增殖作用。本研究还采用碱烧伤兔眼角膜制备角膜碱烧伤后新生血管增殖的动物模型;比较新鲜羊膜和保有羊膜移植抑制角膜碱烧伤后新生血管增殖的效用;还探讨了羊膜移植抑制角膜碱烧伤后新生血管 角嗅碱挠伤后新生血管增殖的实验研究 博士学位论文ZboZ 结果: 1.陀肝蛋白的免疫组化结果显示:正常大鼠角膜上皮层、基质层及内皮层均无 VEGF阳性着染;碱烧伤后6h角膜上皮层基底细胞呈VEGF阳性,随着时间的进展,角膜 上皮细胞VEGF表达呈显著性增强,角膜烧灼前后,角膜上皮层VEGF阳性细胞数与阴性 细胞数之间有显著性差异(F二4310.292,P<0.05);角膜碱烧灼后角膜基质层尤其是 浅基质层可见大量炎症细胞浸润,浸润的炎症细胞和新生血管内皮细胞均表达VEGF, 随着时间进展,VEGF阳性细胞数显著增加(<=0.slg,P<0.01)。 2.bFGF蛋自的免疫组化结果显示:正常大鼠角膜上皮层细胞,尤其上皮基底膜呈 bFGF阳性着染,基质层无bFGF表达;碱烧伤后随着时间的进展,角膜上皮细胞bFGF 表达增多(peo.966,p<0刀 1),基质层可见炎症细胞浸润,无bFGP着染;碱烧灼 96以后 角膜上皮层细胞bFGF阳性着染,基质层炎症细胞和新生血管夹杂,炎症细胞和新生血 管内皮细胞均呈bFGF阳性。 结论:VEGF和bFGP均参与了角膜碱烧伤后新生血管增殖的调控;VEGF对新生血管的生 长有诱导和维持作用;bFGF未参与角膜碱烧伤后新生血管增殖的早期诱导,对角膜碱 烧伤后新生血管的增殖起到后续支持作用。 第三休分 ’ 羊腆移植抑创义角厄硫茁伤后新生血谷增殖的实验研臾 目的:羊膜移植是目前治疗严重性眼表疾病的有效手段。本部分研究旨在比较保存羊 膜和新鲜羊膜移植抑制角膜碱烧伤后新生血管增殖的治疗效果:探讨应用保存人羊膜 移植防治角膜碱烧伤后新生血管的手术时机。 4 角膜碱饶伤后新生血冒们殖的实验研究 博土学位论文ZboZ 方法:采用lmol/L氢氧化钠溶液烧灼兔眼角膜,制备碱烧伤后角膜新生血管的动物模 型;22只家兔门只眼)随机分为四组:A组(4只眼),作为对照未施行手术;B组(6 只眼),在碱烧伤急性期行新鲜羊膜移植;C组(6只眼),在急性期行保存人羊膜移植。 D组(6只眼),在疲痕期行保存人羊膜移植。观察2月后取材,制作角膜新生血管标本, 应用计算机彩色图象处理技术测量分析角膜新生血管面积。 结果:对照组:角膜呈持续性上皮缺损,烧灼区角膜呈半透明水肿,角膜表面结膜化, 新生血管覆盖大部分角膜。 实验组:术后4—5天,上皮由周围球结膜上皮向植片中央增殖推进,10if.25天角 膜上皮化完成,术后7t2石5天可见有新生血管自角膜缘长入羊膜下,中央区保持无血 管。A、B、C和D组的角膜新生血管面积分别为s9290u.309thffi’、7.3620.乃3ttiffi‘、 吕.962ed.844mm’、23.963土1.904mm‘,三个实验组和对照组之间比较,角膜新生血管 面积的差异均有显著性意义(p<o.01);B组与C组比较无显著性差异(p
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R772.2

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【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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