代谢酶基因NAT2，NQ01及MTHFR多态性与直肠腺瘤复发关系的研究

【摘要】： 研究背景 多数大肠癌的发生是经过大肠腺瘤发展为癌腺癌这一途径，在浙江海宁的现场干预研究结果表明，应用直肠镜在一般人群中进行筛检和对高危人群的随访，并对检出的息肉进行摘除可同时降低受干预人群的直肠癌发病率与死亡率，该结果直接支持了大肠粘膜-腺瘤-腺癌，这一大肠癌发生过程的假说。在随访过程中发现，不同受检对象具有不同的复发倾向，提示其具有不同的遗传易感性。探讨一些代谢酶的多态性与直肠腺瘤的复发危险性的关系，将有助于揭示我国人群中大肠癌发生早期阶段的分子事件，这将有利于进一步明确高危人群，为大肠癌的防治策略制定提供有用的依据。研究对象和方法 在1977-80年，我们研究所在海宁对30岁以上普通人群进行直肠镜筛检，对检出肠道腺瘤或息肉患者共计4076例进行了摘除，并在其后的20多年间，先后对该高危人群进行了六次肠镜随访。本研究采用回套式病例-对照研究，随机在该人群中抽取完成五次以上肠镜随访并且发现2次及以上复发者52例，我们将该组人群定义为复发组，另外从完成五次以上随访且无任何复发的人群中，随机抽取52例为无复发对照组。每例复发组及对照组个体均采5ml外周血，经肝素抗凝处理，从抗凝外周血中分离白细胞，并按标准的酚／氯仿提取法提取基因组DNA。采用PCR-RFLP方法，应用5’GGA ACA AAT TGG ACT TGG3’及5’TCT AGC ATG AAT CAC TCT GC3’这一对引物扩增NAT2基因，应用KpnI、TaqI、BamHI及MspI/AluI限制性内切酶分别检测基因组NAT2基因的M1、M2、M3及M4多态。NQO1基因应用5’-TCC 浙江大学博士学位论文 TCA GAG TGG CAT TCT GC－丁和 5’－TCT CCT CAT CCT GTA CCT CT．3’这 一对引物进行扩增后，应用＊f互限制性内切酶检测其609O＞T多态性； M THF R基因667＊－＞T多态性检测则应用5’－＊GA AG G＊GA＊＊G＊＊T＊＊G CC GAS’和 5’－AGG ACG GTG CGG TGA G肋 TG上’这对引物进行扩增， 作 Hif限制性内切酶消化，电泳分离后分析。高危因素调查采用第六次肠镜 随访时的调查资料，所有资料以POXI，RO软件建立数据库，运用SPSS 10刀 统计软件包作统计分析。 I 结果 NATh野生型 Wo频率在对照组＊，32．70／o）明显高于复发组 侣乃2，15．4O＞杂合型在复发组频率为 40历2门6．9o人与无复发组频率 30乃2 （57．7％）比较，具统计学意义（P＜O．05）。以“屹N叮基因型的危险度OR为 1，则Wffo”基因型的OR＝2．96（95％CI．09－8刀1），M”M”基因型的OR＝2．12s O5％CI为0．676．78人在复发与无复发组中，未发现NAh快速与慢速酶 的差异；吸烟与快酶型及谩酶型的交互作用的复发相对危险度（OR）分别为 2．60（95％CI．06－6．38）和2．sl（95％CI．80－9．92）；但当将NATZ基因型分为 Wdwt、Wl”和M”／M’型作分层分析时，吸烟在Wt／W组（2275，95％CI 2．11－244．86，P＝0刀07）的相对危险度远高于在 Wl”型和 M＊／M＊型组的 1．40（95％ CI．49－4．11）和 4．20（95％CI．7423．90），且达到统计学上的显著性 水平。NATZ多态性与红烧鱼的交互用结果显示，每周一次及一次以上进食 红烧鱼者，在快酶型中 OR可达2．25四5％CI．63七．06），而在慢酶中仅为： 1．50（95％CI．二49．59）；当以 NATZ的 Wo、Wt／M”和 M”！M＊分层分析时， 红烧鱼 OR值分别为：5＊0（95％CIO．38－66．of）、1．59（95％CI．36－7＊1）和 1．67（95％CI．23－12．35）。 NQO基因 609C）T…ro－＞ser）多态检测结果显示，Cl帅ro）基因型 3 浙江大学博士学位论文 在病例及对照中的比例分别为 17乃（33．3％）和 19／52臼6．5％h CfY（Pro／ser 型则分别为二4乃1（47．1％）和22／二（42．3％），其OR 值为1．22（9％＊O．5卜二＊2）： 而纯合子Tf归er／Sef）型在复发组与对照组中分别为10151门．6o）和11乃2 （ZI．2％人 比数比为 l．02050CI．35上．99＞ 复发组与无复发组之间NQOI 基因609C十T多态性分布无显著性差别。吸烟在NQOI基因的Ca、Cff及 Tf型的相对危险度均上升，经MantelHaenszel分层分析，其总的OR值达 到了3刀1（95％＊1．32－6．86），达到统计学上的显著性差异（P＜0＊5），但在分 层分析的＊Q01各种基因分型中均未达到显著性水平（P＞0刀5人饮酒与＊Q01 基因的交互作用中，随着T（ser）型等位基因在基因组中比例增加，饮酒的 的相对危险度有下降的趋势，在Tf（ser／ser）型中成为保护因子，OR值为 0．3505oCI．19－067

【关键词】：大肠癌 大肠腺瘤息肉 N－乙酰基转移酶2 醌氧化还原酶1 亚甲基四氢叶酸还原酶 多态性 交互作用 高危因子 分子流行病学
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R735.37
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