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《浙江大学》 2002年
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NMDA受体介导束缚应激时腺垂体激素分泌的调节

刘健翔  
【摘要】: 谷氨酸(L-Glu)是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质,介导多数兴奋性神经传递。NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体是一类重要的亲离子型谷氨酸受体。近年来注意到,NMDA受体在神经内分泌功能调控中可能起重要作用。然而,对于NMDA受体在介导应激时神经内分泌应答反应中的作用,及其作用在个体发育和衰老过程中的变化,并无较全面的了解。 本论文的主要目的是研究持续束缚应激过程中几种重要腺垂体激素的应答反应,以及NMDA受体参与的调控;并比较研究进入青春期(Peripubertal)雄性大鼠和老年(Middle-aged)雄性大鼠垂体激素应激应答以及NMDA受体参与的调控。 本实验采用Wistar-Imamichi雄性大鼠作为实验动物,对其进行3小时持续束缚,在不同时间点通过颈静脉插管采取血样,测定血浆中催乳素(PRL)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和促性腺激素(LH和FSH)浓度,并测定血浆皮质酮(CORT)和睾酮(T)水平,以研究持续束缚应激过程中神经内分泌系统功能调整及适应的动态过程;采用埋植脑室插管和颈静脉插管的方法,通过预先单侧侧脑室注射和颈静脉注射NMDA受体拮抗剂,研究机体应激过程中中枢和垂体NMDA受体可能参与的机制;并比较竞争性NMDA受体拮抗剂AP-5和非竞争性NMDA受体通道阻断剂MK-801的作用。通过上述方法,本论文比较系统地研究了NMDA受体在成年(12周龄)大鼠束缚应激过程中PRL、ACTH、LH和FSH等激素分泌调控中的作用;比较研究了青春期(45日龄)大鼠和老年(16月龄)大鼠腺垂体激素对持续束缚的应激应答反应,以及阻断NMDA受体通道后的效应。除上述外,本论文还研究了重复束缚应激后垂体激素应答反应的适应及变化。实验结果如下: 一、成年雄性大鼠在持续束缚应激时腺垂体激素分泌改变及NMDA受体介导: 1)束缚应激引起血浆中PRL水平迅速升高,15分钟时较应激前升高7倍以上;此后随着束缚的持续而快速下降,以后转缓;束缚3小时后,仍未恢复到应激前水平。束缚应激亦引起血浆ACTH水平迅速升高,15分钟时较应激前升高6倍以上;此后快速下降,并随着束缚持续而逐渐转缓;束缚3小时后,仍未恢复到应激前水平。血浆CORT水平亦显著升高(3倍以上),但达到峰值时间较ACTH滞后;束缚3小时后,仍显著高于应激前水平。束缚应激15分钟时可见血浆中LH、FSH和T水平升高,随后回降;束缚应激3小时后,LH和T水平比束缚前有所降低。 2)右侧侧脑室预先注射MK-801(50μg/rat)或预先静脉注射MK-801(5 浙江大学博士学位论文 mg/kg)完全阻断释放引起的 PRL的释放,并引起束缚过程中 PRL水平始终显著低 于对照;右侧侧脑室预先注射AP-5(50 pg/nd;100 gb)可部分阻断束缚 15分钟 时 PRL的释放;并引起束缚 180分钟时 PRL水平显著低于对照。预先静脉注射 AP. 5 (l mg/kg)不影响 PRL的应答反应过程。 3)右侧侧脑室预先注射 AP巧60卜y)或 MK80u0卜y,或预先静 脉注射MK801G wig)显著抑制 15分钟时ACTH的应答反应;预先静脉注射 AP-5(l mg/kg)未显著改变 ACTH的应答反应过程。血浆 CORT水平亦发生与 ACTH相似的变化,但时间滞后。 4)右侧侧脑室预先注射AP巧 pgha),显著抑制束缚引起的LH及T水 平升高;右侧侧脑室预先注射MK七0160 V砷)有一定抑制作用(但不显著): 预先静脉注射AP6 t)或MK七 6 mg/kg)均无显著作用。上述各种处 理均未显著改变束缚引起FSH水平的变化。 二、青春期雄性大鼠柬缚应激时腺垂体激素分泌及NMDA受体介导: 1)束缚引起该龄大鼠血浆PRL水平迅速升高,反应过程类似于成年大鼠。预 先静脉注射 MK801G p/kg)完全阻断 PRL的上述反应。 2)束缚引起该龄大鼠血浆ACTH水平上升,30分钟时达到峰值,该峰值低于 成年大鼠;但 CORT反应过程与成年大鼠相似。预先静脉注射 MK七 G mg/kg) 后束缚,ACTH水平仍上升,但 15分钟后不再升高,且恢复过程较对照延迟; CORT反应过程基本不变,但水平略低于对照。 3)束缚应激 15分钟引起该龄大鼠 LH和 T水平的降低及 FSH水平的升高,15 分钟后FSH水平回降,30分钟后LH和FSH水平开始回升。预先静脉注射MK-801 (5 mg&g)取消了柬缚对LH分泌的抑制作用;束缚后,T水平显著升高;但MK. 801未改变FSH的分泌过程。 三、老年雄性大鼠束缚应激时腺垂体激素分泌及其N’MDA受体介导: 1)束缚引起该龄大鼠PRL水平缓慢升高,达到峰值时间大大迟于成年大鼠, 峰值亦低于成年大鼠。预先静脉注射MK801G wig)完全阻断PRL的应激应答 反应,并引起束缚后PRL水平的降低。 2)束缚 15
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