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《浙江大学》 2002年
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二化螟中肠Bt毒蛋白Cry1Ab受体基因的分子生物学研究

吴志平  
【摘要】: 本论文以Bt毒蛋白Cry1Ab转基因水稻为材料,建立了从转基因植株中分离纯化外源基因表达产物Cry1Ab的二次高效液相离子色谱法;研究了处于有关缓冲溶液中的Cry1Ab蛋白构象性质及杀虫活性;以此为基础,用~(125)I标记二次色谱分离所得到的高纯度Cry1Ab蛋白,制得放射性探针;用该探针进行Western杂交实验证实了二化螟中肠存在Cry1Ab受体蛋白;进一步用分子生物学有关方法克隆到二化螟中肠Cry1Ab受体基因(Bt-R_3)cDNA全长序列,并在杆状病毒--昆虫系统中表达了Bt-R_3蛋白胞外结构域,Western点杂交实验显示表达产物能有效地结合Cry1Ab,从而确证所克隆到的Bt-R_3是Cry1Ab的受体基因;在这些研究的基础上,运用生物信息学手段分析了Bt-R_3蛋白的结构特性,Bt-R_3和文献已报导的几种Bt受体蛋白之间的分子进化关系以及它们氨基酸序列间的保守性关系,从而更进一步地证实了Bt-R_3确实是Cry1Ab的受体基因。具体结果如下: 1.高效液相离子交换色谱法从转基因水稻中分离、纯化Cry1Ab蛋白 建立了用高效液相离子交换色谱法(Ionic exchange high performance liquid chromatography, IEHPLC),从Bt毒蛋白Cry1Ab转基因水稻植株的提取液中富集、分离、纯化得到高纯度Cry1Ab的新方法。分离产物具有良好的生物活性。本法包含二步色谱分离过程,第一步为弱阴离子交换色谱,NaCl梯度洗脱,洗脱液A及B分别是10 mM Trisbase, 10 mM Trisbase内含0.18M NaCl pH 9.8,洗脱程序为:0~20min,洗脱液A由100%线性减至60%;20~60 min A由60%线性减至45%;60~90min A保持45%不变;洗脱液流量为1mL·min~(-1),215nm紫外检测,Cry1Ab的保留值为52.16 min,洗脱液pH值对色谱分离度和各组份保留值敏感,最佳值为9.8;第二步为阳离子交换色谱,流量为1mL·min~(-1),215nm紫外检测,pH为7.5,Cry1Ab的保留值5.21min,色谱操作温度8至10℃。 2.Bt毒蛋白Cry1Ab溶液构象性质及杀虫活性 用荧光光谱法研究了毒蛋白Cry1Ab在溶液中的构象。结果表明pH值增大时,毒蛋白的荧光强度也增大,至pH=11时荧光强度已达最大值;加入甲醇、乙醇、异丙醇等有机溶剂引起毒蛋白荧光发射波长蓝移和荧光强度增大,至有 机溶剂的浓度超过某一阈值后荧光发射波长不再蓝移;丙酮能完全碎灭毒蛋白 CrylAb的荧光,丙烯酸胺能碎灭CrylAb 86%的荧光而KI对毒蛋白天辟灭作 用,由此推断 Cry Ah的大部分色氨酸残基位于分子表面富含负电荷的区域中 ; CrylAb在所研究的四种不同的缓冲溶液中,杀虫毒性相似。 3.H化螟中肠CrylAb受体蛋白的鉴定、受体基因的克隆及其核苦酸序列特征 二化螟中肠蛋白质提取物,经SDS-PAGE门5%)电泳后电转移至硝酸纤维 素膜,然后用’nI放射性标记的Cry1Ab蛋白为探针进行Western结合实验, 证实二化螟中肠存在一种分子量约为 195 kDa的特异性结合蛋白。根据己克隆 到的Bt受体蛋白BtRI及BtR175保守区域的氨基酸序列设计简并引物,用 分子生物学方法克隆到一个全长为555fop的CDNA序列,其ORF编码一个由 1715个氨基酸残基构成的蛋白。将该基因命名为Bt-R3,对其核苦酸序列特征 进行了分析。 4.Bt受体基因mt-R3)在杆状病毒一昆虫系统中的表达 利用杆状病毒一昆虫 Bac to Bac系统表达了 Bt-R3基因的胞外结构片段, 并对表达产物进行了Western七lot结合实验,结果表明:表达产物能有效地结 合Bt毒蛋白CrylAb,从而证明BtR3确实是CrylAb的受体基因Z它们的结 合部位位于Bt-R3蛋白的胞外结构域中。 5.二化螟中肠Bt受体基因mt-R3)蛋白序列的生物信息学分析 将Bt-R3 蛋白氨基酸序列用BLAST软件对GenBalllUuDBJffiMBL、 SWISS个、Pth、PDB等数据库进行同源性搜索,用有关生物信息学软件分析 了所得同源性蛋白质序列,得到了B卜R3蛋白的结构特性、系统进化树,分析 了其可能的生物功能;用多重联配法分析了该蛋白的保守区域及有关功能结合 位点的特性。BtR3受体蛋白是钙粘蛋白超级家族中的一员,Bt-R3基因表达 的前体胰蛋白中含一由ZI氨基酸残基构成的信号肽;其成熟蛋白胞外区域由 9个类似于钙粘蛋白重复单元EC及一近膜结构MPR组成,Bt毒蛋白特异性 结合序列位于ECS结构域中,每2个重复单元的交界处总会出现卜 个Pro 残基;近膜结构下游有一由22个氨基酸残基组成的跨膜结构域,成熟蛋白共 有 6个潜在的 N一糖基化位点。BtR3受体是一个较强的酸性蛋白,和 Bt.RI 75 亲缘性最近;己克隆到的四种 Bt受体及舞毒蛾(Lyn。tria dispar)相关蛋白构成 且且 b 了钙粘蛋白的一个亚家族,这些蛋白质在昆虫体内的生理功能尚不清楚,可能 和维持虫体内分泌液离子组成有关。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S435.112

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 徐强;Bt毒蛋白受体基因Bt-R3在大肠杆菌中的表达及受体蛋白结构和功能的初步研究[D];浙江大学;2003年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张传溪,孙建新,施惠娟,陈哲宇,吴祥甫;EGFP基因在粉纹夜蛾细胞中的高效表达[J];动物学研究;1999年06期
2 朱兵,杜秀莲,李荣昌,王夔,金坚,王博诚;稀土离子与乳铁蛋白结合的光谱研究[J];高等学校化学学报;2001年01期
3 易学瑞,余宙耀,张宜俊,章谷生;基因工程抗体表达系统研究进展[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2000年01期
4 谢道昕,范云六,倪万潮,黄骏麒;苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白基因导入棉花获得转基因植株[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1991年04期
5 张宏,王国英,谢友菊,许宁,赵南明,李太源,田颖川,乔利亚,莽克强,戴景瑞;超声波介导法转化玉米愈伤组织及可育转基因植株的获得[J];中国科学C辑:生命科学;1997年02期
6 张继红,王琛柱,钦俊德;苏云金芽孢杆菌δ-内毒素的杀虫机理及其增效途径[J];昆虫学报;1998年03期
7 李小峰,齐义鹏,朱应,王业富;杆状病毒凋亡抑制基因的稳定转化及抗凋亡昆虫细胞系的构建[J];昆虫学报;1999年02期
8 唐灿明,孙敬,朱协飞,郭旺珍,张天真,沈晋良,高丛芬,周威君,陈志贤,郭三堆;我国现有的3类转Bt基因抗虫棉品系棉铃虫抗性的遗传分析[J];科学通报;1999年19期
9 束春娥,孙洪武,孙以文,柏立新,黄骏麒,李胜;转基因棉Bt毒性表达的时空动态及对棉铃虫生存、繁殖的影响[J];棉花学报;1998年03期
10 林毅,黄志鹏,陈建武,黄必旺,关雄;苏云金芽孢杆菌ICP基因PCR鉴定的策略与进展[J];农业生物技术学报;2000年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张明洲;农杆菌介导高梁转化体系的建立与Bt(Bacillus thuringiensis)抗虫基因的导入[D];浙江大学;2002年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王家宝,王留明,沈法富,张学坤,杨静,刘任重;环境因素对转Bt基因棉Bt杀虫蛋白表达量的影响[J];山东农业科学;2000年06期
2 张学坤,王留明,王胜利,周玉,杨静;转Bt基因抗虫棉田2、3代棉铃虫防治指标研究[J];山东农业科学;2001年03期
3 李汝忠,沈法富,王宗文,王景会,刘承运,申贵芳;转Bt基因抗虫棉Bt基因表达的时空动态[J];山东农业科学;2002年02期
4 姜明松,李广贤,宫德英,姚方印;多抗转基因水稻植株的获得及其抗性鉴定[J];山东农业科学;2004年04期
5 胡乃梁;陈燕;杨家祥;宋继梅;徐季昭;;一种西夫碱化合物的合成及其在汞测定中的应用[J];安徽大学学报(自然科学版);2008年06期
6 高贵珍;刘小阳;;荧光光谱法研究茜素红S与壳聚糖的结合反应[J];安徽大学学报(自然科学版);2010年04期
7 郭海军;刘立岩;窦月;邸媛圆;;花粉管导入的研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年05期
8 王娟;余渝;孔宪辉;刘丽;王旭文;;棉花转基因育种研究现状与前景展望[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年15期
9 向太和,倪大虎,张盘娣,吴家道,杨剑波,贾士荣;抗菌肽Shiva A基因导入杂交水稻恢复系明恢63的初步研究[J];安徽农业科学;1999年06期
10 周冬生,吴振延,王学林,郑厚今;转Bt基因棉的抗棉铃虫性及其生理作用研究进展[J];安徽农业科学;2000年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖留斌;孙厚俊;柏立新;;人工模拟“庇护所”和“非庇护所”条件下棉铃虫对Bt棉的抗性演变[A];纪念江苏省昆虫学会九十周年论文集粹[C];2010年
2 张伟;林琳;刘睿;李永红;;对磺酸基杯芳烃与胃蛋白酶相互作用的光谱研究[A];第十五届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2009年
3 赵东欣;姚永峰;卢奎;;光谱法研究NA和NA-Tyr-Tyr与ct-DNA的相互作用[A];中国化学会第十二届全国应用化学年会论文集[C];2011年
4 张启军;李聪;虞德容;孙永华;吕川根;;抗病虫转基因广亲和水稻新资源的创新[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
5 戴景瑞;王守才;谢友菊;王国英;杨会;张荣;;玉米基因工程与抗虫玉米育种[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
6 张红梅;王国英;谭振波;;利用基因枪法将Bt基因导入早熟玉米优良自交系[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
7 刁现民;王永芳;李伟;王鹏;智慧;陈振玲;段胜军;;抗除草剂基因Bar转化谷子研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8 李卫华;刘文清;刘建国;张玉钧;杨立书;赵南京;丁志群;;激光诱导荧光法测定水中溶解有机物[A];2004全国光学与光电子学学术研讨会、2005全国光学与光电子学学术研讨会、广西光学学会成立20周年年会论文集[C];2005年
9 陈坤荣;许泽永;晏立英;罗莉霞;方小平;张宗义;R G Birch;R G Dietzgen;C M Higgins;;基因枪介导的花生条纹病毒壳蛋白基因转化花生研究[A];第三届湖北湖南植保农药学术研讨会论文集[C];2004年
10 朱昌雄;蒋细良;田云龙;郭萍;;生物农药研究的最新进展、问题、建议与展望[A];第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李法辉;两类功能性化合物的合成、结构及生物活性研究[D];中国海洋大学;2010年
2 胡珊;荧光共振能量转移体系的研究及其在均相免疫分析中的应用[D];华中科技大学;2010年
3 陈洋;转cry1Ab/vip3H水稻抗螟性的鉴定及三类不同转基因水稻对其非靶标生物褐飞虱影响的评价[D];浙江大学;2010年
4 吕豪豪;转Bt基因对水稻根际及残茬降解土壤微生物生态的影响研究[D];浙江大学;2010年
5 何西利;模型蛋白与中药活性成分发光行为研究与应用[D];西北大学;2011年
6 董玉梅;马铃薯L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因的克隆和功能分析[D];山东农业大学;2011年
7 徐旻;氧氟沙星酰腙配合物的结构、抗氧化活性及与生物大分子的相互作用[D];兰州大学;2011年
8 彭小红;Zn~(2+)和Hg~(2+)荧光传感器的研究[D];兰州大学;2011年
9 王丽娜;基于Schiff碱衍生物的金属离子荧光探针的研究[D];兰州大学;2011年
10 谢晓芸;几种典型内分泌干扰物与人血清白蛋白相互作用的研究[D];兰州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邓雅丽;土壤中铁铝氧化物对Bt毒素吸附的影响[D];华中农业大学;2010年
2 冯倩倩;赭曲霉毒素A人工抗原构建及其多克隆抗体的制备[D];华中农业大学;2010年
3 刘鑫;利用分子标记辅助选择培育和评价三种BT基因(CRY1AC、CRY1C~*和CRY2A~*)抗虫水稻[D];华中农业大学;2010年
4 卢增斌;防治水稻螟虫单项技术措施的评价及储备技术—转基因水稻对非靶标生物影响的研究[D];华中农业大学;2010年
5 刘勇;芳香炔醇的合成及其与硝基爆炸物的荧光猝灭效应研究[D];中国工程物理研究院;2010年
6 胡娟;几种生物农药对稻纵卷叶螟和稻飞虱的防治作用研究[D];安徽农业大学;2010年
7 王令芳;含氮有机阳离子修饰的多酸化合物的定向构筑与结构表征[D];郑州大学;2010年
8 王俊亮;超声波辅助Huisgen-Click反应在白杨素改造中应用及其与蛋白的相互作用研究[D];郑州大学;2010年
9 于丽萍;玉米种子胚特异性启动子emb5的功能分析[D];山东农业大学;2010年
10 郭海军;玉米转基因技术的研究[D];辽宁师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 苏彦辉,曲红,罗静初,朱玉贤,V.Vachon,R.Laprade,张杰;苏云金芽孢杆菌Cry1Aa蛋白α4螺旋形成跨膜离子通道的昆虫毒性试验与模型预测[J];中国科学(C辑:生命科学);2002年02期
2 张继红,王琛柱,钦俊德;苏云金芽孢杆菌δ-内毒素的杀虫机理及其增效途径[J];昆虫学报;1998年03期
3 罗科,张青文,蔡青年;苏云金杆菌的杀虫蛋白质和基因的结构、特点、分化及调控的研究进展(综述)[J];农业生物技术学报;1995年03期
4 项友斌,梁竹青,高明尉,舒庆尧,叶恭银,成雄鹰,I.Altosaar;农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达[J];生物工程学报;1999年04期
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 夏吉星;小菜蛾中肠Cry1Ac毒素结合蛋白的分离及鉴定[D];黑龙江大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王珣章,谢伟东,龙綮新,苏德明,钟江,蒲蛰龙;形成多角体的杆状病毒载体系统的建立[J];病毒学报;1991年03期
2 杨斌盛;稀土离子与伴清蛋白结合的光谱研究[J];高等学校化学学报;1998年07期
3 石太渊,杨立国,王颖,郑文静,高连军;PYH157广谱抗病基因导入高粱及转基因植株的筛选与研究[J];杂粮作物;2001年01期
4 石太渊,杨立国;基因型和培养基对高粱幼穗离体培养的影响[J];国外农学-杂粮作物;1995年04期
5 何富刚,徐秀德;国外高粱种质资源抗高粱蚜、玉米螟、黑穗病鉴定与评价研究[J];国外农学-杂粮作物;1996年01期
6 白志良,王良群,郑丽萍,李爱军,王丰林;高粱不同外植体离体培养[J];华北农学报;1995年01期
7 焦改丽,郭三堆,李淑君,陈志贤,赵俊侠;棉花遗传转化和植株再生的研究[J];华北农学报;1997年02期
8 朱至清,王敬驹,孙敬三,徐振,朱之垠,尹先初,毕凤云;通过氮源比较试验建立一种较好的水稻花药培养基[J];中国科学;1975年05期
9 谢道昕,范云六,倪万潮,黄骏麒;苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白基因导入棉花获得转基因植株[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1991年04期
10 丁群星,谢友菊,戴景瑞,米景九,李太元,田颖川,乔利亚,莽克强,刘宝兰,王音,冯平章;用子房注射法将Bt毒蛋白基因导入玉米的研究[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1993年07期
【相似文献】
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1 杨传敏;;非法转基因米流入市场 含有Bt毒蛋白转基因成分[J];农药市场信息;2005年13期
2 李建庆;张永安;杨忠岐;袁锋;;杀天牛毒蛋白的分离纯化及其N-末端氨基酸序列的测定[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2008年03期
3 黄永光;周剑丽;王培苑;曲原;邱树毅;;一株发酵降解麻疯树饼粕毒蛋白菌株的筛选[J];中国粮油学报;2009年06期
4 蔡林,崔洪志,张友军,冯兰香,杨丽梅,郭三堆,杨建荣,张延国;苏云菌芽胞杆菌毒蛋白基因导入甘蓝获得抗虫转基因植株[J];中国蔬菜;1999年04期
5 魏琴,赖家业,周锦霞,戎芳,徐莺,唐琳,陈放;干旱胁迫下麻疯树毒蛋白的Western杂交分析[J];北京林业大学学报;2004年05期
6 李静;颜钫;吴芬宏;岳碧松;陈放;;麻疯树种子提取物对萝卜蚜的杀虫活性[J];植物保护学报;2004年03期
7 陆益民,宋光泉,贺铁山;蓖麻种子毒蛋白的高效凝胶过滤色谱分析[J];种子;2005年06期
8 ;科苑采撷[J];河南畜牧兽医;2001年12期
9 姜志磊;刘德璞;李晓辉;孔祥梅;李葱葱;李飞武;孙传波;袁英;;转基因抗虫玉米Bt毒蛋白的时空表达分析[J];吉林农业科学;2008年06期
10 吴伟农;美科学家发现配对毒蛋白可能导致疯牛病[J];四川畜牧兽医;2002年01期
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1 姜临建;段留生;田晓莉;王保民;张海峰;何钟佩;李召虎;;盐胁迫下两种转基因抗虫棉生长及毒蛋白表达量的变化[A];中国棉花学会2004年年会论文汇编[C];2004年
2 翁育萍;庄鸿宾;符文美;林荣耀;;草菇毒蛋白A2,一种从草菇子实体中纯化出来的心脏毒素[A];海峡两岸首届毒理学研讨会论文(摘要)集[C];2001年
3 张文飞;谢柳;张雪丽;;从病蚕中分离出一株高产毒蛋白晶体的Bt菌株[A];海南生物技术研究与发展研讨会论文集[C];2006年
4 詹金彪;郑树;;天然蛋白毒素的研究和临床应用展望[A];浙江省生物化学与分子生物学学术交流会论文集[C];2005年
5 林玲;陈志石;龚伟荣;张爱香;周益军;顾本康;;间接ELISA法检测棉子携带黄萎病菌新方法[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
6 刘玉坤;赖凤香;傅强;;转基因抗虫水稻不同组织不同部位的Bt毒蛋白表达量比较[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
7 赵军良;马蓉丽;;农作物抗虫的遗传工程[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
8 林玲;陈志石;龚伟荣;张爱香;顾甘雨;顾本康;;利用间接ELISA法检测棉籽黄萎病菌[A];2005年华东植物病理学术研讨会论文集[C];2005年
9 袁燕;龙云雷;毛宇;李少遊;戴晓畅;;一种全新的植物毒蛋白——蒜头果蛋白[A];中国化学会第四届有机化学学术会议论文集(下册)[C];2005年
10 余靖;;台湾眼镜蛇心脏毒蛋白分子的三维结构、折叠路径及分子动态的研究[A];第十届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];1998年
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1 吴伟农;美科学家发现配对毒蛋白可能导致疯牛病[N];中国国门时报(中国出入境检验疫报);2001年
2 胡燕苹 林展翼;广州局在检验检疫系统中率先开展转基因水稻中Bt毒蛋白基因检测[N];中国国门时报;2005年
3 方舟子;3·15更需明辨真假[N];北京科技报;2006年
4 中国预防医学科学院中毒控制中心 吴文红 丁茂柏;麻风果吃不得[N];健康报;2000年
5 陈勇;专家有突破 借助基因杀死癌细胞[N];人民日报;2005年
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8 刘宝河;苍耳子中毒的防治[N];中国医药报;2003年
9 丁茂柏;麻风果又惹祸[N];健康报;2006年
10 朱国艳;不要妖魔化转基因[N];科技日报;2006年
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1 李克;丙型肝炎病毒蛋白相互作用蛋白基因克隆化及Hcbp6功能研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
2 林娟;麻疯树(Jatropha curcas)毒蛋白(curcin)的分离纯化、基因克隆及作用机理研究[D];四川大学;2002年
3 金芜军;转基因作物环境与食品安全性研究[D];中国农业科学院;2003年
4 罗孟军;麻疯树毒蛋白curcin的表达、纯化、复性及体外活性和几丁质酶性质的研究[D];四川大学;2006年
5 李江红;中华蜜蜂(Apis cerana)毒腺cDNA文库的构建及主要毒蛋白基因表达调控研究[D];浙江大学;2005年
6 徐遥;新疆棉区Bt棉花对靶标与非靶标昆虫的生态效应[D];浙江大学;2010年
7 芮玉奎;转基因抗虫棉(Gossypium hirsutum L.)生产安全性的研究[D];中国农业大学;2003年
8 王连荣;转基因植物外源Bt基因表达产物环境行为研究[D];河北农业大学;2010年
9 任羽;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry1Ca7分子设计[D];中国农业科学院;2008年
10 赵玉;美洲商陆抗病毒蛋白Ⅰ和Ⅱ基因功能的研究及叶片中抗病毒蛋白的分离[D];中国农业大学;2004年
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1 和丽丽;聚氨酯功能泡塑分离麻风树种子毒蛋白的研究[D];成都理工大学;2005年
2 张益文;杨棉复合系统中BtCrylAc毒蛋白的分布动态及转基因安全性评价[D];河北农业大学;2012年
3 白亚蒙;大田试验转基因杨树无性系的抗虫性研究[D];南京林业大学;2004年
4 戎芳;麻疯树(Jatropha curcas L.)外植体愈伤组织中毒蛋白(curcin)Western-blot鉴定及其烟草转基因研究[D];四川大学;2004年
5 温发园;病原物对松墨天牛(Monochamus alternatus)致病性的研究[D];河南农业大学;2005年
6 蒋华梅;麻疯树(Jatropha curcas)核糖体失活蛋白(curcin)的分离纯化[D];贵州大学;2007年
7 黄永光;微生物对麻疯树饼粕毒蛋白的降解研究[D];贵州大学;2008年
8 邓骛远;麻疯树(Jatropha curcas)毒蛋白curcin2基因的原核表达[D];四川大学;2006年
9 赵文娟;转Bt基因稻谷储藏期对四种储粮害虫的影响[D];西南大学;2009年
10 孙晴;麻疯树(Jatropha curcas)的RAPD分析与麻疯树毒蛋白在大肠杆菌中的表达[D];四川大学;2002年
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