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《浙江大学》 2003年
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白菜核不育两用系基因组AFLP差异片段筛选、克隆及序列分析

符庆功  
【摘要】: 白菜(Brassica campestris L.ssp. chinensis Makino)属十字花科芸薹属芸薹种植物,在我国农业生产和人民生活中占有非常重要的地位。白菜杂种优势十分明显,其雄性不育系利用一直被认为是目前一代杂种生产的理想途径,因而,有关其雄性不育发生的机理研究一直深受人们的重视。分子生物学技术的发展则为从分子水平阐明白菜雄性不育发生机理提供了重要的工具。 本研究以‘矮脚黄’白菜核不育两用系的测交后代群体为实验材料,利用AFLP指纹图谱技术研究了可育系与不育系基因组DNA多态性差异,并对差异条带进行了克隆、测序。探讨了所得差异片段与先前所得的育性相关基因之间的关系。结果如下: (1)本实验分别以可育系和不育系基因组DNA混合池为模板,选用64对E+3/M3引物组合进行选扩筛选,分析得到了两条可育系所特有的差异条带MF-14和MF-24。 (2)以回收得到特异片段MF-14为探针,通过Southern杂交检测到白菜不育系中也含有该片段的同源序列。并初步探讨不育系碱基序列突变情况。 (3)序列测定表明特异片段MF-14长289bp;比较特异片段MF-14与先前所得育性相关片段S107及育性相关基因CYP86MF、BCMF1、BCMF2、BCMF3、BCMF4之间序列关系,结果显示它们之间的相似性均小于50%。分析结果表明MF-14是可育系中发现的一个新的特异片段。 (4)以MF-14特异片段为基础,设计引物进行了SCAR标记转换研究。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q943

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