收藏本站
《浙江大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

微囊化转Maspin、IL-12基因细胞治疗恶性肿瘤的实验研究

潘月龙  
【摘要】: 细胞因子治疗是目前临床应用最多、疗效最肯定的生物治疗,IL-2、INF、CSF等在临床上得到了广泛的应用,并取得了一定的效果,但是,由于存在以下缺点而使临床疗效不满意。①细胞因子在体内的生物半衰期较短,一般认为静脉注射为5~7分钟,24小时内消失殆尽。因此,要保证有效浓度必须持续大剂量静脉给药或间断皮下注射。大剂量静脉给药可引起严重的副作用,如血管渗漏综合征,直立性低血压及严重潜在不适,况且,细胞因子疗法的特点是长期低剂量给药效果好,然而长期反复皮下注射,病人难以坚持,因此,临床上不易达满意效果。②基因工程细胞因子(重组细胞因子)的纯度和活性尚不够满意。目前应用的重组细胞因子均为原核细胞产生,细菌蛋白和脂多糖和纯化过程中的有机溶剂很难被彻底清除,因此临床应用容易产生发热等流感样症状,其它隐性危害尚不清楚。同样,细胞因子的活性也因生产、贮存和运输等方面的影响而不易保证。 基因治疗是通过人工方法改变靶细胞的基因结构从而获得疗效,主要策略分为基因转移和基因灭活两大类。基因转移是目前最主要的方法,即是将外源性目的基因(包括细胞因子、MHC分子、共刺激分子、抗癌基因、反义核酸、抗肿瘤药物相关基因及病毒基因等)导入病变细胞或其它细胞,目的基因的表达产物改变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强,包括免疫基因治疗、靶向化疗或提高机体化疗耐受性以及增强抗癌基因的表达等方案。操作过程包括基因克隆、构建质粒、转染、细胞培养利细胞移植等复杂操作。(1)自体细胞作为载体:细胞移植后不会产生免疫排斥反应,但需对每一位病人进行以上操作,不仅工作量巨大、费用较高,而且质量难以保证。因此,不易在临床上广泛应用。(2)异体/种细胞作为载体:因免疫排斥而难以进行移植。(3)基因直接注射:有可能整合到宿主基因组,存在不安全隐患。 微囊化基因工程细胞可以克服上述的不足,基因工程细胞是指利用各种基因转移方法将外源目的基因导入靶细胞,使靶细胞表达并分泌相应的蛋白活性物质。基因工程的优点在于可按照自己的目的和意愿,在体外人工将DNA分子“剪切”并重新“拼接”,形成一个新的杂合的DNA分子,然后将其导入原核或真核细胞内,使该基因在细胞中表达,产生所需 浙江大学博士学位论文 要的基因产物。然后将基因工程细胞进行微囊化,把微囊化基因_卜程细胞作为功能细胞进行 体外实验研究和体内治疗、免疫隔离等研究利应川。 微囊的主要特点是:具有半通透性,允许小分于营养物质、水和氧等白由出入,以保证 微囊内细胞的正常需要,同时允许目的生物活性物质分泌出微囊外,以发挥其功能;但抗体。 淋巴细胞等不能进入,从而保护微囊化细胞免受机体抡疫系统的攻击【’-‘]。微囊化技术克服 了兔疫排斥反应,因而使异体/种移植成为可能,使用永生化细胞系统为基冈卜程细胞,所 表达的蛋白产物对所有同种疾病病人均能产生治疗作用,由丁细胞包裹在微囊内,可以在体 内氏期分泌目的产物。这种表达异源蛋白的优势还在丁:(l)无需对基冈产物进行化学提纯, 避免提纯试剂对人体的潜在危害,并且人人降低了L作量和成本;(2)无需改变宿主的基冈 组,具有女全性;(3)可批量生产,冻存后随时移植给所需病人,可起到细胞“银行”的作 用,避免了自身体细胞基因治疗时每个病人都需要取囱身细胞,并进行培养、基口修饰、筛 选等一系列烦琐的操作,这样既保证质量控制,又可人人降低费川;(4)按照治疗需要,控 制功能蛋肉的持续性和阶段性表达【’、‘]。微囊化技术在治疗机能赊码和特殊窜要细胞功能丧 失性疾病等方面研究和应用较多I卜’人 微囊化基因工程细胞技术是微囊技术与基冈卜程技术的有机结合。具体操作过出为: (1)带有目的基因(外源基因)的**A片段的获得:(2)**A片段与载体**A的壮按 (体外重组);(3)连接产物导入宿主细胞(受体细胞):(4)重组体的扩增、筛选与鉴定; (5)目的基因在细胞中的表达;(6)表达产物的分离与鉴定;()基冈1-程细胞的微囊化; (8)微囊化细胞的体外培养,观察细胞的生K状况利目的基因的蛋白产物的微囊外分泌悄 况;(9)建立动物模型,体内移植微囊化细胞,观察治疗效果;(IO)临床应川卜’‘”]。 Maspin是1994年iou等通过上常乳腺上皮与乳腺癌进行减数杂交利芹异显示技术得刮 的一种新基冈,研究显示Maspin是一肿瘤抑制基冈,在肿瘤细胞的运动、侵袭、转移及新 生血管形成等方面起着重要作川*-22] 白细胞介素-12(I-12)在介导机体兔疫反应中起着关键性作川,在体山有抗血管形成 作用,有抑制肿瘤细胞生K、运动和侵袭作川l”’\ IL门还与某些化疗钓物产生协同作川 【’飞重组IL刁 已进入临床试验阶段,但全乌应川发现有严重的毒副作川,如胄肠道山血、 肝毒性和贫血,其中有引起死亡的报道【’‘]。比.12的基冈治疗同样显示出强人的抗肿瘤铆p, 但需将IL-12基冈转染白体的肿瘤细胞或成纤维细胞,要对每一病
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R73-36

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 潘月龙,郑树,孝作祥,姚航平,曹江;微囊化转mIL-12基因细胞介导荷瘤小鼠T_(H1)T_(H2)的漂移[J];免疫学杂志;2002年06期
2 徐光炜;我国肿瘤防治的回顾与展望[J];中国肿瘤临床;2001年03期
3 于聪慧,冷希圣,魏玉华,刘继超,杜如昱;海藻酸钠纯度对微囊化肝细胞腹腔移植中微囊纤维化的影响[J];中华外科杂志;2000年04期
4 潘月龙,郑树,孝作祥,曹江,姚航平;微囊化转mIL-12基因CHO细胞皮下移植及联合5-FU对荷瘤小鼠的治疗作用[J];中华医学杂志;2003年01期
5 于聪慧,冷希圣,魏玉华,刘继超,杜如昱;海藻酸钠纯度对大鼠微囊纤维化和囊内肝细胞功能的影响[J];中华医学杂志;1999年06期
6 孙燕,何友兼,许立功,勇威本,周立强,李维廉,李丽庆,叶小平,张和平,陈荣楷,朱军;美罗华治疗B细胞淋巴瘤Ⅱ期临床验证报告[J];中国新药杂志;1999年12期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙燕;临床肿瘤学的现状和展望[J];癌症进展;2003年01期
2 勇威本;肿瘤的靶向治疗[J];癌症进展;2003年04期
3 王列样;美罗华治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤[J];白血病.淋巴瘤;2003年06期
4 杨艳梅;沈晓梅;史克倩;杨同华;王云娟;赖洵;李正发;闻艳;陆智强;;自体外周血造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤临床分析[J];白血病.淋巴瘤;2006年05期
5 ;Effect of CD86 blockage on the expressions of TGF-β1,MMP-9,TIMP-3 and PAI-1 proteins and outcome of pregnancy in murine abortion-prone model[J];Journal of Microbiology and Immunology;2006年02期
6 ;Antisense-Induced Blockade of GATA-3 Expression Could Inhibit Th2 Excursion of Tumor Cells in vitro and in vivo[J];Cellular & Molecular Immunology;2005年03期
7 孙鹏;崔佳;;美罗华联合CHOP方案治疗滤泡型非霍奇金氏淋巴瘤1例[J];大连医科大学学报;2007年04期
8 魏莉;罗荣城;张军一;严晓;方永鑫;费丽华;;~(131)I-rituximab对B细胞淋巴瘤细胞生物学效应的实验研究[J];南方医科大学学报;2006年02期
9 李莉;CD44v6与肿瘤浸润、转移及预后[J];福建医科大学学报;2000年03期
10 Kyoko Kashima;Nobuyuki Ohike;Seishiro Mukai;Masashi Sato;Manabu Takahashi;Toshio Morohoshi;;Expression of the tumor suppressor gene maspin and its significance in intraductal papillary mucinous neoplasms of the pancreas[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2008年01期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 孙燕;;肿瘤靶向治疗[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年
2 潘明沃;陈志强;古炽明;王树声;向松涛;吕立国;代睿欣;;前列腺癌浸润性树突状细胞CD1a、CD83的表达及与临床指标的相关性分析[A];第七次中国中西医结合泌尿外科学术年会暨第二次广东省中西医结合泌尿外科学术年会论文集[C];2009年
3 潘明沃;陈志强;古炽明;王树声;向松涛;吕立国;代睿欣;;前列腺癌浸润性树突状细胞CD1a CD83的表达及与临床指标的相关性分析[A];第七次中国中西医结合泌尿外科学术年会暨第二次广东省中西医结合泌尿外科学术年会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 肖亮;Tim-1-Fc抑制同种移植物排斥反应的作用与机制[D];第二军医大学;2011年
2 韩建军;IL-24与endostatin双基因联合治疗肝癌的实验研究[D];山东大学;2011年
3 孝作祥;持续释放内皮抑素及γ-干扰素的微囊化基因工程细胞的抗肿瘤研究[D];浙江大学;2003年
4 丁小文;叶绿酸铜钠预防化学诱导大肠肿瘤的实验研究及对HT29肠癌细胞的体外抑制作用研究[D];浙江大学;2003年
5 王道荣;转移相关基因CD44和胃癌关系的研究[D];南京医科大学;2003年
6 金光辉;pEgr-IL18-B7.1双基因联合辐射抗肿瘤作用及其机制的探讨[D];吉林大学;2004年
7 韩明勇;IL-18基因修饰大肠癌SW480细胞生物学性状的改变及抗肿瘤作用的研究[D];浙江大学;2005年
8 杨巍;pEgr-IFNγ-Endostatin双基因-放射治疗的抑瘤效应及机制的研究[D];吉林大学;2005年
9 周世庆;乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901免疫逃逸、增殖和凋亡及侵袭力影响的研究[D];山东大学;2005年
10 雷晓;胃癌Treg对DC免疫功能的抑制作用及其机理研究[D];第三军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 樊涛;24例原发性胃恶性淋巴瘤诊治分析[D];中国医科大学;2010年
2 徐翠;抑癌基因Maspin与Caspase-3、MVD在上皮性卵巢癌中的表达及相关性研究[D];泰山医学院;2010年
3 吴志辉;血清sCD44s、sCD44v6、透明质酸和甲状腺激素与肝纤维化关系的探讨[D];福建医科大学;2011年
4 王艳侠;CD200/CD200R1在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及作用研究[D];北京协和医学院;2011年
5 蒋越峰;乳腺X线图象计算机辅助诊断算法研究[D];浙江大学;2001年
6 丁强;IFN-γ基因治疗大肠癌的实验研究[D];南京医科大学;2002年
7 张桂蓉;VEGF、CD44V6及Ki67在NSCLC的表达及其生物学行为的关系[D];重庆医科大学;2002年
8 张梅;海藻酸钠—氯化钡微囊化大鼠胰岛同种异体移植治疗糖尿病的实验观察及微囊免疫隔离机制的初步研究[D];南京医科大学;2003年
9 张玲燕;CD19新克隆ZCH-4-2E8鼠Ig VH和VL基因克隆及测序鉴定[D];浙江大学;2004年
10 井明晰;胃癌中maspin和突变型p53蛋白的表达及临床病理学意义[D];中国医科大学;2004年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄腾波,汪慧民,李景廉,欧星泰,方积乾,方女燕,刘克拉;鼻咽癌优化筛查方案—鼻咽癌的早期检出[J];癌症;1997年04期
2 陆哲明,柯杨;HPV与食管癌关系研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2000年04期
3 李玲,顾长海;T_(H1)/T_(H2)细胞平衡与病毒性肝炎[J];免疫学杂志;2001年03期
4 孙燕;恶性淋巴瘤的综合治疗[J];齐鲁肿瘤杂志;1996年02期
5 高玉堂;我国常见恶性肿瘤的发病趋势[J];中国肿瘤;1996年01期
6 周有尚,张思维,李连弟;我国人口死亡和恶性肿瘤死亡情况分析[J];中国肿瘤;1997年10期
7 程书钧,邹小农,王雯;中国林县食管癌营养干预试验研究进展[J];中国肿瘤;1998年03期
8 吴孟超;原发性肝癌的诊断和治疗进展[J];中国肿瘤;1999年01期
9 朱源荣;启东肝癌主要病因的综合预防研究[J];中国肿瘤;1999年07期
10 杨文献;林州食管癌高发现场的防治战略与对策研究[J];中国肿瘤;1999年09期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李崇辉,罗芸,李新建,崔忻,薛毅珑,潘长玉;微囊化胰岛B细胞系体外生长和分泌功能的研究[J];中国应用生理学杂志;2001年01期
2 张伟杰,宫念樵,李岗山,李锦文,马绪娴,左利群,郭晖;肝细胞海藻酸钡微囊生物性能的研究[J];中华实验外科杂志;2003年01期
3 袁杰利,金晓艳,代军,阎晓慧;双歧杆菌微囊化的初步研究[J];中国微生态学杂志;1994年02期
4 高英堂;微囊化转基因修饰细胞的研究进展[J];国外医学.生物医学工程分册;1999年03期
5 李淑薇,李兴强;微囊化转基因技术及与涎腺肿瘤关系密切的抑癌基因[J];国外医学.口腔医学分册;2004年S1期
6 陈冰,刘纪宁,祝希媛,刘新民;微囊化新生猪胰岛样细胞团异种移植[J];中华器官移植杂志;1995年04期
7 武林枫,翟博;微囊化移植的研究进展[J];国外医学.生物医学工程分册;2005年01期
8 马学强,刘德明,刘曾旭;微囊化组织细胞移植的研究进展[J];解剖科学进展;2003年04期
9 李凤前,陆彬,曾仁杰;喷雾干燥在药物微囊化中的应用[J];国外医药.合成药.生化药.制剂分册;1999年01期
10 张德纯,周广,赖国旗,韦克;正常动物肠菌群的微囊化及保质观察[J];中国微生态学杂志;1996年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 马建敏;刘德明;;微囊化雪旺细胞移植研究进展[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年
2 马小军;;微囊化生物型人工器官的研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
3 李文超;许瑞江;薛毅珑;;微囊化骺板细胞的制备及生物学特性的实验观察[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
4 孙洪范;杨菁;王满燕;唐丽娜;武莉;宋存先;;PLGA微囊免疫佐剂作用机理体外研究[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
5 李涛;回建峰;李学敏;方淑昌;杜智;宋继昌;;微囊牛肾上腺髓质细胞的体外研究和动物实验[A];21世纪医学工程学术研讨会论文摘要汇编[C];2001年
6 程栋;张苏河;李清菊;李凤良;栗夏莲;田晨光;李鹏诺;白悦心;;微囊猪胰岛抗淋巴细胞毒性的研究[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
7 林海龙;陈永平;郑明华;许烂漫;黄榆;胡万里;;大鼠肝细胞与人脐静脉内皮细胞混合共微囊化的体外研究[A];2009香港-北京-杭州内科论坛暨2009年浙江省内科学学术年会论文汇编[C];2009年
8 林海龙;;大鼠肝细胞与人脐静脉内皮细胞共微囊化的体外研究[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年
9 林海龙;陈永平;郑明华;胡万里;许烂漫;黄榆;;大鼠肝细胞与人脐静脉内皮细胞混合共微囊化的体外研究[A];2008年浙江省感染病、肝病学术年会论文汇编[C];2008年
10 罗军;季彤;杨雯君;田臻;钟来平;;Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 宦建新 通讯员 陈茂梁 吴杨敏;微囊发生器让癌细胞“饿死”[N];科技日报;2004年
2 陈茂梁 吴杨敏;微囊“装载弹药” “杀死”恶性肿瘤[N];健康报;2004年
3 陈茂梁;吴杨敏;微囊化功能细胞研制成功[N];中国医药报;2004年
4 刘玉莉;LJ公司微囊纺织品令人关注[N];中国纺织报;2003年
5 杨晓红;农药微囊剂型为何难推广[N];农资导报;2010年
6 张中桥;纳米微囊载体具有基因治疗潜能[N];保健时报;2005年
7 张中桥;纳米微囊载体用于基因治疗[N];健康报;2005年
8 刘道安;天津微囊生物细胞移植研究获佳绩[N];中国医药报;2004年
9 记者 白毅;中科院过程所制备出尺寸均一的微球和微囊[N];中国医药报;2006年
10 褚良银;微囊膜:交叉学科发展新热点[N];中国化工报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 潘月龙;微囊化转Maspin、IL-12基因细胞治疗恶性肿瘤的实验研究[D];浙江大学;2003年
2 孝作祥;持续释放内皮抑素及γ-干扰素的微囊化基因工程细胞的抗肿瘤研究[D];浙江大学;2003年
3 回建峰;微囊嗜铬细胞移植治疗疼痛的实验研究和临床应用[D];天津医科大学;2002年
4 张晖辉;沉默VEGF-C基因后膀胱癌T24细胞的蛋白质组学及maspin蛋白的表达和功能研究[D];中南大学;2012年
5 陈立国;微囊化转心房肽基因细胞治疗高血压的实验研究[D];四川大学;2003年
6 邢福保;辣素/明胶—阿拉伯胶—单宁微囊和纳囊的研究[D];天津大学;2003年
7 霍海蓉;脂质筏/质膜微囊在细胞膜受体信号转导中的作用[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
8 陈加平;微囊藻毒素LR对大鼠毒性效应研究[D];浙江大学;2004年
9 石鑫玮;Maspin基因的表现遗传学修饰对绒毛外滋养细胞功能的影响[D];华中科技大学;2012年
10 戴辉;新型纳米微囊复合体介导大鼠肝靶向基因转染体外及体内的实验研究[D];第四军医大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙志杰;微囊化细胞的制备冻存及微囊化胚胎干细胞的培养[D];西北农林科技大学;2004年
2 胡昭华;微囊化SD大鼠神经组织/细胞移植促进周围神经再生的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
3 马学强;微囊化异种坐骨神经移植对大鼠脊髓损伤后神经再生的影响[D];江西医学院;2004年
4 井明晰;胃癌中maspin和突变型p53蛋白的表达及临床病理学意义[D];中国医科大学;2004年
5 赵黛坚;APA微囊化杂交瘤细胞的制剂学研究[D];浙江大学;2004年
6 刘兆春;maspin、bax与宫颈癌新辅助化疗疗效的相关性研究[D];石河子大学;2010年
7 李国强;Ⅰ型胶原酶一步消化法高效、快速分离培养人头皮毛乳头细胞及微囊化培养的研究[D];汕头大学;2004年
8 宋玫;微囊化转NGF基因成纤维细胞治疗周围神经损伤的研究[D];第四军医大学;2003年
9 陆庆国;APA微囊性能观测和制备反应质控的实验研究[D];军医进修学院;2001年
10 贾宁;新型纳米微囊-VEGF复合体转染鼠成纤维细胞的体外试验研究[D];第四军医大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026