收藏本站
《浙江大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肝豆状核变性基因外显子突变研究

叶盛  
【摘要】: 肝豆状核变性(hepatolenticuler degeneration,HLD)又称Wilson病,是铜代谢障碍导致铜在体内过量沉积所引起的疾病,发病率为1/10万至1/30万,是儿科较常见的遗传代谢病。本病为多系统累及疾病,临床表现多样,所以早期诊断较困难,易致误诊漏诊,导致治疗失败。目前的研究表明基因诊断将是实现早期诊断的较好方法,对HLD基因突变特点的研究将为基因诊断方法的建立确定理论基础。 目前已明确HLD基因定位于13q14.3,cDNA序列长4398bp,含有21个外显子及20个内含子,外显子长度从77bp-1234bp,大多为200bp左右。编码1465个氨基酸。其蛋白产物为一铜转运P型ATP酶。此酶主要有三个功能区:①金属离子结合区(metal binding site domain),位于N端,有6个与特定金属结合的氨基酸保守序列,长约30个氨基酸左右。②P型ATP酶功能区(也称高度保守区),包括磷酸酶活性区、磷酸化区,此区含有ATP酶磷酸化底物天冬氨酸残基及ATP结合区。③跨膜区(也称疏水区),包括6个跨膜螺旋区和1个双亲媒性区,间插于整个多肽链中。 浙江大学博土学位论文 截止目前,己有225种基因突变类型被发现,其中错义、同义 或无义突变为144种类型,49种小缺失,12种小插入,3种调节基 因突变,l种插入和缺失同时存在的突变,2种复杂重整突变以及门 种剪接突变和 3种大片段缺失。国外学者的研究确定 14号外显子 1069 密码子为白色人种 HLD患者高频突变点,其突变方式为 HI 069Q.对 黄色人种HLD患者的初步研究表明其与白色人种外显子突变特点有 明显差异,但目前缺乏对黄色人种患者 HLD基因 ZI个外显子的全面 测序筛查,对此基因的突变形式、频度尚未有统一结论。这在理论上 很大程度制约了HLD基因诊断方法的建立。 本研究对 HLD基因 ZI个外显子进行全面性测序筛查,探索浙 江省汉族患者HLD基因突变数据,为HLD基因诊断方法的建立提供 理论论据,为 HLD临床早期诊断作一初朱探索。 第一部分HLD基因外显子突变筛查 目的 探索HLD基因外显子突变类型、分布、频度 方法 从30例浙江省汉族HLD确诊患者外周血中酚氯仿法制备DNA,针 对刀个外显子设计引物,PCR扩增各外显子,琼脂糖水平电泳后在 紫外灯下割取目的条带回收PCR产物,Sanger双脱氧链终止法测定 DNA序列。 结果 4 浙江大学博士学位论文 一、突变数目:共发现12种突变,其中5种为新突变,7种为己有 报道突变。 二、突变类型:单碱基错配11种,小缺失1种。其中错义突变8种, 同义突变2种,调节基因突变2种。 三、突变位置卜新发现突变): exon:*.123.119delCGCCG exon:-75A>C exon 2:”287A>Q D96G exon 2:巧88C>入D196E exonZ:”1216ThQ 5406A e-con3:*1366G>C,V456L exon 8 :二爿OC>Q u70L exon 8:2333G>T R778L exon 10:2495A>Q K832R exon 2975C>工*992L exon:3的SC>工S门665 exon巫7:3 646G>A,V1216 MM 四、突变频率:1216 T>T>G 26.7%,1366G>C 23.3%,2310C>G*8.3%, 2333G>T 28.3%,2*SA>G 25*%,2975C>T 26.7%,其余均为 散发突变,突变率(5%. 结论 一、-123-119dCICGCCG;287A>Q D96G;588C>A,D196E;1216T>Q 5 浙江大学博士学位论文 *06A;1366G>C,*456L为e D新发现的突变类型。 二、浙江省汉族 HLD 患者热点突变区为 121 6T>Q 5406A; 1366G>C,V456*Z 2310C>Q*770*2 2333*>T*778*2 2495*>Q *832R;2975C>丁”92L.而exon 14的3207C>A,H1069Q未 发现有突变:这与白色人种患者突变规律有很大差异。 三、浙江省汉族HLD基因外显于突变以点突变为主,偶见小缺失。 第二部分IILD基因外显子突变型与临床表型关系 目的 探索eD基因外显子突变与临床表型关系 方法 收集 3 0例浙江省汉族 HLD确诊患者临床资料(性别;发病年龄;临 床分型人 将其与6个突变热点中的5个错义突变位点相比较。 结果 一、30例患者中,男15例,女15例。发病年龄4~14岁,平均8.96 士 1.87岁。肝型 18例,神经型 8例,其它型 4例。 h、5个错义突变位点的突变患者与无突变患者临床表型差异无统计 学意义。 结论 未发现基因外显子突变类型与临床表型有相关性。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R742.4

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 张萍 ,施小六 ,凌奇荷 ,倪斌 ,殷照初;应用分子遗传学方法进行Wilson病的症状前诊断[J];中国医师杂志;2002年09期
2 刘晓青,张建明,顾学范,吴洁,张雅芬,薛和平,许燮萍,鲍克容,陈瑞冠;Wilson病ATP7B基因Arg778Leu突变与临床表型之相关性探讨[J];中华儿科杂志;1999年06期
3 黄帆,梁秀龄,王莹,徐评议,杨春水,阎振文;肝豆状核变性基因Arg778Leu突变与临床表现关系研究[J];中华神经科杂志;2000年05期
4 吴志英,王柠,林珉婷,方玲,慕容慎行;肝豆状核变性病基因第1、2和21号外显子突变的检测分析[J];中华医学杂志;2001年02期
5 马少春,梁秀龄,徐评议;中国人肝豆状核变性基因18号外显子的构象多态性[J];中国神经精神疾病杂志;2001年02期
6 闫振文,梁秀龄,杨春水,侯国庆,王莹,Toshihiro Sugiyama;PCR技术对Wilson病基因进行定点突变的研究[J];中山医科大学学报;2002年02期
7 程楠,杨任民,洪铭范,张志,胡纪原,任明山,韩咏竹,蔡永亮;PCR-酶切法检测Wilson病935密码子基因突变[J];中国优生与遗传杂志;2000年03期
8 杨斌,胡纪原,程楠,杨广娥,杨任民;中国人Wilson病ATP7B基因Thr935Met突变与临床表型的关系研究[J];中国优生与遗传杂志;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜益刚;程楠;胡纪源;;肝豆状核变性基因诊断技术的研究进展[J];安徽医学;2009年04期
2 杨春水,李建英,黄帆,梁秀龄,闫振文,丰岩清;Wilson病ATP7B基因启动子区的研究[J];中华神经医学杂志;2005年08期
3 梁志军;连建奇;聂青和;郝春秋;;肝豆状核变性肝损害18例[J];第四军医大学学报;2008年23期
4 张秀海;刘伟;;肝豆状核变性的遗传学研究及治疗进展[J];临床医学;2008年11期
5 刘铁,朱克勤,陈卫飞;肝豆状核变性的肝影像学表现[J];放射学实践;2005年01期
6 高春林;肝豆状核变性研究新进展[J];国外医学(儿科学分册);2004年02期
7 张忠胜;朱英武;徐竹;张艺凡;刘琦;方旭明;刘太双;楚兰;;肝豆状核变性ATP7B基因外显子突变研究[J];贵州医药;2008年11期
8 李晓玲;肝豆状核变性20例临床分析[J];河南实用神经疾病杂志;2002年02期
9 赵广峰;杨文明;;Wilson病的ATP7B基因突变研究进展[J];中国实用神经疾病杂志;2008年02期
10 李祥;杨文明;;肝豆状核变性基因诊断与治疗进展[J];中国实用神经疾病杂志;2012年03期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 潘艳;人肝再生增强因子结构与功能的初步研究[D];吉林大学;2007年
2 董惠钧;天蓝色链霉菌SRP途径蛋白转运的分子机制[D];浙江大学;2006年
3 童德军;湖南地区肝豆状核变性基因突变热点和多重PCR反向杂交技术研究[D];中南大学;2007年
4 易露茜;暴发性肝豆状核变性的临床、病理和基因突变研究[D];中南大学;2007年
5 孙明然;伴有肝脏损伤的肝豆状核变性患者ATP7B基因变异分析[D];吉林大学;2010年
6 程楠;WD基因突变热区和高频突变位点及特殊类型WD基因诊断的研究[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李颖倩;肝豆状核变性患者ATP7B基因突变分析[D];山西医科大学;2011年
2 杨华荣;肝豆状核变性的遗传学研究[D];中南大学;2011年
3 凃俊沂;1例成人Wilson病及其家系成员ATP7B基因突变热区的检测[D];华中科技大学;2011年
4 王利华;基于DHPLC技术的中国南方人群肝豆状核变性的突变分析[D];南方医科大学;2011年
5 何纲;一例暴发性肝豆状核变性的临床与基因突变研究[D];中南大学;2006年
6 隋佳梅;串联重复ASO探针的构建及其在肝豆状核变性诊断中的应用[D];中国协和医科大学;2007年
7 祁艾红;Wilson病基因诊断及基因型与表型关系的研究[D];华中科技大学;2006年
8 潘琴;DNase B基因亚克隆、定点突变及目的蛋白的高效表达和纯化[D];福建师范大学;2008年
9 宋璐璐;21-羟化酶基因新突变P459H和R483W的功能学研究[D];山东大学;2008年
10 陈冬梅;Wilson病患儿ATP7B基因外显子突变研究[D];广州医学院;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 任明山,杨任民,范玉新,胡纪原,韩咏竹,琚双五,蔡永亮,洪铭范;Wilson病基因第18外显子突变的初步研究[J];临床神经病学杂志;1997年03期
2 吴志英,慕容慎行,王柠,方玲,林珉婷;中国人肝豆状核变性基因第14、18和5号外显子突变及多态研究[J];临床神经病学杂志;1997年05期
3 王柠,吴志英,慕容慎行,林珉婷,方玲;经DNA测序证实的肝豆状核变性基因突变热区的研究[J];中华神经科杂志;1998年01期
4 吴志英,王柠,慕容慎行,林珉婷;肝豆状核变性基因第3~20号外显子突变及多态的DNA测序研究[J];中华神经科杂志;1998年06期
5 许月芳,范玉新,余龙,江萤,杨任民,韩咏竹,崔映宇,任明山,赵寿元;PCR直接测序在Wilson病基因第8外显子检出一个突变热点[J];中华医学遗传学杂志;1998年05期
6 施小六,凌奇荷,夏家辉,伍汉文;染色体单体型分析及突变检测在Wilson病临床诊断中的应用[J];中华医学遗传学杂志;1999年01期
7 徐评议,梁秀龄,马少春;Wilson's病8号外显子突变研究[J];中华医学遗传学杂志;1999年02期
8 杨任民,范玉新,余龙,蔡永亮,施少林,王晓平,韩咏竹,任明山,赵寿元;肝豆状核变性基因的一种新型错义突变[J];中华医学杂志;1997年05期
9 吴志英,王柠,慕容慎行,林珉婷;肝豆状核变性基因12号外显子突变特征的研究[J];中华医学杂志;1999年06期
10 梁秀龄;肝豆状核变性研究的过去、现在和将来[J];中国神经精神疾病杂志;2001年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王柠,吴志英,慕容慎行,林珉婷;肝豆状核变性基因全长外显子的DNA测序研究[J];云南大学学报(自然科学版);1999年S3期
2 吴志英,慕容慎行,王柠,方玲,林珉婷;中国人肝豆状核变性基因第14、18和5号外显子突变及多态研究[J];临床神经病学杂志;1997年05期
3 祁艾红;吴健民;崔天盆;;PCR-SSCP技术检测中国人肝豆状核变性基因第18、14外显子突变[J];中国现代医学杂志;2006年12期
4 张华军,鲍远程;肝豆状核变性基因外显子突变的研究进展[J];医学综述;2004年08期
5 陈源;耿江辉;张会丰;;肝豆状核变性分子生物学研究进展[J];临床荟萃;2006年02期
6 马少春,梁秀龄,徐评议;中国人肝豆状核变性基因18号外显子的构象多态性[J];中国神经精神疾病杂志;2001年02期
7 吴志英,王柠,慕容慎行,林珉婷;中国人WD基因第14和18号外显子的错义突变[J];中华医学遗传学杂志;1999年02期
8 赵鹏,张本恕;肝豆状核变性基因突变研究进展[J];国外医学.遗传学分册;2004年01期
9 杜益刚;程楠;胡纪源;;肝豆状核变性基因诊断技术的研究进展[J];安徽医学;2009年04期
10 薛京伦;突变研究与人类基因组计划[J];癌变畸变突变;1997年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 全锦花;杨双雨;张新超;杨泽;;鸟苷素、尿鸟苷素外显子基因多态性与高血压关系的研究[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
2 程楠;杜益刚;王训;胡纪源;韩咏竹;;中国人Wilson病患者ATP7B基因高频突变位点与临床表型及中医证型的关系研究。[A];2010中国医师协会中西医结合医师大会摘要集[C];2010年
3 周玲玲;李岩;赵宗胜;向春和;刘秀霞;梁杜;廖和荣;;鸡MAOA基因外显子6的SNP分析[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
4 包文斌;叶兰;朱景;潘章源;黄小国;吴圣龙;;猪TLR4基因外显子1、2多态性的PCR-SSCP分析[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
5 刘奇才;欧启水;;CFTR基因10号外显子区异常与汉族青少年型慢性胰腺炎发病的关系[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
6 周向平;张成;粱秀龄;;Charcot-Marie-Tooth病Cx32基因突变研究[A];第四次全国中西医结合神经系统疾病学术研讨会论文集[C];2002年
7 张利绒;罗辽复;;线虫基因组外显子与内含子特征研究[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年
8 唐辰虹;刘荣玉;;剪接因子SR蛋白的hnRNPA1对糖皮质激素受体外显子9选择性剪接的影响[A];中华医学会第五次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第一次大会论文汇编[C];2006年
9 王婷婷;吴琰婷;钱羽力;徐键;黄荷凤;;超排卵周期卵巢低反应与骨形成蛋白-15(BMP-15)外显子2基因多态性关系[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
10 富显果;张朵;张晓;柯龙凤;严爱贞;朱忠勇;兰风华;;脆性X智力障碍1基因新型可变剪接外显子和剪接异构体的鉴定[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘远达;我科学家揭开白猴白化之迷[N];新华每日电讯;2000年
2 刘海英;外显子测序同样可以准确找出致病基因[N];科技日报;2009年
3 记者 李天舒;人类外显子区域精细遗传图谱绘出[N];健康报;2010年
4 记者 冯卫东;重复DNA可能会进化成外显子[N];科技日报;2008年
5 肖生祥;迟发性PC-Ⅱ基因突变研究结题[N];中国医药报;2003年
6 黄守勤;福建发现难治性高血压家族[N];健康报;2007年
7 解放军307医院肿瘤研究室 朱运峰鲍云华;寻找靶向药物疗效的预测方法[N];健康报;2007年
8 衣晓峰 聂松义 李华虹;哈医大二院发现先天性白内障新致病位点[N];中国医药报;2006年
9 衣晓峰 本报记者  李华虹 乔蕤琳;专家研究发现先天性白内障新致病位点[N];中国中医药报;2006年
10 记者 刘云涛;北大探索脂蛋白脂酶缺陷发病机理[N];中国医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 叶盛;肝豆状核变性基因外显子突变研究[D];浙江大学;2003年
2 徐佳熹;基于比较基因组学和mRNA高通量测序的可变剪接外显子进化研究[D];复旦大学;2011年
3 李志军;EGFR表达与EGFR基因突变在非小细胞肺癌中的临床意义[D];吉林大学;2007年
4 郭秀海;周期性麻痹的临床及相关基因突变研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
5 李立宏;帕金森病Parkin基因遗传多态性的相关性研究[D];第四军医大学;2005年
6 王艳萍;尿道下裂相关基因的突变研究[D];中国协和医科大学;2003年
7 穆新林;EGFR酪氨酸激酶结构域突变检测以及PTEN表达下调对EGFR抑制剂敏感性的影响[D];中国协和医科大学;2005年
8 刘源;全基因组外显子测序发现逆向性痤疮的致病基因NCSTN[D];安徽医科大学;2012年
9 张鑫;全基因组外显子测序发现Marie Unna遗传性少毛症致病基因EPS8L3[D];安徽医科大学;2012年
10 薛慧良;猪IGF-I基因及MyoG基因分子遗传多态性的研究[D];山西农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨锐林;家族性隐睾外显子组测序分析[D];汕头大学;2011年
2 季明亮;先天性脊柱侧凸患者中胚层后方同源物2基因外显子突变的筛查[D];南京大学;2012年
3 孙锋;MicroRNAs对家蚕丝蛋白轻链的调控及家蚕14-3-3ζ基因互斥外显子选择机制研究[D];浙江大学;2011年
4 岳燕;河西绒山羊DQB2基因第2、3外显子多态性与流产性状关联分析[D];甘肃农业大学;2012年
5 谭世明;采用外显子组测序确定TSC22D2为多癌家系疾病易感基因的初步研究[D];中南大学;2011年
6 杨宇虹;脂蛋白脂肪酶基因调节区和外显子2~4的突变研究[D];天津医科大学;2003年
7 夏华强;HSL基因外显子Ⅰ多态性及MC4R基因与猪经济性状相关性研究[D];湖南农业大学;2004年
8 廖娟;脆性X综合征致病基因FMR1一个新的外显子及其鉴定[D];福建医科大学;2011年
9 张雄;利用PCR-SSCP检测ZEN对大鼠睾丸中p53基因第八外显子突变的研究[D];湖南农业大学;2004年
10 李世芹;ISS患儿GHR基因外显子4、6、10单核苷酸多态性的研究[D];苏州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026