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《浙江大学》 2003年
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系统性红斑狼疮患者血清基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物的检测和临床意义

殷文浩  
【摘要】: 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一组在结构上具有极大同源性、能降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白的内肽酶的总称。金属蛋白酶组织抑制物(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)是MMPs的内源性特异性抑制因子,TIMPs以1∶1的比例与MMPs形成MMP-TIMP复合体,阻断MMPs与底物的结合,也可与酶原结合阻止其活化。MMPs-TIMPs是参与ECM降解和重建的主要蛋白酶系统,它参与了机体多种生理和病理过程,包括胚胎发育、妊娠分娩、组织重建修复、炎症反应以及肿瘤侵袭和转移等。基质金属蛋白酶—9(MMP-9)是基质金属蛋白酶家族的重要成员,又称明胶酶B(gelatinase B),是MMPs家族中分子结构最复杂者,主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型胶原、明胶、纤维连接蛋白和弹性蛋白、粘结蛋白、层粘连蛋白等,TIMP-1是其主要抑制剂。MMP-9主要由中性粒细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞等分泌,能降解完整的基底膜,在炎症细胞的移行和肿瘤细胞的侵袭中起了重要作用。 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种病因未明的自身免疫性结缔组织病,表现为体内产生大量的自身抗体,受累脏器出现免疫复合物沉积及各种白细胞浸润,引起一系列炎症反应,并最终导致多系统多脏器 浙江大学硕士学位论文 损害。炎症细胞浸润、血管炎性损伤、细胞外基质代谢紊乱和异常沉积是狼疮 性肾小球病变发生机制的一个重要环节,由此推测,MMP-9和TIMP。1可能在 SLE的病理生理过程中发挥作用。为了解MMPg和 TIMP.1在 SLE发病机制中 的作用,我们检测了46例SLE患者的血清MMP-9和TIMP-l水平,并探讨其 临床意义。 材料和方法 一、研究对象 包括 SLE患者和正常对照组,SLE诊断符合美国风湿病协会 1982年修订 的诊断标准。共收集到临床资料较完整的SLE血清标本46例,其中女性42例, 男性4例;平均年龄(30.gi士13.90)岁(11~61岁),平均病程(53.9土刀3) 个月门 至 30年L其中 11例经正规皮质类固醇激素治疗侪量相当于泼尼松 40~80mg/d)的患者在治疗后3~4周再次留取血清标本。正常对照组30例,取 自健康体检者,其中女性27例,男性3例,平均年龄(30.57士5.55)岁(ZI~ 40岁),两组在性别和年龄构成上差异无显著性。 根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)对SLE患者的疾病活动程度进行评分, 参照郑敏等标准判断是否为疾病活动期,以尿蛋白 30.59/24h作为有无肾损害 的判断标准。 二、实验方法 血清 MMP-9及 TIMP-l检测:采用 MMP.9试剂盒和 TIMP.l试剂盒(均 购自美国 R&D Systems Inc.L应用 ELISA方法,实验操作严格按试剂。说明书 进行。 三、统计方法 所有数据均在SPSS10.0统计软件包上处理。血清MMP-9和TIMP-l含量 为偏态计量资料,用中位数和四分位数(25%、75%)表示,其组间差异比较 用Mann-Whitney U检验,治疗前后比较用Wilcoxon检验,与某些临床和实验 指标的相关性采用Spearman相关和线性回归(经对数转换)分析方法,显著性 二 浙江大学硕士学位论文 检验水平口=0.05。 结 果 一、SLE患者组与对照组血清MMPg、TIMP-l水平的比较 1.SLE患者组血清MMP-9水平明显低于正常对照组,其差别具有非常显 著的统计学意义(P<0刀01),而刀*卜1水平两组差异无显著性(尸>0.05)。 2.相关分析表明,SLE患者组MMP*9与TIMPq水平无明显相关关系(r =0刀06,P>0刀5),正常对照组 MMP-9与 TIMP-l水平也无明显相关关系什一 一0刀52,P>0乃5)。 二、血清MMP习、TIMP*水平与SLE疾病活动程度的关系 l.SLE活动期患者MMP-9水平明显低于非活动期(P<0.05),而TIMP-l 水平活动组与非活动组比较差异无显著性(P>0刀5)。 2.相关分析显示,SLE患者血清MMP-9水平与SLEDAI评分呈负相关 (r=一0.41,P<0刀1〕,血清刀*卜1水平与8比*M评分呈正相关(r—0.3二, P<0.05)。 三、不同临床特点肛E患者血清MMP-9、TIMP-l水平的比较 肾损害组患者血清**L9水平显著低于无肾损害组患者(P<O.01),而 关节炎组、蝶形红斑组和光敏组患者与无上述表现的患者组之间血清MMPg 水平差异无显著性(P> 0刀5):n*P1水平在肾损组与无肾损组、关节炎组与 无关节炎组、蝶形红斑组与无蝶形红斑组、光敏组与无光敏组之间比较差异无 显著性(P>0刀5)。 四、SLE患者血清MMP-9、TIMPl水平与兔疫学指标的关系 1.血清MMP-9水平在抗dsDNA阳性与阴性组、抗Sin阳性与阴性组、 抗RNP阳性与阴性组、抗SSA阳性与阴性组、抗SSB阳性与阴性组、IgG增 高组与非lgG增高组之间比较差异无显著性(尸均>0刀5),而在补体*3降低组 **A9水平低于非?
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R593.241

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