紫杉醇联合阿霉素、阿糖胞苷对白血病细胞株（K562、HL-60）增殖抑制作用的研究

【摘要】： 背景 紫杉醇(Paclitaxel，taxol)是一种作用于微管的广谱抗癌药，目前已在进展期恶性实体瘤如卵巢癌、乳腺癌和肺癌中得到了广泛运用，但国内尚未见其应用于临床治疗白血病的报道，已有体外实验证实紫杉醇对包括K562、HL-60等多种白血病细胞具有增殖抑制作用，可用于治疗急性白血病，但国外Ⅰ期临床研究的报道其单独治疗白血病的结果仍不令人满意，目前关于紫杉醇与常用白血病化疗药物如阿霉素、阿糖胞苷联合应用对白血病细胞的增殖抑制作用未见报道。本实验旨在研究紫杉醇和阿霉素、阿糖胞苷单独和联合应用对K562、HL-60细胞的增殖抑制作用，以便为临床用药提供依据。 材料与方法 紫杉醇注射液由四川太极制药有限公司惠赠；阿霉素为浙江海正药业股份有限公司产品；阿糖胞苷为上海华联制药有限公司产品。人急性红白血病细胞株K562细胞、急性粒细胞白血病细胞株HL-60细胞均由浙江大学医学院肿瘤研究所提供。本实验分单一用药实验和联合 浙江大学硕士学位论文 用药实验两部分，单一药物作用实验设紫杉醇实验组、阿霉素实验组、 阿糖胞昔实验组和空白对照组，紫杉醇的浓度范围为 0．125＊ u g／mL、 阿霉素的浓度范围为 0．31 25J u g／mL、阿糖胞苦的浓度范围为 264 u g／mL。联合药物作用实验分为 4组即紫杉醇邓 霉素组、紫杉醇叩 糖胞苦组、紫杉醇＋阿霉素＋阿糖胞昔组和空白对照组。根据单一用药 对 K562、HL60作用的实验结果，选择抑制率在 10刁0o左右的阿霉素、 阿糖胞昔浓度作为联合用药的浓度，阿霉素浓度为 0．3 u g／mL，阿糖胞 昔浓度为 2 u g／mL，在各组加入不同浓度的紫杉醇。药物作用时间均 为72h，分别在作用24、48、72h后用MTT法测定紫杉醇、阿霉素、 阿糖胞昔单独和联合应用对K562、HL．60细胞的增殖抑制作用，计算 抑制率并求得半数抑制浓度门C50入实验结果用SPSS10刀for windows 统计软件分析处理，IC50采用加权直线线性回归法求得，两组间抑制 率比较采用矿检验，以P＜o．05为差异具有显著性意义。 结 果 单独用药实验结果示，紫杉醇、阿霉素和阿糖胞苦对K562、HL60 均有不同程度的增殖抑制作用，并呈明显的浓度．效应和时间－效应关 系。紫杉醇、阿霉素和阿糖胞昔作用 K562细胞 72h的 IC50分别为 0．11 n g／mL、0．18 u g／mL、3．71u g／mL，作用 HL－60细胞 72h的 IC50分别 为 0．37 u g／mL、0．22 u g／mL、1．93 u g／mL。由此可见紫杉醇对 K562细 胞的抑制作用大于HL60细胞。 联合用药实验结果显示，紫杉醇联用阿霉素或阿糖胞昔或三药联 用后对K562、HL60 细胞株的抑制率显著增加，明显高于单一用药 （P＜0刀5人 三药联用组的抑制作用也大于两药联用组，与紫杉醇联用 阿糖胞昔组相比其抑制率有显著差异什＜0刀5X但与紫杉醇联用阿霉素 组相比无显著差异仔＞0刀5X提示三药联用组作用与紫杉醇联用阿霉素 组相近。当 0．3 n g／mL阿霉素联用 0．125 u g／mL紫杉醇后其对 K562的 抑制率能从25．31％提高到55．49％，其作用效果相当于单用阿霉素两倍 二 浙江大学硕士学位论文 剂量的作用强度，当紫杉醇浓度提高到 0．5 n g／mL，其作用相当于单用 阿霉素八倍剂量的作用强度。 结 论 紫杉醇、阿霉素和阿糖胞昔对K562、HL－60均有一定的增殖抑制 作用，并呈时间和浓度依赖性。紫杉醇对K562 细胞的抑制作用大于 HL60细胞，紫杉醇与阿霉素或阿糖胞苦联合应用可明显增强对K562、 HL＊0 的增殖抑制作用，小剂量的紫杉醇即可明显提高阿霉素的作用 强度。我们认为紫杉醇可作为白血病治疗中可选择的药物之一，联合 运用紫杉醇与阿霉素可望成为治疗白血病新的有效的方案。