收藏本站
《浙江大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

端粒结合蛋白在急性白血病细胞中的表达、突变和对端粒酶作用及机理研究

孙洁  
【摘要】: 多种研究显示,白血病与端粒酶活性密切相关。在白血病细胞株和白血病病人的细胞中都发现有端粒长度不同程度的缩短伴有端粒酶活性增高。但是端粒酶活性增高的机理尚不清楚。已知端粒酶活性受多种途径调控,其中端粒结合蛋白是近年来发现的一个新的调控途径。自第一个端粒结合蛋白人端粒重复序列结合因子TRF1于1995年被发现以来,已陆续有近10个端粒结合蛋白被发现,它们分布在端粒及周围,参与对端粒三级结构的维持、有丝分裂和细胞周期调控、染色体损伤修复等多项重要细胞生命活动的调控。其中主要的4个端粒结合蛋白TRF1,Pinx1,tankyrase和tankyrase-2对端粒酶活性具有调控作用,TRF1和Pinx1是端粒酶活性的负向调控因子,而tankyrase和tankyrase-2是正向调控因子。端粒结合蛋白在急性白血病细胞中的表达及与端粒酶活性的关系尚不清楚。 在本项研究中以这两对端粒酶活性的正向和负向调控因子为研究对象,系统研究它们在急性白血病细胞中的表达及与端粒酶活性的关系。进一步通过分析TRF1在恶性血液病细胞株细胞中的突变,从基因组水平探讨TRF1表达下降的原因。再进一步在急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4细胞的分化模型中分析4个端粒结合蛋白的表达改变及与端粒酶活性的关系,深入探讨端粒结合蛋白对端粒酶活性的可能调控机理。端粒结合蛋白在急性白血病细胞中的表达和与端粒酶活性的关系未见系统研究报道,TRF1在白血病细胞中的突变的分析未见报道,端粒结合蛋白在ATRA诱导的NB4细胞分化过程中的表达和调控的研究也未见报道。 本研究分三部分。 第一部分:以荧光定量RT-PCR技术定量检测4个端粒结合蛋白在30例初发的急性白血病标本中的mRNA水平的表达,并分析与端粒酶逆转录酶hTERTmRNA表达的关系。 30例急性白血病均为初发病人,其中男18例,女12例;平均年龄32岁;急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)17例,急性淋巴细胞性白血病(ALL)13例;初诊时外周血白细胞计数大于100×10~9/L的10例,小于100×10~9/L的20例;染色体检查为异常核型的14例,正常核型的16例。 浙江大学博士学位论文 hTE盯在急性白血病细胞中的表达(0.00244,O一0.0320)明显高于正常人骨髓单个核细胞 (2.79x 10一4,o一0.0078)(P0.00一)。但在ANLL和ALL细胞中对比表达无明显差异(P=0.742)。 TRFI在急性白血病细胞中的表达(0.0!71,0.0127一0.193)明显低于正常人骨髓单个核细胞 (0.0457,0.00839~0.262)(P=0.019),其中在ANLL细胞中的表达(0.0126,0.0127~0.0546) 明显低于正常人骨髓单个核细胞中的表达(P0.001),但在ALL细胞中的表达(0.0745,1.92 x 106一0.193)与正常人骨髓单个核细胞比较无显著性差异(P=0.761),ANLL细胞中的表达 明显低于ALL细胞中的表达(P=0.001)。相关性分析显示TRFI和hTERT在急性白血病细胞 和正常人骨髓单个核细胞中的表达无显著相关性(二一0.!73,P二0.207)。Pinxl在急性白血病细 胞中的表达(0 .003 12,542 x10一4一0.024)明显高于正常人骨髓单个核细胞(7 .89x!o一4,o一 0.00863)(P=0.002)。在ANLL和ALL细胞中的表达无显著性差异(p=0.869)。pinxl不IJ hTERT 在急性白血病细胞和正常人骨髓单个核细胞中的表达呈正相关(r=o.2%,p=0 .028)。tallkyrase 在急性白血病细胞中的表达(0.0209,O川06~0.0997)也明显高于正常人骨髓单个核细胞 (0.00288,2.65 X 10一4一0.0288)(P0.00一),在ANLL和ALL细胞中的表达无显著性差异 (P=0 .363)。tankyrase和hTE盯在急性白血病细胞和正常人骨髓单个核细胞中的表达呈正相 关(二0.454,P0.001)。tankyrase一2在急性白血病细胞中的表达(0.00493,2.4sx一。一4一0.0443) 与正常人骨髓单个核细胞(0 .00277,2.60 x 10-4一0.0!22)中的表达无显著性差异(P刃.056), 在ANLL和ALL细胞中的表达无显著性差异(P二0.902)。tankyrase一2和hTE盯在急性白血病 细胞和正常人骨髓单个核细胞中的表达无显著相关性(r=0.179,P=0.1引)。本研究还将30例急 性白血病按初诊时外周血白血病总数大于100xl扩和小于!00x!00分为高细胞性白血病和非 高细胞性白血病两组。hTERT和4个端粒结合蛋白在两组中的表达均无显著性差异。提示端 粒酶活性及4个端粒结合蛋白的表达水平与高细胞性白血病无关。本研究根据白血病细胞染 色体核型分析分为染色体为异常核型和正常核型两组,结果hTERT和4个端粒结合蛋白在两 组中的表达均无显著性差异。 第二部分:由于4个端粒结合蛋白中唯有TRFI在急性白血病细胞中的表达是下降的,为 了探究其表达减少的原因,本研究进一步检测了10个恶性血液病细胞株中TRFI mRNA的表达 及突变情况。恶性血液病细胞株包括髓细胞系白血病细胞株K562、HL一60、U937、NB4、T日P一l、 HEL、Dami;T淋巴细胞性白血病细胞株6T一CEM、Jurkat和B细胞淋巴瘤细胞株Raji。荧光 定量R1一PCR检测TRFI在恶性血液病细胞株细胞中的表达(0.0338,0.0108~0.0749)明显 低于正常人骨髓单个核细胞(0.0493,0.0369~0.128)(P=0.004)。其中3个淋系恶性血液 病细胞株细胞中TRFI的表达(0.0447士0.0280)低于经单
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R733.71

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 罗瑛,陈飞华,周平坤,孙志贤,吴祖泽;白血病细胞与正常外周血淋巴细胞的PARP活性及本底DNA链断裂的比较研究[J];中国实验血液学杂志;1998年01期
2 张艳,刘菽秋,屈艺,李熙鸿,汪凤兰,董薇,刘柏林;急性白血病端粒酶逆转录酶基因表达的初步分析[J];中华医学遗传学杂志;2003年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周海岚,俞康,陈怡;白血病患者WT1基因表达及其临床意义[J];癌变.畸变.突变;1999年05期
2 解新良,庞辉,赵义帮;再障生血片联合雄性激素治疗再生障碍性贫血疗效观察[J];安徽中医临床杂志;1999年02期
3 裘愉润;;参芪五味子片治疗慢性原发性血小板减少性紫癜188例[J];中医药临床杂志;2006年06期
4 蒋长顺,贺学姣;67例多发性骨髓瘤患者尿蛋白分析[J];安徽卫生职业技术学院学报;2004年01期
5 余先祥;黄建尧;;全血细胞减少性急性白血病25例分析[J];安徽卫生职业技术学院学报;2006年02期
6 丁邦胜,李霞,吴竟生,潘理明;蛇毒因子溶血试验与酸溶血试验对PNH的诊断意义[J];安徽医学;2001年01期
7 严红;急性白血病缓解率、早期死亡相关因素分析[J];安徽医学;2005年04期
8 汪福康;胡琛亮;;DA联合CAG方案治疗急性髓细胞白血病临床观察[J];安徽医学;2008年02期
9 李伶俐;;71例单一白细胞减少患者骨髓检查分析[J];安徽医学;2008年02期
10 方国全;红细胞生成素治疗恶性肿瘤贫血的疗效观察[J];安徽医药;2002年04期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 赵有芳;朱晓宣;余涛;李从荣;敖华;陈涛;张家新;;环孢菌素A治疗慢性再障临床观察[A];中国水利电力医学科学技术学会2007年内科、儿科学术交流会暨宜昌市医学会血液疾病诊治技术提高班论文汇编[C];2007年
2 覃薇;潘红飞;黄惊鸿;;葡萄糖六磷酸脱氢酶活性对地中海贫血的辅助诊断价值探讨[A];中国优生优育协会第四届全国学术论文报告会暨基因科学高峰论坛论文专辑[C];2008年
3 赵朴;;以THP为主化疗方案治疗血液系统恶性肿瘤90例临床观察[A];浙江省中西医结合学会血液病专业委员会第二次学术年会暨省级继续教育学习班资料汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘振华;基于树突状细胞途径的多发性骨髓瘤CTLs诱导及其免疫生物学特征研究[D];第一军医大学;2001年
2 孙金芳;活血祛瘀法治疗真性红细胞增多症临床研究[D];广州中医药大学;2002年
3 申咏梅;荧光原位杂交(FISH)技术在骨髓增生异常综合征(MDS)中的应用[D];苏州大学;2002年
4 佟红艳;骨髓增生异常综合征(MDS)细胞甲基化模式异常与三氧化二砷对其作用及机理研究[D];浙江大学;2003年
5 于锦香;淋巴瘤、白血病和多发性骨髓瘤与人类疱疹病毒8的相关性研究[D];中国医科大学;2003年
6 张金巧;血管新生和血管内皮细胞生长因子在急性髓系白血病中的意义及三氧化二砷的抗血管新生作用[D];河北医科大学;2003年
7 唐晓文;微卫星标志物在异基因造血干细胞移植中的应用[D];苏州大学;2003年
8 王俊祥;白介素-12、干扰素-γ在急性白血病中的意义与树突状细胞诱导特异性抗白血病免疫应答的体外研究[D];河北医科大学;2004年
9 孟建波;多发性骨髓瘤中血管新生及血管内皮细胞生长因子表达和三氧化二砷的抗血管新生作用[D];河北医科大学;2004年
10 阴怀清;急性白血病NO、NOS、VEGF、IL-6、IFN-γ、血小板膜糖蛋白及RP水平研究及临床意义[D];山西医科大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 申振涛;斑蝥素干预急性髓细胞性白血病端粒酶逆转录酶(hTERT)甲基化的研究[D];山东中医药大学;2010年
2 徐冰;低磷奶牛红细胞膜超微结构变化的研究[D];东北农业大学;2000年
3 张国香;再生障碍性贫血发病机理的探讨以及环孢霉素治疗的临床观察[D];广西医科大学;2000年
4 宋英儒;急性白血病骨髓的MRI定性和定量研究[D];广西医科大学;2000年
5 杜庆锋;HT联合方案治疗CML的临床疗效探讨及诱导K562细胞凋亡的实验研究[D];第一军医大学;2000年
6 欧阳敏;Ph染色体与bcr/ab1融合基因的检测在CML中的临床意义[D];江西医学院;2000年
7 丁伟荣;急性白血病联合药敏试验与临床应用研究[D];江西医学院;2000年
8 蓝建平;nm23、CD_44和Ki-67在恶性淋巴瘤中的表达及临床意义[D];浙江大学;2001年
9 吴功强;血液病患者骨髓巨核系祖细胞体外培养的临床研究[D];广西医科大学;2001年
10 高维强;尿激酶受体检测方法的建立及其临床应用[D];苏州大学;2001年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 罗瑛,孙志贤,杨瑞彪,张振声;辐射后单个细胞DNA结构变化的定量检测[J];生物化学与生物物理进展;1994年05期
2 罗瑛,孙志贤,夏寿萱;三种细胞辐射敏感性相关酶的作用研究[J];中华放射医学与防护杂志;1996年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林坚,陈皓,白云秀,金蕊,张彬,黄翠芬,黄君健;端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域的鉴定[J];军事医学科学院院刊;2004年04期
2 倪万茂;人端粒重复序列结合蛋白研究进展[J];国外医学.输血及血液学分册;2003年06期
3 周献锋;AT细胞中端粒的研究进展[J];国外医学.遗传学分册;2003年05期
4 谢谦;端粒维持机制及肿瘤治疗新策略[J];肿瘤学杂志;2004年02期
5 郭聪琳,陆涛,倪沛洲;端粒/端粒酶——抗肿瘤药物设计的新靶点[J];药学进展;2002年02期
6 刘明;端粒、端粒酶的研究与人类肿瘤[J];首都师范大学学报(自然科学版);2002年01期
7 蒋玉艳,何敏,杨莉;抗癌药物的新靶点—端粒及端粒酶抑制剂的研究进展[J];现代预防医学;2005年05期
8 陈泉;影响端粒酶活性的相关因素[J];现代医学;2002年02期
9 苑昕;端粒酶与肿瘤生物学研究[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;1999年01期
10 张正军,周云峰;端粒、端粒酶与肿瘤[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈成彬;宋文芹;;32种植物端粒组构信息的初步研究[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
2 叶静;Christelle Lenain;Serge Bauwen;Arturo Londono;Marie-Joseph Giraud-Panis;吴云林;Eric Gilson;;TRF2结合Apollo(DCLRE1B)在端粒保护中的作用机制[A];第二十一届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨国家级中西医结合消化系统疾病新进展学习班论文汇编[C];2009年
3 谭铮;郝玉华;;端粒末端复制与细胞分裂控制[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年
4 蓝建平;黄河;朱园园;孙洁;来晓瑜;李静远;余建;罗依;施继敏;林茂芳;;Tara,一个可能人端粒结合因子TRF1相互作用蛋白的分离和克隆[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
5 蓝建平;黄河;朱园园;孙洁;来晓瑜;李静远;余建;谭亚敏;施继敏;林茂芳;;人端粒结合因子TRF1在端粒酶阳性和阴性细胞中定位与周期性表达的研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
6 施继敏;丁伟;黄河;张志根;汤立旦;林茂芳;;端粒重复序列结合因子(TRF1)在肾脏肿瘤中表达水平的研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
7 王皓月;沈鹤柏;费俭;;磁性纳米粒子-dsDNA复合物的制备及其在分离dsDNA结合蛋白方面的应用[A];中国化学会第十一届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2007年
8 陈兆文;张铮铮;;生长激素治疗宫内发育迟缓矮小患儿的疗效与胰岛素生长因子-1、胰岛素生长因子结合蛋白-3的关系[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
9 余优成;张志愿;陈万涛;周晓健;潘红芽;张萍;徐骎;;erbB-3结合蛋白ebp1对舌鳞癌细胞系Tca8113抑制作用的实验研究[A];2004年口腔颌面肿瘤基础研究学术研讨会会议日程及论文集[C];2004年
10 刘定干;孙丽;;C/EBPbeta mRNA 3'UTR专一结合蛋白的鉴定及其生物功能的探讨[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 袁玥;非凡意义的端粒[N];南方周末;2009年
2 张田勘;2009年诺贝尔医学奖:揭示衰老和癌症的秘密[N];大众科技报;2009年
3 张孔生;刘院士为你解读“端粒”[N];扬州日报;2009年
4 记者 熊琳;端粒和端粒酶:解开人类衰老及癌症之谜[N];新华每日电讯;2009年
5 张田勘;揭开衰老与癌症的奥秘[N];中国医药报;2009年
6 张田勘;解开“科学算命”真相[N];大众科技报;2011年
7 本报记者 陈丹;让生命之舟减速[N];科技日报;2010年
8 记者 潘治;诺奖成果或助解衰老与癌症之谜[N];新华每日电讯;2009年
9 张孔生 刘世领;克癌之难终于有望破解[N];新华日报;2009年
10 特约记者 倪黎冬 通讯员 章米力;“盖帽蛋白”如何保证DNA复制不出错[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙洁;端粒结合蛋白在急性白血病细胞中的表达、突变和对端粒酶作用及机理研究[D];浙江大学;2004年
2 李俊;植物端粒结构分析[D];武汉大学;2010年
3 王瑜;渗透压反应元件结合蛋白在晶状体的作用[D];中国医科大学;2003年
4 吴东林;端粒重复扩增程序(TRAP)的改进和应用以及端粒酶酶学性质研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
5 陈伟;端粒酶抑制后存活喉癌细胞端粒机制和关键蛋白的研究[D];武汉大学;2010年
6 胡晓年;正常人肝及人肝癌细胞中N-ras基因的表达调控[D];中国协和医科大学;1991年
7 李晨;AF-1与UG结合蛋白相互作用及生物学意义的初步研究[D];中南大学;2008年
8 张如刚;端粒酶活性与肝癌细胞生长的控制[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2002年
9 周平;端粒相关蛋白编码基因的克隆及功能分析[D];第三军医大学;2002年
10 汉丽梅;鸡端粒相关序列克隆与定位及MDV特异序列定位MD宿主细胞的研究[D];中国人民解放军军需大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 程旭;急性白血病患者端粒、端粒酶及其相关因素的研究[D];苏州大学;2003年
2 阳芳;人胚肺成纤维细胞端粒DNA损伤对端粒缩短的贡献研究[D];武汉大学;2003年
3 马吉勇;胸腔积液端粒酶活性和催化亚单位检测的诊断价值研究[D];安徽医科大学;2002年
4 戴文颖;端粒酶活性在不同类型胃疾病中的表达及其与幽门螺杆菌感染相关性的研究[D];中国医科大学;2002年
5 王勇;端粒酶活性在肺癌患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2004年
6 王一;三氧化二砷等药物对K562细胞株端粒—端粒酶系统作用机制的研究[D];大连医科大学;2003年
7 潘东风;人乳腺癌细胞株端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性的关系[D];武汉大学;2004年
8 赵立新;松花粉抗衰老作用的实验研究[D];第一军医大学;2004年
9 刘建河;膀胱肿瘤尿脱落细胞端粒酶活性的实验研究[D];江西医学院;2000年
10 张静;端粒酶在卵巢颗粒细胞中的表达及其调控机理的研究[D];江西医学院;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026