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《浙江大学》 2004年
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CD151在非小细胞肺癌组织中的表达及茶多酚对CD151表达水平的影响

安舟  
【摘要】: 前言:原发性支气管肺癌是一种严重威胁人民健康和生命的恶性肿瘤,其发病率和死亡率在世界范围内占肿瘤病因的第一位。在我国,肺癌平均死亡率占肿瘤死亡率的第三位,在大城市则位居首位,其发病率也一直呈迅速上升趋势。降低肺癌病死率的策略在于早期诊断和完善的治疗方案。 肺癌的增殖和转移是一个由多因素参与,具有多个环节的过程。在信号转导通路上各组分异常均可导致细胞在增殖、凋亡、移行、粘附等各个环节上产生相应变化,并进一步与肿瘤发生发展相关联。四次跨膜结构超家族(TM4SF)成员广泛参与构成跨膜信号转导通路,在人体多种组织细胞均有表达,其成员参与调控细胞信号转导、细胞增殖及移行等过程。其中,CD9、CD82等大多数TM4SF成员被发现与肿瘤进展和预后呈负相关,而CD151作为TM4SF中的新成员,却被发现与肿瘤进展预后呈正相关,并且是TM4SF中唯一的癌基因。CD151在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义在此前尚未得到充分阐述。 浙江大学硕士学位论文 茶多酚是茶叶的提取物,其主要成分包括黄烷醇、黄烷双醇、黄酮类和茶多 酚酸类,其中大部分是黄烷醇。茶多酚具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤作用。茶多酚 抗肿瘤的分子机理大致在以下几点:对信号转导的影响;对基因表达的调控;诱 导肿瘤细胞凋亡;对肿瘤细胞周期及DNA合成的影响等。CD151作为细胞信号 转导通路的成员,其表达水平是否会受到茶多酚作用的影响尚未见报道。 本课题应用流式细胞术对38例非小细胞肺癌患者和20例良性肺部病变患者 手术标本进行CD151表达水平检测,并分析其与肿瘤细胞增殖活性以及患者临床 资料之间的联系。本课题还建立了茶多酚体外抑瘤模型,分析茶多酚对肿瘤细胞 株表面CD151表达水平的调控作用。 目的:探讨cD 151表达水平与NscLc组织细胞增殖活性之间的联系;探 讨CD 151表达水平与NSCLC临床资料的相关性;建立茶多酚作用于肿瘤细胞的 体外模型:探讨茶多酚在体外实验中对肿瘤细胞的作用及对CD151表达含量的 影响及相关机理。 方法:新鲜手术切除标本来自2002年5一7月浙江大学医学院附属第一医 院胸外科手术患者,共58例,其中NSCLC38例,良性病变20例。所有病例 的组织学标本均系首次切除的组织,术前均未行放射及化学治疗。术中每例患者 取组织标本3块:肿块组织,距肿块边缘scm肺组织(肿块边缘组织),距肿块 边缘10cln肺组织(肿块远隔组织)。根据术后病理结果,NSCLC患者取上述三 块组织进行检测,良性病变患者仅取肿块组织进行检测。用物理方法将组织制成 细胞悬液后分两组检测:一组用流式细胞仪测定经藻红蛋白(PE)红色荧光标 记的CD151平均荧光强度,并对其表达水平进行半定量分析,另一组经碘化丙 浙江大学硕士学位论文 睫(PI)溶液处理后用流式细胞仪测定细胞增殖指数(PI)和S期分数(SPF)。 培养肿瘤细胞株:PG(人肺癌细胞株)细胞,KB(人口腔上皮癌细胞株) 细胞等,建立茶多酚作用于肿瘤细胞的体外模型,通过四哇盐比色试验(MTT 法)测定不同浓度茶多酚对两种肿瘤细胞株的杀伤作用。应用流式细胞仪检测经 茶多酚作用后PG细胞、KB细胞表面CD151表达水平(平均荧光强度)的变化 情况。 检测结果采用SPSS10.0统计软件包进行分析,统计数据以见士S表示,显 著性检验用t检验和方差分析。有关数据进行相关性分析。 结果: 1.细胞膜CD151蛋白的表达:癌肿组织细胞CD151抗原表达水平 (5.57士2.54)显著高于距肿瘤sem处组织(3.44士0.90,p0.01)、距肿 瘤10em处组织(3.35士0.85,p0.01)和良性病变(3.84士0.92,p0.05)。 距肿瘤scm、10cm处组织和良性病变组织间CD151表达水平无显著性 差异(P0.05)。 2.细胞增殖活性测定结果:①PI癌肿组织细胞(31.84月9.52)显著高于 距肿瘤sem处组织(6.38士2.84,p0.01)、距肿瘤10em处组织 (5.12士3.13,p0.01)和良性病变(4.01士1.79,p0.01)。距肿瘤sem、 10cm处组织和良性病变组织间PI无明显差异(p0.05)。②SPF癌 肿组织细胞(25.55士15.39)显著高于距肿瘤sem处组织(5.11士2.60,p 0.01)、距肿瘤loem处组织(3.95士3.29,p0.01)和良性病变 (3.72士1.93,p0.01)。距肿瘤sem、loem处组织和良性病变组织I’ed 浙江大学硕士学位论文 SPF无显著性差异(p0.05)。 3.CD151表达水平与PI、SPF的关系:随着组织细胞CD巧1平均荧光强 度的增高,Pl逐渐增高,二者呈正相关(厂0.3 13,P=0.0O5): CD 1 51平均荧光强度与SpF呈正相关(r=0.234,p=0.038);Pl与 同样, SPF呈 正相关(r=0.933,P=0.000)。 4.肿块组织CD151表达水平与NSCLC患者临床资料相关分析:CD151 表达水平在腺癌显著高于鳞癌,而在不同年龄、不同性别、肿瘤不同分 期、淋巴结有无转移以及肿瘤分化程度间,CD151表达水平差别无显著 性意义。 5.MTT实验显示:茶多酚可以降低PG、KB等细胞的OD值,其降低程 度随茶多酚作用浓度增高而增加。 6.流式细胞仪检测发现:在茶多酚作用下PG,KB等细胞表面CD 151平 均荧光强度降低,其降低程度随茶多酚作用浓度增高而增加。 结论: 1.CD151表达与NSCLC细?
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R734.2

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