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《浙江大学》 2004年
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杭州地区临床及环境来源副溶血弧菌的毒力基因特征和分子分型

张蔚  
【摘要】: 副溶血弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性致病菌,常存在于近海海水、海产品及盐渍食品中,是我国沿海地区夏、秋季食物中毒和急性腹泻的主要病原菌。近年的副溶血弧菌分子流行病学研究表明,一种新的tdh阳性、trh阴性的O3:K6群副溶血弧菌菌株引起了包括亚洲、美洲等多个国家在内的大流行。另一方面,在环境中分离的副溶血菌株大部分对人不致病,临床和环境来源的菌株的关系正在深入地研究。 杭州地处我国东南沿海,副溶血弧菌引起的食物中毒最为常见;了解临床和环境来源分离菌株所携带毒力基因特征、血清型及其分子特征,对腹泻病及食物中毒事件的预防和控制有重要意义。本文对2000年和2001年从食物中毒病人、临床散发病人和外环境(小水产品)中分离的副溶血弧菌菌株,进行血清学分型,应用PCR技术进行耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关基因(trh)的检测,并对分离的O3:K6血清型菌株进行核糖分型(Ribotyping)、随机放大多态性DNA分析(random amplified polymorphic DNA analysis,RAPD)、肠道细菌重复基因间共同序列PCR(enterobaeterial repetitive intergenie consensus PCR,ERIC 一PCR)等,以了解其分子特征。 结果发现,临床来源的副溶血弧菌(94株来自食物中毒病人和34株来自散发腹泻病人) 菌株的tdh携带率均大于97%、trh携带率为O%;而所有46株分离自环境(小水产)的副溶血 弧菌菌株未见有了助携带,仅1株Irh阳性。1株tdh阴性、trk阳性的副溶血菌株,其尿素酶 试验为阳性,而在其他所有trk阴性的副溶血菌株中,不管其tdh是阳性或是阴性,尿素酶试 验均为阴性。表明引起杭州地区食物中毒及散发腹泻的副溶血弧菌主要为矛口汤阳性、励阴性 菌株,外环境中存在的trh阳性的副溶血弧菌也是一个潜在的病原。 杭州临床和环境来源副溶血弧菌菌株的血清型鉴定表明,菌株血清型在食物中毒病人、 散发腹泻病人和小水产品中分布显著差别。tdh阳性、trh阴性的03:K6血清型副溶血弧菌引 起的食物中毒.片本次调查的13起事件中的11起,为84.6%:另二起为tdh阳性、trk阴性的 04:KS菌株,!’f 15.4%:未见其他血.清型。在散发腹泻病人中,03:K6、O4:KS和01:K?菌 株分别占26.5%、1 7.7%和38.2%。而水产品分离的菌株中,血清型分布更广一,但未见03:K6 和04:Ks血清型。食物中毒病人和散发腹泻病人分离的03:K6菌株在Ribotyping、ERIC一 PCR及R产PD三种指纹上显示均属于一种密切相关的克隆群,而环境分离的03:K?菌株与 临床分离的03:K6菌株间,在三者指纹上均有极显著差异。结果提示一群关系密切的、tdh 阳性、Irh阴性的03:K6血清型菌株,在杭州优势流行。 小结:通过本文研究,对杭州食物中毒病人、临床散发病人和外环境(小水产品)中分离 的副溶血弧菌菌株的携带毒力基因特征、血清型及其分子特征,有了一定的了解。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R115

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