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《浙江大学》 2004年
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罗汉松科、山茶科和红豆杉科植物内生拟盘多毛孢的多样性及拟盘多毛孢属分子系统学研究

韦继光  
【摘要】: 内生真菌(endophytic fungi)是一类在健康植物组织内定殖,但不引起病害症状的真菌。植物内生真菌是自然界生物多样性的重要组成部分,内生真菌多样性调查常以植物的属或种为单位来开展,而对单一类群内生真菌的多样性研究很少。自Espinosa-Garcia et al.(1990)首次报导枯斑拟盘多毛孢(Pestalotiopsis funerea)是红杉的重要内生真菌后,已有7种拟盘多毛孢被报导是内生真菌。大量研究报告表明拟盘多毛孢是植物内生真菌的重要类群,其代谢产物种类丰富,包括一些抗癌和抗菌物质,具有良好应用前景。传统拟盘多毛孢属与近缘属分类学主要依据形态学特征,种间界限重叠,不能反映系统关系,有必要进行分子系统学研究。开展内生拟盘多毛孢的多样性及拟盘多毛孢属系统学研究,将为开发和利用这类资源提供必要的基础,同时也有助于探索和建立符合自然的拟盘多毛孢属分类体系。 作为中国真菌志拟盘多毛孢属及相关属研究的一部分,本论文以罗汉松科、山茶科和红豆杉科等园林木本植物为对象,在我国南方的杭州、南宁和昆明等地开展内生拟盘多毛孢资源、多样性的调查,并通过对拟盘多毛孢分类学性状和分子系统学的研究探讨拟盘多毛孢属的系统学关系。 1 罗汉松科、山茶科和红豆杉科植物内生拟盘多毛孢种类 2001—2003年先后罗汉松(Podocarpus macrophyllus)和竹柏(P.nagi)、山茶(Camellia japonica)、茶(C.sinensis)、金花茶(C.nitidissima)、油茶(C.oleifera)、茶梅(C.sasanqua)、南山茶(C.reticulate)、云南红豆杉(Taxus yunnanensis)及南方红豆杉(T.chinensis var.mairei)等园林植物300多号标本,分离了18000多块健康的植物组织,得到内生拟盘多毛孢865个分离物,根据Guba(1961),Nag Raj(1993)的分类系统及其它有关文献对菌株进行鉴定。共鉴定内生拟盘多毛孢25种,其中有3个新种,1个国内新纪录,4个新组合,15个种是首次报道为内生拟盘多毛孢。 新种: 昆明拟盘多毛孢(Pestalotiopsis kunmingensis,sp.nov.),从云南昆明的罗汉松叶片组织分离到,其特点是分生孢子基部附属丝分叉,分生孢子大小为33.8—46.8×7.5—10μm(平均41×8.6μm),具有长且顶端膨大的顶生附属丝(14.3—52.7μm)。 云南拟盘多毛抱(尸estatoti叩515 yunnaneisis sP.nov.),从云南昆明的罗汉松枝条组织 分离到,其特点是分生抱子具有顶端附属丝3一7根,分生抱子大小为26一33.8/6.5一8.2 林m(平均28.8/7.2拼m)。 杭州拟盘多毛抱(尸e“口z口灯弓”15 ha昭幼口uensl’s sP.nov.),从浙江杭州和云南昆明的茶 枝条组织分离到,其特点是其分生抱子具有顶端附属丝2一9根,无基部附属丝,分生抱 子大小为31.2一如.3/6.9一9.2卿(平均35.4/8.1脚) 国内新纪录:卡斯特尼拟盘多毛抱(尸estaloti勿”ts加rstenii(S acc.Syd.)Stey.) 新组合:布利拟盘多毛抱尸estalotioPsis briOSiana(Montem.),comb.nov.,拟芍药拟盘 多毛抱尸estaloti侧”isp‘eonl’ic口la(Tsuk田的otaHino),comb.nov.,亚角质层拟盘多毛抱 刀召‘talotiopsis subcuticular钻(G uba),comb.nov.,窒息拟盘多毛抱尸已‘talotioPsiss之劝两Cata(EIL Ev.), eomb.nov. 其它首次被鉴定为内生拟盘多毛抱的种类:水生拟盘多毛抱(尸estatoti叩515 aquatiCa), 棒状拟盘多毛抱(尸clavl’sPOra),颊锥饱拟盘多毛抱(尸con王gena),青锁龙拟盘多毛抱(尸 crassi哪cula),异角状拟盘多毛抱(尸.heteroco二l’s),芒弗里亚拟盘多毛抱(尸ma馆扣lia), 弥泽那拟盘多毛抱(尸menezes~),忽视拟盘多毛抱(尸negleCta),橄榄色拟盘多毛抱 (尸口打v口‘ea),沙针拟盘多毛抱(p osy ridl:,),欧克安拟盘多毛抱(尸“弓心”thl’),芍药拟 盘多毛抱(尸Paeonl’ae),石楠拟盘多毛抱(尸Ph口tl’niae),杜鹃拟盘多毛抱(尸rkododendrt), 环带拟盘多毛抱(尸之口”口公)。 通过调查发现,植物内生拟盘多毛抱的种类丰富,在调查过的植物种类每一种植物都 能找到至少2种以上(含2种)的内生拟盘多毛抱,内生拟盘多毛抱可以在植物地上各 部位内生,从枝条组织容易分离到。 2内生拟盘多毛抱的多样性 2.1内生拟盘多毛抱与宿主植物的关系 不同宿主植物其内生拟盘多毛抱的物种多样性是有差别的,其中从罗汉松分离到的内生 拟盘多毛抱种类达16种,从茶梅分离到8种,从金花茶、茶和竹柏各分离到5种,从山茶 分离到4种,从油茶、云南红豆杉、南方红豆杉各分离到3种,从南山茶分离到2种。内生 拟盘多毛抱的分离率与该植物的内生拟盘多毛抱的物种多样性并非成比例,云南红豆杉和南 方红豆杉的内生拟盘多毛抱的分离率最高,但其物种多样性并非最丰富。 内生拟盘多毛抱的宿主范围)’‘,多数拟盘多毛抱种的宿土植物涉及多科植物,如 V川 尸召了故勿才奴卿z’sPhOtiniae在山茶、茶梅、罗汉松、短叶罗汉松、竹柏、南方红豆杉等三科植物 上都可分离到。 2.2植物内生拟盘多毛抱的定殖状况 多数植物叶片的内生拟盘多毛抱
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