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《浙江大学》 2005年
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富含黄酮的山楂叶抽提物调控内皮细胞损伤及其抗栓功能的研究

兰文军  
【摘要】:机体血管内血栓的形成是引发高血压、心肌梗死、脑缺血、动脉粥样硬化等诸多疾病的主要病理因素。无论是氧自由基等化学诱因,还是缺氧等物理诱因,内皮细胞损伤及其凝血与溶栓机能失调是血栓形成的主要机制之一。 黄酮类化合物(flavonoid CompoundS)是一类低分子天然植物成分,它表现出多种多样的药理活性,且毒副作用小。除了能防治心脑血管系统的疾病和呼吸系统疾病,它还具有抗炎抑菌,降血糖,抗氧化,抗辐射,抗肿瘤以及增强免疫能力等药理作用。山楂叶中的黄酮类化合物如芦丁、金丝桃甙、槲皮素、牡荊素等,是其主要的有效成分,可以起到降压、降血脂、增大心脏血流量等作用。然而,较高浓度的山楂叶总黄酮提取物是否有抗血栓潜能,还缺乏相关的前期评价研究。 主要运用流式细胞术,本文首先研究了富含黄酮的山楂叶抽提物(80%flavonoids,w/w)对内皮细胞的调控作用,为进一步发现更加高效的中药抗血栓疾病药物、拓展其医学应用范围及控制其毒付作用,提供有价值的基础研究资料。 内皮细胞的损伤是其功能异常的基础。体内导致内皮细胞损伤的因素很复杂,目前已明确的化学/物理因素主要有氧自由基、缺氧等。因此,模拟体内多种致细胞损伤因素,为探讨富含黄酮的山楂叶抽提物对内皮细胞的保护作用,本文研究了以下内容:(1)富含黄酮的山楂叶抽提物对oX-LDL诱导内皮细胞的保护作用;(2)富含黄酮的山楂叶抽提物对内皮细胞中H_2O_2的清除作用;(3)富含黄酮的山楂叶抽提物调控缺氧诱导内皮细胞中Ca~(2+)和NO水平的研究。 另外在体外模型中,分别以血栓形成和消融的两个关键蛋白—TM和t-PA作为抗栓药物的评价药靶,本文检测了富含黄酮的山楂叶抽提物对内皮细胞抗栓功能蛋白的调节作用。尤其是在检测t-PA蛋白的相对活性时,运用了先进的体外模型。此模型有效地消除了有色中药先导物对比色法检测细胞活性物质的干扰,具有快捷、性价比高和准确性较好的特点。 本文研究结果表明,富含黄酮的山楂叶抽提物可以从两个方面影响内皮细
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