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《浙江大学》 2005年
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番茄中BR相关基因的遗传转化研究

於维维  
【摘要】:油菜素甾醇类化合物(BRs)是在植物的生长发育中起重要作用的一类植物激素。BR的主要生理作用是促进植物的生长和提高植物对环境逆境的抗性。目前BR信号转导途径已基本清楚,BR信号转导的主要组分包括膜受体BRI1、与哺乳动物糖元合成酶激酶3相似的BIN2激酶、核蛋白BZR1和BZR2/BES1等。最新研究表明BZR1在调节BR信号转导、BR生物合成和生长响应中发挥关键性作用。 本研究选用模式植物番茄作为遗传转化受体,引入BR信号转导重要组分基因——BZR1基因,以期为进一步分析BZR1在调节BR的信号转导途径、BR水平和BR诱导基因的表达中的功能以及探讨能否通过对BZR1的调控进行作物改良奠定基础。因此,我们建立了番茄离体培养植株再生体系,构建了BZR1基因植物表达载体,并将目的基因导入根癌农杆菌LBA4404菌株中,进行了番茄的遗传转化研究,获得了19株番茄Kan~R植株。主要研究结果如下: (1)通过不同的激素配比的筛选,提出了一个番茄离体培养再生频率较高的培养基配方(MS培养基+3%蔗糖+0.7%琼脂+2mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA),子叶外植体的再生频率达89%,下胚轴外植体的再生频率达94%。 (2)检测鉴定了已构建的含BZR1基因的植物表达载体质粒35S-BZR1-CFP和含bzrl基因的植物表达载体质粒35S-bzrl-CFP,分别将它们导入农杆菌LBA4404菌株中。 (3)经过对番茄外植体Kan筛选浓度的确定、抑菌剂Amp的敏感性试验、预培养和共培养时间的筛选,建立了一个番茄遗传转化体系。具体操作为:将番茄子叶外植体在预培养基上培养2-3d后,用含目的基因的农杆菌LBA4404菌液侵染15min,在灭菌滤纸上吸干菌液,置于共培养基上培养3d,随后将外植体转入含Kan 20mg/L的选择分化培养基上诱导不定芽,2-3周转瓶一次,当抗性不定芽长至2-3cm时,在愈伤组织处切下幼苗,置于生根培养基上诱导不定根,20d左右后不定根长成,开瓶炼苗,然后移栽至营养土中,正常管理。 (4)按已建立的番茄遗传转化体系,获得了19株卡那霉素抗性苗,对全部的Kan~R转基因番茄植株进行了PCR检测,结果有16株含672bp标记基因(NPTⅡ基因)扩增产物。 目前,番茄转基因植株的进一步分子检测和田间鉴定及遗传特性等研究还在继续中。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S641.2

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 赵鑫;特异性启动子调控ACC氧化酶反义基因载体构建及对甜瓜‘玉金香’的转化[D];甘肃农业大学;2010年
2 刘永巨;农杆菌介导的次郎柿ACC合成酶与ACC氧化酶反义基因遗传转化研究[D];河北农业大学;2009年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄锡志,寿森炎,廖乾生;转基因番茄研究进展[J];北方园艺;2001年03期
2 梁美霞,李景富,谢立波,尤海波;番茄组织培养存在的问题及对策[J];北方园艺;2004年03期
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【共引文献】
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10 李海青;邹敏;姚方印;刘炜;;农杆菌介导的共转化法培育无选择标记转基因水稻的研究进展[J];山东农业科学;2011年07期
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1 黄月琴;薛建平;;植物抗病分子机制及抗病基因工程研究进展[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 张克;王文和;王树栋;路苹;赵祥云;;不同种百合亲本与杂交后代RAPD分析[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
3 吴锦娣;安娜;刘运权;刘伟;;建兰遗传转化体系之筛选体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
4 胡昊;熊威;毛静;王彩云;;蚜虫高感大菊品种叶片离体再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
5 宋盈;柳肃;;中国建筑近代化过程中的文化基因重组现象初析[A];建筑历史与理论第十一辑(2011年中国建筑史学学术年会论文集-兰州理工大学学报第37卷)[C];2011年
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7 赵琦;杨奇志;渠柏艳;潘宁;王振莲;潘光堂;;Thaumatin基因在玉米胚幼中的表达[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
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9 杜健;吴普特;冯浩;王秉荣;王成;王丽;;气候干暖化棉花抗旱种质创新及生态节水机理研究[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(三)[C];2007年
10 吴洁;周宇;张雪梅;阎文昭;;幽门螺杆菌热休克蛋白基因HspB-C对甘薯遗传转化的研究[A];中国核科学技术进展报告——中国核学会2009年学术年会论文集(第一卷·第8册)[C];2009年
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1 高轩;小麦抗冻蛋白基因的分离与遗传转化研究[D];华中科技大学;2010年
2 张妙霞;野生香蕉(Musa spp., AB group)抗寒相关基因的克隆与表达分析[D];福建农林大学;2010年
3 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
4 刘宏波;甘蓝型油菜抗病虫基因遗传转化及转基因植株抗性鉴定的研究[D];浙江大学;2010年
5 马英姿;药用植物蚬壳花椒化学成分分析及繁殖技术研究[D];中南林业科技大学;2010年
6 李俊;拟南芥阿拉伯半乳糖蛋白基因AtFLA3生物学功能研究[D];武汉大学;2010年
7 万凌琳;水稻β-1,3葡聚糖苷酶基因Osg1的功能研究[D];武汉大学;2010年
8 王丽丽;大白菜核基因雄性不育系定向转育及分子标记辅助育种研究[D];沈阳农业大学;2010年
9 关正君;樱桃番茄的HBsAg基因转化及其突变体特性研究[D];西北大学;2011年
10 咸洪泉;菌寄生真菌几丁质酶基因的克隆及功能研究[D];山东农业大学;2011年
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1 张庆福;枳精氨酸脱羧酶基因(PtADC)转化烟草提高抗脱水研究[D];华中农业大学;2010年
2 兰楠;利用天南星科凝集素构建内生工程真菌及其抗虫防病效果研究[D];华中农业大学;2010年
3 张帆;dsRNA介导的番木瓜环斑病毒(PRSV)的抗病性研究[D];华中农业大学;2010年
4 刘红梅;农杆菌介导百子莲抗寒基因CBF1高效转化体系的建立[D];华中农业大学;2010年
5 王俊;林荫银莲花离体快繁体系的优化及其有效成分的研究[D];华中农业大学;2010年
6 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
7 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
8 于大伟;我国转基因种子市场规制法律问题研究[D];华中农业大学;2010年
9 张晓黎;番茄耐贮藏基因标记开发及辅助自交系选育[D];华中农业大学;2010年
10 秦华伟;黄瓜再生体系的建立及耐热材料的筛选[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 薛炳烨,束怀瑞;应用基因工程改良果实成熟特性研究进展[J];山东农业科学;2002年04期
2 肖守华;赵善仓;王崇启;董玉梅;焦自高;;厚皮甜瓜高效再生体系的建立[J];山东农业科学;2007年04期
3 王秀芹;刘希桂;曲建平;高建强;王洪刚;;农杆菌介导的玉米转基因研究进展[J];安徽农业科学;2006年18期
4 马凤桐,李敏侠,刘玉荣,朱象山,郭春慧,张巧绒;桑属茎尖嫁接脱毒研究获得试管植株[J];陕西蚕业;1991年04期
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8 申晓鸿;马俊莲;张子德;唐霞;张丽;;次郎柿ACC合成酶的转基因工艺研究[J];河北农业大学学报;2007年06期
9 梁美霞,刘守伟,李景富;农杆菌介导的番茄遗传转化研究进展[J];东北农业大学学报;2004年02期
10 郭庆勋;秦智伟;丁国华;李景鹏;;薄皮甜瓜果实ACC合成酶cDNA克隆及反义表达载体的构建[J];东北农业大学学报;2006年01期
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1 曾黎琼;张绍松;柴红梅;王敬乔;李成云;张云孙;罗云波;;反义ACC合成酶基因导入番茄的研究[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
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1 孟凡娟;两种特殊果色番茄种质资源的研究[D];东北农业大学;2002年
2 尹春英;甜柿在中亚热带地区栽培的果实品质形成研究[D];四川农业大学;2002年
3 孙丽萍;番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和番茄遗传转化体系的研究[D];山东农业大学;2005年
4 黄永红;甜瓜ACC氧化酶反义基因植物表达载体的构建及其转化甜瓜品种‘GT-1’的研究[D];甘肃农业大学;2005年
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6 毛娟;甜瓜ACO1启动子的组织特异调控研究[D];甘肃农业大学;2007年
7 刘杰;中梨1号ACC氧化酶基因反义表达载体的构建及转化研究[D];河北农业大学;2009年
8 刘永巨;农杆菌介导的次郎柿ACC合成酶与ACC氧化酶反义基因遗传转化研究[D];河北农业大学;2009年
【二级引证文献】
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1 赵鑫;特异性启动子调控ACC氧化酶反义基因载体构建及对甜瓜‘玉金香’的转化[D];甘肃农业大学;2010年
【二级参考文献】
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1 姜国勇,郭宝太,金德敏,王斌;转TCS基因番茄及其后代性状稳定性的比较与分析[J];山东农业科学;1999年06期
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8 向长萍;吴瑞;;油菜素内酯对花椰菜生长发育及品质的影响[J];长江蔬菜;1990年05期
9 喻乐辉,曲竹蓉;新型高效植物激素——油菜素内酯(481)[J];长江蔬菜;1991年01期
10 陈远良,万文洪;油菜素内酯对黄瓜的增产效果[J];长江蔬菜;1993年03期
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1 李铁松;番茄高频再生系统的建立及果聚糖果糖基转移酶基因转化研究[D];辽宁师范大学;2001年
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2 邵开勋;冯维高;;番茄使用调节安试验初报[J];长江蔬菜;1988年06期
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5 李天来;优良番茄和茄子坐果增产激素——番茄丰产剂2号[J];新农业;1993年11期
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2 卫人;如此“拿来主义”,还是不拿好[N];中国经济导报;2008年
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6 金延俊 罗莎 魏宁 彭敬信;映日番茄别样红[N];中国国门时报;2008年
7 ;平度:黑番茄变成致富“黑珍珠”[N];中国特产报;2009年
8 记者 张瑛;葡萄串式番茄扎根宁夏[N];宁夏日报;2011年
9 翼城县农业技术中心 赵保勤;番茄狂长该咋办[N];山西科技报;2001年
10 科文;番茄整枝要三防[N];河南科技报;2003年
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1 王昕;番茄常温可食涂膜保鲜的理论与方法[D];吉林大学;2004年
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3 谭琳;芪合酶基因转化番茄产生白藜芦醇的研究[D];华南热带农业大学;2002年
4 崔秀敏;基质供水状况对番茄、甜椒穴盘苗生长特性的影响及其适应机制研究[D];山东农业大学;2003年
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7 陈静;花青苷对番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)幼苗叶片光合机构的保护作用及番茄花青苷结构特性的研究[D];西北农林科技大学;2005年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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3 杨慧;胡萝卜、番茄对D-半乳糖致大鼠拟衰老模型影响的实验研究[D];中国医科大学;2004年
4 齐维强;积温对日光温室番茄生长发育效应的研究以及模型初探[D];西北农林科技大学;2004年
5 牛润新;番茄贮运振动力学模型与模态分析[D];安徽农业大学;2004年
6 张强;低温弱光对番茄形态和生理生化影响的研究[D];河南农业大学;2003年
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10 罗其德;基因工程改良番茄的抗病性的研究[D];广西大学;2004年
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