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《浙江大学》 2005年
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茎用芥菜不同再生体系的建立及遗传稳定性分析

徐春霞  
【摘要】:茎用芥菜(Brasscia juncea var. tsatsai)包括抱子芥,笋子芥和茎瘤芥(Brassica juncea Coss. var. tumida Tsen et Lee)三个变种,是我国的一类特色蔬菜,其中茎瘤芥的加工产品——榨菜,是世界著名的腌菜之一。通过不同再生途径建立高效稳定的再生体系是进行茎瘤芥基础理论和实际应用等研究的必要条件之一。组织培养再生植株的遗传稳定性分析又为茎用芥菜种质资源的保存和创新提供必要的依据。本研究以茎瘤芥细胞质雄性不育系(陈竹君等,1995)为试验材料,分别建立了通过外植体直接和间接形成不定器官,以及茎顶伸长途径(大泽腾次,1998),即通常所说的“芽生芽”方式,来获得再生植株的再生体系。同时对外植体脱分化形成的愈伤组织和不同途径获得的再生植株的遗传稳定性进行了分析。其主要结果归纳如下: (1) 建立了通过茎瘤芥子叶诱导愈伤组织再分化不定芽的再生体系。茎瘤芥的子叶培养在加有不同浓度NAA、BA和2,4-D的MS培养基上可以诱导出具有不同特性的愈伤组织,而其中又以MS+0.25 mg·L~(-1)NAA+0.25 mg·L~(-1)2,4-D+0.5 mg·L~(-1)BA的配比获得的愈伤组织性状最佳。愈伤组织在MS含有不同浓度分化培养基上分化频率极低。但当培养基中加入一定量的头孢霉素或羧苄青霉素时却促进了愈伤组织的分化。 (2) 建立了茎瘤芥子叶直接诱导不定芽的再生体系。茎瘤芥的子叶块培养在MS+1.0~5.0 mg·L~(-1)BA+0.05 mg·L~(-1)NAA的培养基上可以直接诱导出不定芽,其中在MS+3.0 mg·L~(-1)BA+0.05 mg·L~(-1)NAA培养基上的再生频率最高,且每块子叶再生的平均芽数也最多。 (3) 建立了“芽生芽”再生体系。带芽茎段在MS+0.1~3.0 mg·L~(-1)BA+0.05 mg·L~(-1)NAA上都能长出芽来,而且每个茎段上诱导出的芽数随BA浓度的升高而增加,但再生芽的玻璃化趋势也随之明显。同时,我们还通过该途径建立了以田间植株为材料的再生体系,并将其应用于降低空心率的辅助育种研究,取得了较好的结果。 (4) 在愈伤组织水平上,对其遗传稳定性进行了鉴定。经流式细胞仪检测,愈伤组织在染色体水平上没有明显的差异。但用RAPD分子标记技术检测到了愈伤组织DNA水平上的差异,而且继代3次的愈伤组织比继代2次的差异更
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S637.3

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