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黄芪多糖对树突状细胞表型及功能成熟的影响

邵鹏  
【摘要】:背景和目的 树突状细胞(Dendritic cells,DC)因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名,它是目前发现的功能最强大的专职抗原提呈细胞(Antigenpresenting cells,APC),参与抗原的摄取、加工及提呈,是机体免疫反应的始动者,在诱导初次免疫应答过程中具有独特的地位,由于它在机体的抗感染免疫及抗肿瘤免疫应答中的作用极其重要而备受重视,成为近年来免疫学研究的热点。 黄芪是一种传统的补益类中药,味甘、性温,含有多种生物活性物质,其中多糖成分的免疫活性尤为突出,它能够提高细胞免疫及体液免疫,增强免疫功能低下模型小鼠的免疫功能,并对细胞因子有一定的调节作用。但是目前还没有黄芪多糖(Astragalus mongholicus,ASP)影响树突状细胞成熟的研究报道。 本实验通过体外试验研究黄芪多糖对树突状细胞的功能调节的机制,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。 材料和方法 1.小鼠骨髓来源树突状细胞的培养:小鼠骨髓细胞在含有GM-CSF和IL-4的RPMI-1640培养液中培养,于第三天换液,第五天应用免疫磁珠分离系统纯化得到树突状细胞。2.流式细胞仪检测DC表面分子CD11c和MHCⅡ类分子的表达:应用PE标记的抗MHCⅡ类分子(I-A/I-E)单克隆抗体和FITC标记的抗CD11c单克隆抗体对DC进行免疫荧光标记后用流式细胞仪分析荧光强度。3.流式细胞仪检测DC的吞噬功能:DC收集后加入1mg/ml FITC-dextran分别于37℃和4℃温育1h,缓冲液洗两遍后用流式细胞仪分析荧光强度。4.应用酶联免疫吸附试验检测DC培养液中白细胞介素-12(IL-12)的含量:收集DC,离心,取上清液加样于已包被了小鼠IL-12抗体的试剂盒平板孔内,试验


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