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《浙江大学》 2006年
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重组血管活性肠肽质粒治疗大鼠胶原性关节炎的实验研究

张利群  
【摘要】:目的: 观察重组血管活性肠肽(pcDNA3.1+/VIP)质粒治疗胶原诱导的大鼠关节炎(CIA)血清TNF-α、IL-2、IL-4表达的影响和病理变化,探讨VIP基因治疗类风湿性关节炎的效果及可能机制,为VIP基因治疗RA提供实验依据。 方法: 一、动物实验 取SD雄性大鼠48只随机分成8组,每组6只,以牛Ⅱ型胶原与弗氏佐剂以1:1比例混合的乳化剂于大鼠背部皮下多点注射诱导建立CIA大鼠实验模型,10d后取0.1ml同上乳化剂在大鼠尾根部皮内注射再次致敏,以重组血管活性肠肽质粒(pcDNA3.1+/VIP)13μl关节腔内注射治疗CIA,共3次(间隔7d)。观察大鼠生长情况,定期评分。于第50d称重后分别采集各组大鼠血液,分离血清,-20℃保存,待检测细胞因子;脱颈椎处死大鼠,分离后肢致炎病变关节,10%甲醛固定,待进行病理观察。 二、病理观察 大鼠后肢致炎病变关节,依次经过10%甲醛固定、EDTA脱钙、乙醇梯度脱水、常规包埋及切片,苏木素-伊红(HE)染色,镜检观察组织病理变化。正常大鼠相同关节部位作对照。 三、细胞因子检测 血清细胞因子测定:TNF-α和IL—2及IL—4的测定均按照ABC-ELISA试剂盒说明书要求进行,即分别将待测大鼠血清标本或
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R593.22

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