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《浙江大学》 2006年
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柿叶中有效成分的提取与分离研究

范杰平  
【摘要】:柿叶中含有较多的药理活性成分,为充分利用柿叶天然资源,本文对柿叶进行了深加工研究。总体处理过程是:以柿叶为原料提取得到总三萜,进而从中分离出熊果酸;提取出总三萜后的柿叶残渣,继续作为原料用于提取总黄酮;分离出大部分熊果酸后的总三萜,用高速逆流色谱(HSCCC)进一步分离得到另外三种三萜酸。主要内容包括: (1)对柿叶总三萜提取工艺进行了优化,考察了温度、液固比、提取时间和提取次数对石油醚脱脂的影响以及不同地方、不同提取溶剂、提取温度、液固比、提取时间和提取次数对总三萜提取的影响,得出柿叶总三萜提取较好的工艺条件。 (2)以柿叶总三萜为原料,对熊果酸的分离与精制进行了优化,考察了温度、液固比、脱色时间和脱色次数对石油醚及活性炭脱色的影响,脱色后的总三萜经无水乙醇重结晶后可得到无色针状熊果酸晶体。 (3)为较准确测定不同柿叶粗提物中的总黄酮,考察了六种分光光度法和两种HPLC测定法。重点对AlCl_3-(HAc-NaAc)显色法进行了优化,考察了显色剂用量和显色时间对显色后吸光度的影响。发现,在加入酸性缓冲溶液HAc-NaAc[1M HAc∶1M NaAc=9.25∶0.75(V/V,pH=3.6)]的条件下,用AlCl_3显色,在400nm附近测定总黄酮的方法比较好。 (4)以提取完三萜酸后的柿叶为原料,总黄酮得率及粗提物中总黄酮纯度为指标,考察了提取剂乙醇水溶液的浓度、提取温度、液固比、提取时间和提取次数对总黄酮提取的影响,得到用乙醇水溶液提取柿叶总黄酮的适宜工艺条件。 进一步用乙酸乙酯萃取法和梯度pH萃取结合乙酸乙酯萃取法对柿叶总黄酮进行了精制研究。 (5)以分离出大部分熊果酸后的总三萜为原料,通过优化实验条件,建立了一种用制备型的高速逆流色谱仪(HSCCC,柱体积为1000mL)快速高效地分离柿叶中五环三萜酸的方法。实验对两相溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水各组分的比例进行了优化,并考察了流动相流速、温度和螺旋管柱的转速对固定相保留率的影响,还考察了单向洗脱模式和双相洗脱模式对分离的影响。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:TQ914.1

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