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《浙江大学》 2007年
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在转基因水稻种子里表达生产纤维素酶

王炜  
【摘要】: 生物质资源主要是指粮食以外的桔秆等木质纤维素类农林废弃物。生物质资源十分丰富,生物质资源的研究与开发已成为世界重大热门课题之一。生物质的主要成分是纤维素、半纤维素和木质素,其中纤维素和半纤维素占生物质总量的70%以上。纤维素酶可以水解纤维素。另外,许多纤维素酶通过水解半纤维素中的β-1,4-糖苷键,从而对半纤维素也具有很高的活性。纤维素酶的应用十分广泛。利用植物作为生物反应器生产纤维素酶具有廉价,耐贮存,不宜污染等优点。在大麦胚乳中高水平表达纤维素酶已有报导。 本实验通过根癌农杆菌介导法将里氏木霉(Trichoderma reesi)来源的纤维素酶基因(EGI)转化到水稻中,利用水稻种子储藏蛋白Gt1启动子,使其在水稻胚乳中表达。对获得的转化植株进行了PCR鉴定,结果显示纤维素酶基因已整合进水稻基因组中。并对表达的纤维素酶进行了活性测定,用各种不同pH值的缓冲液配置底物,在不同的温度及pH值组合下进行活性测定,得到温度及pH梯度曲线,确定了酶对纤维素及半纤维素底物的最适条件。酶对纤维素底物的最适条件为45℃,pH4.6,酶对半纤维素底物的最适条件为45℃,pH6.0。在最适条件下对纤维素底物的酶活为4.9U/g种子,在最适条件下对半纤维素底物的酶活为6.2U/g种子。并且在T1水稻种子中可以检测到纤维素酶活性,表明该基因具有可遗传性。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S511;Q943.2

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【引证文献】
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