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17-β雌二醇联合5-氮胞苷调控ERβ及p75NTR的表达并诱导22Rv1前列腺癌细胞凋亡的研究

郁建迪  
【摘要】: 目的:探讨前列腺癌细胞中雌激素能否上调神经营养因子受体p75NTR的表达,进一步阐明雌激素治疗雄激素非依赖性前列腺癌的分子机制,提高雄激素非依赖性前列腺癌的治疗效果。 方法:培养人前列腺雄激素非依赖性细胞株22Rv1,分成四个实验组:1.)对照组;2.)单用雌激素组;3.)单用DNA去甲基化药物组;4.)联合应用雌激素及DNA去甲基化药物组。分别应用不同浓度的17-β-雌二醇及5氮胞苷处理22Rv1细胞。于药物作用后24小时、48小时、72小时,观察并记录细胞形态变化;MTT实验检测细胞生长增殖抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR、western-blotting实验检测雌激素受体ERα、ERβ,神经营养因子受体p75NTR、trkA基因表达情况的变化,另外通过western-blotting技术检测相应药物处理后核转录因子NF-κB蛋白在胞浆及胞核内分布改变来初步探讨药物作用后22Rv1细胞发生凋亡的机制。 结果:17-β雌二醇及5-氮胞苷能不同程度抑制22Rv1前列腺癌细胞增殖,并诱导其凋亡,联合用药效果明显增强。17-β雌二醇抑制22Rv1细胞增殖的最适浓度为10~(-6)M,单用其细胞增殖抑制率为13.87%,联合5氮胞苷(2μg/ml)后细胞增殖抑制率为41.8%。药物处理72小时后,单用17-β雌二醇组约23.6%22Rv1细胞发生凋亡,单用5氮胞苷组为29.2%,而联合用药组为52.9%(p<0.05);17-β雌二醇能诱导ERβ及p75NTR表达,联合应用5氮胞苷后此作用明显增强(p<0.05)。联合用药能明显抑制核转录因子NF-κB蛋白自胞浆转位至胞核内。 结论:前列腺癌细胞中雌激素能诱导神经营养因子受体p75NTR表达,DNA去甲基化药物能增强ERβ表达,并能加强雌激素诱导p75NTR表达的作用。雌激素及5-氮胞苷的作用与NF-κB信号通路抑制相关,雌激素联合DNA去甲基化药物通过调控ERβ及p75NTR的表达可能是治疗雄激素非依赖性前列腺癌的有效方法。


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