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《浙江大学》 2010年
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海马重组激活基因1对大鼠空间学习记忆的影响

陈浩浩  
【摘要】: 重组激活基因1(Rag1)在淋巴细胞的发育成熟过程中起关键作用,并与免疫记忆功能有关,实验证明,敲除动物的Rag1会导致免疫记忆功能缺陷。研究发现Rag1并非只存在于免疫系统中,在哺乳动物、两栖动物和硬骨鱼类的神经系统中也都存在,并且其转录产物主要分布在与记忆功能有关的脑区,如海马、小脑。本实验中我们构建了3对针对大鼠Rag1的RNA干扰重组表达载体及1对无关序列的载体(negative),采用慢病毒载体系统分别包装4个载体,而后分别感染体外培养的大鼠原代海马神经元细胞,通过western免疫印迹和荧光定量PCR检测Rag1蛋白及mRNA的表达,从而选取最佳干扰效果的慢病毒载体。构建的慢病毒载体通过脑立体定位仪,注射入大鼠海马CA3区,利用RT-PCR检测7天、14天、28天慢病毒干扰Rag1 mRNA表达的效果,并通过免疫荧光观察GFP表达以及尼氏染色观察海马结构形态变化。我们选取了注射后28天的大鼠进行Morris水迷宫的定位航行与空间探索实验,结果显示注射干扰病毒组(experimental)与正常组(control)以及注射无干扰效果病毒组(negative)相比没有显著性差异。对experimental组大鼠进行离体海马脑片长时程增强(LTP)的研究显示与control组比较没有显著性差异。由此我们得出这样的结论:在成年大鼠海马中,Rag1表达产物的减少可能不影响大鼠的空间学习记忆能力。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R741

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