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三七总皂苷药动学及药效评价新方法研究

汪晋  
【摘要】: 中药药代动力学研究是具有重要科学意义且富有挑战的前沿领域,已引起药学界高度重视。目前,中药药代动力学研究一般选用采血法,但生物体会因失血过多诱发低血容量症,必须限制采血次数和采血量。微透析取样技术能够在体、实时、持续、直接取样分析,且不损耗生物体体液,可更为准确地检测体内游离态药物浓度,从而评价药物的吸收、代谢、分布及消除情况。 为创新发展中药药效评价方法,需要建立符合中药自身特点,能够体现中药整体疗效的药效评价技术。代谢组学通过分析检测因外界刺激或遗传修饰而引起的体内代谢物组变化,可望用于中药药效评价和毒理学研究等方面。 据此,本文使用自制的微透析探针,结合液-质联用分析技术,评价了三七总皂苷在大鼠体内的药动学行为,探索了微透析技术在中药药动学方面的应用;在另一方面,以三七总皂苷药效评价为范例,研究了基于代谢组学的中药药效学评价方法,其主要研究内容如下: (1)自制了微透析探针,并从灌注液流速、外液药物浓度、相对回收率、半透膜稳定性等方面评价其体外性能。结果表明:探针的相对回收率随灌注液流速升高而呈降低趋势;不同外液浓度均呈同一趋势;正向透析法和反向透析法测定同一探针,其相对回收率存在一定偏差;探针埋植入体内后持续灌流12 h,半透膜稳定性良好。 (2)采用自制探针建立了大鼠血液中游离态药物浓度在体、实时及持续检测方法。进而采用液相色谱-质谱联用分析方法,在大鼠尾静脉注入血塞通注射液10mg/kg后,持续测定大鼠血液的透析液中游离态人参皂苷Rg_1、Re和三七皂苷R_1浓度,发现三种皂苷均呈快速消除趋势。 (3)采用结扎冠状动脉致大鼠急性心肌缺血模型及气相色谱-质谱联用法,分析研究了造模前后大鼠血清中氨基酸、糖类、脂肪酸等内源性代谢物的变化,发现正常组与造模组大鼠血清中代谢物组存在显著差异,通过T检验和变量重要性投影确定了代谢物组中10个生物标志物,为评价三七总皂苷的药效提供了有用参考依据。进一步研究发现,给药组大鼠血清中这10个生物标志物趋同于正常组大鼠。


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