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《浙江理工大学》 2010年
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Hsp27与PIMT在乳腺癌细胞中的相互作用研究

吴业卿  
【摘要】: 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其复发和转移是患者死亡的主要原因。Hsp27作为小分子伴侣蛋白,在乳腺癌的侵袭、转移和耐药过程中发挥重要作用,但具体的调控机理尚不清楚。为了研究Hsp27在乳腺癌细胞中参与调控的分子机制,本实验室应用免疫共沉淀偶联质谱技术,鉴定出17个与Hsp27相互作用的蛋白质,其中包括蛋白质L-异天冬氨酸甲基转移酶(Protein L-isoaspartyl Methyltransferase,PIMT)。PIMT是一种胞内广泛存在的蛋白修复酶,同Hsp27一样,也参与细胞的应激反应和癌细胞的分化与迁移。有文献报道,PIMT和Hsp27都与PI3K/Akt和MAPK信号调控通路有关,并且它们都参与癫痫的调控。提示它们可能在疾病的作用机理中发挥重要的功能。因此,进一步验证Hsp27与PIMT之间的相互作用,探索它们在乳腺癌中的作用机制,不仅可以阐明乳腺癌发病的分子机制,还能为临床上寻找新的诊断和治疗靶点。 本文旨在验证Hsp27与PIMT的相互作用,探索它们在乳腺癌中的作用机制。 方法:利用基因重组技术构建带GST标签的重组表达载体pGEX-4T-1-Hsp27,并对GST-Hsp27和6×His-PIMT重组载体进行表达纯化和SDS-PAGE与质谱鉴定,以及应用GST融合蛋白沉降实验(GST pull-down)和Western Blot验证GST-Hsp27和6×His-PIMT在体外的相互作用;用特异性一抗和带Alexa Fluor? 546/488荧光标记的二抗对MCF-7L细胞中内源性Hsp27和PIMT进行免疫双荧光标记,通过激光共聚焦显微术观察它们在细胞内的共定位。 结果:成功构建了GST-Hsp27原核表达载体,并对GST-Hsp27和6×His-PIMT重组载体进行了表达纯化和SDS-PAGE与质谱验证,通过GST pull-down实验,在体外证明了它们之间的直接相互作用;免疫双荧光标记偶联激光共聚焦显微术观察显示Hsp27和PIMT在乳腺癌细胞株MCF-7L细胞质内共定位。 结论:我们首次发现并证明了Hsp27与PIMT存在相互作用,推测这种相互作用可能在乳腺癌的作用机理中发挥重要功能。
【学位授予单位】:浙江理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R737.9

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 杨玲;李连弟;陈育德;D.M.Parkin;;中国乳腺癌发病死亡趋势的估计与预测[J];中华肿瘤杂志;2006年06期
【共引文献】
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1 王国强;;小分子热休克蛋白生物学功能的研究进展[J];安徽农业科学;2010年19期
2 王海;朱兆红;;乳腺癌改良根治术78例临床分析[J];蚌埠医学院学报;2011年08期
3 冯海霞;郭尚敬;李妹芳;孟庆杰;王光全;;植物线粒体热激蛋白的生物学功能[J];北方园艺;2009年06期
4 孙卫忠;李斌;王彦文;柴春利;刘彬斌;鲁成;;家蚕HSP20·8基因体外表达及荧光原位杂交研究(英文)[J];蚕业科学;2007年01期
5 侯波;黄若山;贾国华;付玉东;曹劲;李明学;王俊峰;阚强波;;乳腺癌改良根治术中保留肋间臂神经25例应用体会[J];当代医学;2009年09期
6 王玮;刘兰芹;;乳腺癌改良根治术的护理[J];当代医学;2010年09期
7 刘政红;;乳腺癌早期筛查临床意义探讨[J];当代医学;2011年33期
8 王刚;;乳腺癌手术患者保留肋间臂神经疗效观察[J];当代医学;2012年19期
9 祖国;郭京;王忠裕;;乳腺癌保乳手术治疗进展[J];大连医科大学学报;2012年01期
10 晁旭;王东平;巩振辉;梁燕;赵军;;拟南芥热激转录因子耐高温功能分析[J];西北植物学报;2007年07期
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1 王珏;具有“人源性微环境”的乳腺癌原位和转移小鼠模型的建立和研究[D];南京医科大学;2010年
2 曾卫军;拟南芥(Arabidopsis thaliana)受胁迫因子诱导激活启动子的筛选及其应用研究[D];华东师范大学;2011年
3 闻真珍;硫矿硫化叶菌小热激蛋白SsHSP14.1的功能特性研究[D];华南理工大学;2010年
4 Muharam Ali;抗条锈病小麦N95175抗性基因的遗传图谱与克隆[D];西北农林科技大学;2010年
5 赵欢;刺参Apostichopus japonicus (Selenka)对温度胁迫响应分子机理的基础研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
6 夏添松;人源性乳腺癌骨转移小鼠模型的建立和应用[D];南京医科大学;2011年
7 王建丽;驱动蛋白Kif2a在乳腺癌中表达的临床意义及功能研究[D];山东大学;2011年
8 顾超;PI3K/Akt信号通路调控孕激素对子宫内膜癌的作用及分子机制研究[D];复旦大学;2011年
9 刘海泉;基于社区的乳腺癌筛查及MRI在乳腺癌高危妇女人群检查中的应用研究[D];复旦大学;2011年
10 兰义华;基于图像内容检索的乳腺肿块诊断方法研究[D];华中科技大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王丽燕;家蚕小热激蛋白19.9及其N末端缺失体的原核表达和分子伴侣功能研究[D];浙江理工大学;2010年
2 谷明波;乳腺癌中Hsp27功能研究[D];浙江理工大学;2010年
3 胡爱侠;乳腺癌组织中mTOR、eIF4E、4EBPS蛋白的表达及意义[D];郑州大学;2010年
4 王洪亚;LKB1和SP1在乳腺癌组织中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2010年
5 王利霞;Galectin-3及p-AKT在乳腺浸润性导管癌的表达及意义[D];浙江大学;2010年
6 许啊清;女性乳腺热传递逆问题及其辐射成像[D];福建师范大学;2010年
7 裴蓓;乳腺癌各分子亚型的临床病理特点及预后因素分析[D];广西医科大学;2011年
8 刘晓芳;射频超声组织定征评分诊断乳腺病灶价值的初步研究[D];山西医科大学;2011年
9 赖宗浪;运用改良德尔菲法对晚期乳腺癌中医辨证规范进行研究[D];北京中医药大学;2011年
10 孟莉;(3R,6R)-Bassiatin(1)抗人乳腺癌细胞MCF-7作用机制研究[D];第二军医大学;2011年
【二级参考文献】
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1 李连弟,鲁凤珠,张思维,牧人,孙秀娣,皇甫小梅,孙杰,周有尚,欧阳宁慧,饶克勤,陈育德,孙爱明,薛志福,夏毅;中国恶性肿瘤死亡率20年变化趋势和近期预测分析[J];中华肿瘤杂志;1997年01期
2 李连弟,张思维,鲁凤珠,牧人,孙秀娣,皇甫小梅,孙杰,周有尚,夏毅,戴旭东,饶克勤,陈育德,孙爱明,薛志福;中国恶性肿瘤死亡谱及分类构成特征研究[J];中华肿瘤杂志;1997年05期
【相似文献】
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1 陈伟珠;李祥勇;周克元;;PTEN体外转染对乳腺癌细胞ZR-75-1细胞周期和增殖的影响[J];右江医学;2006年02期
2 孙慧;孙蕾娜;战忠利;魏熙胤;孙保存;郝希山;;Survivin及其相关基因在BCML-TA299乳腺癌发展中的作用机制研究[J];中国肿瘤临床;2006年10期
3 王玉栋;刘巍;;肿瘤标志物与乳腺癌骨转移的诊治[J];肿瘤研究与临床;2006年04期
4 杨光;张祥宏;;骨桥蛋白与乳腺癌的关系及其影像学表现[J];中国医学影像学杂志;2007年02期
5 侯吉学;马辉;黄桂林;;VEGF-C在乳腺癌淋巴结转移中的研究进展[J];实用肿瘤学杂志;2007年04期
6 王颖;王渝东;万跃;谭兵;吴永忠;;全反式维甲酸诱导对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究[J];重庆医学;2007年20期
7 王文静;王茂玉;王明玉;;雌激素、Fak与乳腺癌关系的研究进展[J];实用癌症杂志;2008年01期
8 常永丽;李君;;环境内分泌干扰物及代谢酶基因多态性与乳腺癌的关系[J];环境与健康杂志;2008年02期
9 吕新玲;孙振柱;;Rho亚家族与乳腺癌的研究进展[J];医学综述;2008年09期
10 成广存;孙雪青;周晓明;王建华;;肿瘤微环境在乳腺癌发展和治疗方面的作用[J];外科理论与实践;2011年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吕辉;文继舫;吴晓英;;REST在乳腺癌中的功能研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
2 李云涛;史立波;李海平;范忠林;任曙光;;睾丸酮对乳腺癌MCF-7细胞株生长影响的研究[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
3 李涛;陈正望;;炎性多肽Daintain/AIF-1在乳腺癌发生发展中的作用[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年
4 胡晨;陈彬;王越;陈先华;;乳腺癌中IGF信号途径及其抑制剂研究进展[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年
5 谢英;吕占军;段肖翠;侯洁;韩丽枝;王秀芳;;α-生育酚琥珀酸酯对乳腺癌细胞中Bcl-2家族蛋白表达的影响[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
6 马琼;裘秀春;Wei Wang;范清宇;Shi Ke;;靶向IL-11Rα的特异性造影剂在乳腺癌成像中的应用[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
7 董学君;郑专;陈建军;王贵珍;;逆转录结合荧光定量聚合酶链反应检测外周血乳腺癌细胞hMAM基因表达[A];2006年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2006年
8 卫红艳;任留梅;翟琼莉;邱明才;;人成骨样细胞MG-63与乳腺癌细胞相互作用的体外研究[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
9 张海谱;单保恩;;ALDH1和CD55表达在乳腺癌中的预测意义[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
10 戴建建;章静茹;陈峰;马道新;纪春岩;;EGFR抑制剂对乳腺癌细胞生物学活性的影响[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年
2 实习生 蒋洪涛;激素治疗应慎重,别让乳腺癌瞄上你[N];科技日报;2010年
3 王炜 编译;5分钟,乳腺癌细胞检验提速[N];医药经济报;2010年
4 记者 吴春燕 通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年
5 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年
6 ;专家发现抑制DNA修补可杀死乳腺癌细胞[N];中国高新技术产业导报;2005年
7 ;抑制DNA修补可杀死乳腺癌细胞[N];中国医药报;2005年
8 青锋;堵截乳腺癌细胞“逃逸隧道”防止肿瘤原发病灶发生转移[N];医药经济报;2001年
9 程维勇;乳腺癌患者面对的四大问题[N];中国妇女报;2005年
10 柯继;美国:悄然兴起“长寿饮食”[N];中国食品报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 聂秀青;拉帕替尼诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡机制及其与ABT-737的协同抗肿瘤作用[D];复旦大学;2010年
2 孙西洋;新型纳米复合载体的构建及其介导NK4基因在治疗乳腺癌中的应用[D];中国医科大学;2010年
3 张莹;TSG101对乳腺癌细胞的作用及与HIF-1α、MAPK/ERK信号通路的关系[D];中国医科大学;2008年
4 刁建东;hTERT启动子调控的TRAIL基因诱导乳腺癌细胞凋亡作用的研究[D];吉林大学;2009年
5 袁霞;应用基因芯片(Microarray)和实时监测聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测他莫昔芬和雌二醇对人类乳腺癌细胞基因表达的调控[D];吉林大学;2005年
6 胡成进;Kallikrein6基因在乳腺癌表达、调控及功能研究[D];第二军医大学;2005年
7 刘亚芳;乳腺癌细胞中ERα和DNA甲基化调控CLDN6表达的作用及其机制[D];吉林大学;2011年
8 李红;人全长survivin基因修饰DCs疫苗的构建及其对乳腺癌作用的实验研究[D];第三军医大学;2005年
9 马小鹏;“超声增敏ADM”治疗乳腺癌的作用及机制[D];华中科技大学;2010年
10 杜红延;骨唾液酸蛋白在乳腺癌骨转移中作用的研究[D];华南理工大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴业卿;Hsp27与PIMT在乳腺癌细胞中的相互作用研究[D];浙江理工大学;2010年
2 白冰;不同转移潜能的肿瘤细胞中趋化因子差异表达的研究[D];昆明医学院;2004年
3 周媛媛;2型糖尿病与乳腺癌发病的相关性研究[D];广西医科大学;2009年
4 胡梦娜;NGF对乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用及其抑制因子筛选[D];华东师范大学;2010年
5 郭君兰;雌激素受体α66介导乳腺癌细胞对紫杉醇耐药的研究[D];浙江大学;2011年
6 耿莹;siRNA干扰LOX基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学特性影响的研究[D];广西医科大学;2010年
7 宦大为;乙酰肝素酶和SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2010年
8 陈国利;RNAi对乳腺癌乙酰肝素酶表达的体内外实验研究[D];福建医科大学;2011年
9 赵冀安;生育对二甲基苯蒽诱导的雌性SD大鼠乳腺癌发生的影响[D];河北医科大学;2010年
10 孙岩;变构菌素诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡机制的研究[D];大连理工大学;2011年
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