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《浙江理工大学》 2010年
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两种不同来源桦褐孔菌多糖的抗氧化与免疫活性的研究

武永德  
【摘要】:桦褐孔菌属于担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、刺革菌科。在俄罗斯和北半球某些国家民间有很长的应用历史,多糖是桦褐孔菌和大多数药用真菌生物活性的主要成份,并且已证明具有抗肿瘤、免疫调节以及许多对健康有明显影响的活性如:抗氧化。但桦褐孔菌天然资源匮乏、价格昂贵、还没有成熟的人工培养方法,所以开发利用桦褐孔菌有重大的意义。 本论文从比较桦褐孔菌子实体多糖和发酵产物多糖抗氧化活性和免疫调节活性入手,对这两种不同来源的多糖采用BCA蛋白浓度测定试剂盒分析蛋白含量,苯酚-硫酸法测定多糖的含量,利用气相色谱(GC)进行单糖组分分析,以脱氧核糖为指标测定多糖清除羟基自由基活性,选择有机自由基DPPH测定多糖对其的清除活性,以硝普钠在体外产生NO测定多糖对NO自由基清除活性,选择富含脂质的鼠肝细胞测定其抗脂质过氧化活性,用CCK-8测定其对人的外周血单个核细胞增殖活性以及通过其对细胞因子TNF-α和IFN-γ的影响对其免疫调节活性进行研究。 实验结果表明:(1)与桦褐孔菌子实体多糖相比,其发酵产物多糖的多糖含量较高、蛋白质含量较低;(2)单糖组分的分析,表明子实体和发酵产物胞外多糖都是葡萄糖含量最高,而发酵产物胞内多糖的半乳糖含量最高;(3)桦褐孔菌多糖对羟基自由基清除的活性,随着浓度的增加清除活性依次增强。除蛋白后的多糖和未除蛋白的多糖清除活性相当,发酵产物多糖的清除活性较强,子实体过DEAE-纤维素柱分离后的多糖清除活性最差。(4)桦褐孔菌多糖对DPPH自由基清除活性,发酵产物多糖对DPPH自由基的清除活性较差,子实体多糖清除活性较强,两种多糖的清除活性与多糖浓度无关。(5)桦褐孔菌多糖抗脂质过氧化活性测定,结果和羟基自由基活性测定结果相似,都证明发酵产物多糖具有较强的抗氧化活性;(6)桦褐孔菌多糖对NO清除活性测定,子实体多糖对NO的清除活性较强,发酵产物多糖较差,两种不同来源多糖的清除活性都随着浓度的增加而增强;(7)在人的外周血单个核细胞增殖实验中,证明两种多糖均具有一定的增殖活性,其中子实体的增殖活性强于发酵产物;(8)在对细胞因子TNF-α和IFN-γ测定实验中,子实体多糖在不同的浓度下对细胞因子TNF-α的作用不同、对细胞因子IFN-γ的作用相同,而发酵产物多糖在不同的浓度下对两种细胞因子均表现出较强的清除活性。 总结以上结果我们得出,桦褐孔菌发酵产物多糖具有较强的抗氧化性,对人的外周血单个核细胞具有增殖活性,对细胞因子TNF-α和IFN-γ具有一定的清除活性,这为抗衰老药物的研发以及由细胞因子含量较高引起的疾病的治疗提供了重要的参考价值,鉴于桦褐孔菌发酵产物多糖具有很好的抗氧化和免疫调节活性,值得对其进一步的研究、开发与应用。
【学位授予单位】:浙江理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R285.5

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【引证文献】
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