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《浙江农林大学》 2016年
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中介体亚基MED8调控拟南芥幼年向成年阶段转变的机制研究

冯荣  
【摘要】:植物幼年向成年阶段转变是开花的基础,与植株形态建成、产量、病虫害防御、非生物胁迫等性状密切相关。叶片下表皮毛(Adaxial trichome)的发生及叶片形状是拟南芥幼年向成年转变的主要形态学指标。研究证明,微小RNA-miR156是调控植物幼年向成年阶段转变的主要因子。前期从EMS诱变的拟南芥SPL3pro::eGFP::SPL3-3’UTR转基因材料中,筛选到两个幼年向成年阶段转变延迟的突变体。图位克隆表明这两个突变体表型皆为MED8基因突变引起,为等位突变体。本研究以筛选到的med8突变体为材料,利用遗传学、分子生物学和生物化学的方法研究MED8与mi R156-SPL途径的遗传与分子关系,明确MED8调控拟南芥幼年向成年阶段转变的分子机制,以期为阐明中介体复合物在植物幼年向成年阶段转变过程中的调控作用提供理论基础,为通过基因工程手段靶向调控植物生长提供理论依据,从而为农作物实现高产、优质服务。主要研究结果如下:⑴表型分析表明,短日照条件下med8突变体幼年期比对照Col明显延迟。⑵荧光定量PCR分析第9 d、13 d、17 d茎尖中基因表达,结果显示,med8-2中Pri-miR156A、Pri-miR172B和miR172的表达量下降,Pri-miR156C表达量上升,SPL9的表达无显著变化。⑶遗传关系分析表明,短日照条件下,Ubi10::mimicry156、Ubi10::rSPL3、pEG-rSPL9和toe1/toe2均能回复med8-2幼年期延长的表型。⑷荧光定量PCR分析发现,DEX处理的pSPL9::rSPL9:GR-3’UTR中miR172B表达量显著高于Mock处理,但在pSPL9::rSPL9::GR-3’UTR/med8-2中DEX处理前后miR172B表达无显著变化,表明MED8调控SPL9蛋白的转录激活活性。⑸构建了MED8-BD诱饵载体,通过酵母双杂方法筛选酵母转录因子文库,得到了15个与MED8蛋白互作的转录因子。本研究结果表明,MED8可能在蛋白水平调控SPL9的活性,从而影响miR172的表达来调控拟南芥幼年向成年阶段转变。
【学位授予单位】:浙江农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:Q943.2

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