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《浙江农林大学》 2016年
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基于蜡梅属植物花化学成分的种间差异性研究

徐萌  
【摘要】:蜡梅属Chimonanthus Lindl.植物属于蜡梅科Calycanthaceae,是中国的特有属,主要分布在中国的东南部,在民间用途广泛,可用作园林绿化,部分植物的叶及花还可作茶叶或药用。蜡梅属植物主要包括蜡梅Ch.praecox(L)Link、山蜡梅Ch.nitens Oliv、柳叶蜡梅Ch.salicifolius S.Y.Hu、浙江蜡梅Ch.Zhejiangensis M.C.Liu、突托蜡梅Ch.grammatus M.C.Liu等。本文以蜡梅叶为材料摸索蜡梅属植物的最佳提取工艺,通过测定蜡梅属5种植物花不同萃取相的总黄酮含量、抗氧化活性,以及花的挥发性化学成分及醇溶性成分定性及定量分析研究,比较蜡梅属植物种间差异,研究取得的结果如下:1.以乙醇浓度、超声时间以及超声温度为自变量,以总黄酮、总酚含量以及DPPH自由基清除率为响应值,进行响应面分析(RSM),确定蜡梅叶片的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度的范围为81.83%-84.83%,超声时间的范围为33.31 min-36.62 min,超声温度的范围42.55℃-49.15℃。最优提取条件下测定的总黄酮、总酚及DPPH自由基清除率的实际值与模型预测的理论值基本一致,说明采用响应面法得到的工艺参数可靠,具有一定的实际价值。2.通过优化样品处理得出HS-SPME最佳的萃取条件为:样品用量1.2 g、加热温度70℃、吸附时间45 min、解吸时间3 min。通过GC-MS测定并定性分析,从蜡梅属5种植物干花中共鉴定了46种挥发性物质,其中蜡梅37种、突托蜡梅41种、山蜡梅41种、浙江蜡梅36种和柳叶蜡梅43种,且5种植物花中的共有成分达到24种;蜡梅属5种植物花的挥发性成分主要以萜类成分为主,且成分组成差异较大,其中柳叶蜡梅、浙江蜡梅及山蜡梅花的挥发性成分相似,具有相同的资源利用性;蜡梅及突托蜡梅花香气各异,挥发性成分组成明显不同于另外3种植物,在资源利用上可区别对待。本研究结果可为蜡梅属植物的分类学研究提供基础理论依据,也为蜡梅属花资源的开发利用提供理论参考。3.蜡梅属植物花的总黄酮含量存在显著差异,在5种植物花中,蜡梅花的总黄酮含量最高(70%醇提物可达69.21 mg/g),其次是山蜡梅。在各萃取部位中,每种植物花的正丁醇相和乙酸乙酯相的总黄酮含量和清除自由基能力都相对较高,抗氧化能力与总黄酮含量存在正相关关系。4.利用HPLC结合LC–UV–ESI-MS的方法鉴定并比较蜡梅属5种植物花所含化合物的差异,其中9个化合物被分别鉴定为莨菪亭-7-O-β-D-葡萄糖苷、莨菪亭、芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚、大黄素。通过HPLC已鉴定的的9个化合物进行定量分析,其含量范围(mg/g)分别为:0-2.16,0-0.23,1.94-59.74,0.14-0.97,0.59-8.13,0.11-0.68,0.23-1.92,0.07-0.97,0-0.33。蜡梅属5种植物间所含化合物差异明显,芦丁在5种植物中普遍含量最高,在蜡梅花中未检测到莨菪亭-7-O-β-D-葡萄糖苷、莨菪亭和大黄素。五种植物花中,蜡梅花中的黄酮成分普遍高于其它植物,其它四种蜡梅花成分含量相差较小。5、利用DPPH-HPLC方法,即通过比较加DPPH前后各峰面积的变化确定各化合物抗氧化性的大小,其中异槲皮苷峰基本消失,芦丁、槲皮素、山奈酚峰面积下降明显,说明这些化合物具有较强的抗氧化性。通过测定9种化合物的DPPH自由基清除率,槲皮素、山奈酚、芦丁、异槲皮苷有较强的清除DPPH自由基能力(SAR均大于50%),IC50值也较小,DPPH清除率测定法与DPPH-HPLC方法结果的一致性,说明DPPH-HPLC方法可以判断及筛选单体化合物的抗氧化性。蜡梅属植物花所含成分以黄酮为主,且具有较好的抗氧化活性,蜡梅花在化学成分分布及抗氧化活性上都优于其它蜡梅属植物,具有较好的资源开发前景。
【学位授予单位】:浙江农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:Q946

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