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山核桃嫁接愈合过程的解剖学研究及IAA免疫金定位

刘传荷  
【摘要】: 山核桃(Carya carthayensis)是我国特有的优质干果和木本油料树种,具有很高的经济价值,但在自然条件下童期长,始果期迟,良种化程度不高,而嫁接能有效缩短童期、提早结实,改良品种,扩大适种范围,然长期以来本砧嫁接技术难度大,成活较困难。本文利用光学显微镜和透射电子显微镜,结合免疫胶体金标记技术,研究了山核桃本砧嫁接愈合过程中砧穗接合部的解剖结构以及IAA在细胞中的分布。旨在丰富和完善山核桃本砧嫁接技术及其理论依据,揭示山核桃嫁接过程中内源IAA在细胞中的分布及变化,探讨IAA在山核桃嫁接愈合过程中发挥作用的机制,为IAA调控山核桃嫁接愈合过程的深入研究奠定基础。主要研究结论如下: 1、山核桃本砧嫁接愈合过程大致分为4个阶段:隔离层的形成、增厚及砧穗初始粘连(1-6 d);愈伤组织的生长与隔离层的解体、消失(7-12 d);砧穗间维管束桥的形成与贯通(14-23 d),维管组织的分化与连接(24-40 d)。嫁接后愈合组织区域最先发生的变化是隔离层的消长。砧、穗形成层区域最先形成隔离层,嫁接后第1-3 d形成隔离层,第3-6 d逐渐加厚;此后隔离层两侧愈伤组织细胞进行活跃分裂活动,隔离层细胞内物质逐渐被吸收,愈伤组织细胞分裂后突破隔离层,至嫁接后第12 d隔离层完全解体消失,已有筛分子分化;至嫁接后第14 d开始,随着管状分子的分化,维管束桥逐渐分化并贯通,40 d左右愈合过程基本结束,砧穗连为一体,信息传递和物质交换顺利进行。隔离层开始形成到完全消失的过程中,隔离层两侧愈伤组织细胞进行旺盛的生理代谢活动,切口外侧细胞的胞间连丝迅速关闭,而内侧细胞的胞间连丝物质交换活跃;近隔离层的细胞之间部分细胞壁降解,细胞间的原生质体穿壁融合;高尔基体、线粒体、内质网等细胞器数量显著增加,多泡体、壁旁体等膜状结构频繁出现,淀粉粒先积累后逐渐消失。 2、利用免疫胶体金标记技术和电镜技术研究了山核桃嫁接愈合过程中游离IAA在细胞中的免疫金定位,表明:山核桃嫁接面愈伤组织细胞IAA的免疫反应特异性强,金颗粒主要集中在砧穗质体的淀粉粒上,质体是IAA来源的主要场所;嫁接后砧木第7 d,接穗第6-7 d金颗粒数量分别达到最大。IAA在愈伤组织和维管组织的形成和分化过程中具有十分重要的作用。通过嫁接创伤诱使砧穗间束缚态IAA的释放,启动愈伤反应,在内部生物信号的转导中重新建立极性,诱导愈伤组织分化形成维管组织。


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