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《温州大学》 2018年
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镉诱导文蛤鳃细胞凋亡检测及金属硫蛋白的作用机制

甄静静  
【摘要】:采用急性毒性法将文蛤暴露于不同Cd~(2+)浓度(0、1.5、3、6、12mg/L)中染毒5天,用形态学、生化及分子生物学手段和方法检测Cd~(2+)对文蛤鳃细胞凋亡程度以及金属硫蛋白(MT)的作用特点。结果显示:随着Cd~(2+)浓度的上升,DNA梯形条带数增多且逐渐清晰;AO/EB双荧光染色后细胞由绿色过渡为橙黄色甚至红色,细胞凋亡率不断上升。Cd~(2+)对文蛤鳃丝、鳃水管和鳃上皮等产生损伤作用;随Cd~(2+)浓度的增加,细胞变形及膜性结构囊泡化严重,线粒体嵴减少,并出现溶酶体。鳃中ROS含量、DNA-蛋白质交联率(DPC)均随Cd~(2+)浓度的上升而上升,呈浓度-剂量效应关系;但蛋白质羰基(PCO)含量随Cd~(2+)浓度的增大呈先升后降的趋势;各Cd~(2+)染毒组的Caspase-3,8,9活性均被显著激活。随Cd~(2+)浓度的升高,SOD、CAT和GPx酶活及MT m RNA表达量均呈先升后降的趋势;超微量Na~+-K~+、Ca~(2+)-Mg~(2+)和总ATP酶活轻度受抑制。MT m RNA表达量与PCO具极显著的相关,与Caspase-3相关显著。镉能导致文蛤鳃细胞产生大量的自由基,使细胞膜性结构特别是线粒体结构损伤很大,影响正常的生理功能,出现氧化损伤甚至凋亡。MT能调控PCO含量变化,并能调控Caspase-3基因在线粒体介导的内源性细胞凋亡途径中发挥作用。
【学位授予单位】:温州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:X171.5

【参考文献】
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