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《浙江工商大学》 2007年
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克伦特罗人工模拟抗体的制备及其应用研究

陈庆富  
【摘要】: 人工模拟抗体就是利用分子印迹技术制备的对目标分子具有特异性识别能力的分子识别材料,又称为分子印迹聚合体。人工模拟抗体制备简单,能在恶劣的环境下保持活性,性质稳定,成本低廉,与生物抗体比较具有显著的优势。特别是作为各种快速检测方法中的分子识别元件,在药物及其残留的快速检测方面具有广阔的前景。本文利用分子印迹技术,分别以本体聚合法和沉淀聚合法制备了克伦特罗的人工模拟抗体,并对其等温吸附、静态吸附性能和选择性能等特性以及初步应用进行了研究。 实验结果表明:在本体聚合法制备中,以MAA为功能单体,功能单体与模板分子的摩尔比为4:1时,制备的人工模拟抗体的结合特性和选择特性最好,对1mmol/L克伦特罗的结合量Q为46.1μmol/g;在沉淀聚合法制备中,以乙腈为致孔剂,MAA为功能单体,功能单体与模板分子的摩尔比为4:1时,制备的人工模拟抗体的结合特性和选择特性最好,对1mmol/L克伦特罗的结合量Q为50.6μmol/g;它们对0.1mmol/L和1mmol/L的克伦特罗达到吸附平衡所需的时间分别为6h/8h和45min/1h。以沉淀聚合法制备的微球形人工模拟抗体的结合性能较好,特别是在与底物分子吸附平衡时间上更有巨大的优势。 本研究利用2%的琼脂糖溶胶—凝胶膜,将沉淀聚合制备的克伦特罗人工模拟抗体固定在铂电极表面,作为敏感膜构建了克伦特罗检测电极,用差分脉冲伏安法对该电极的相应性能(克伦特罗在人工模拟抗体修饰的铂电极上存在电化学氧化还原反应)进行了实验研究。检测电极相应性能的实验分为2步:即首先检测电极中的分子识别元件(克伦特罗人工模拟抗体)与溶液中的克伦特罗结合;再对吸附有克伦特罗的检测电极移入背景溶液时,由于酸性水相的极性环境,破坏了克伦特罗与人工模拟抗体的接合,使得第一步中结合的克伦特罗从人工模拟抗体中释放出来。结果表明,在1μmol/L-10μmol/L和20μmol/L-80μmol/L浓度范围的克伦特罗乙腈溶液都显示了良好的线性关系,线性方程分别为y=1.35+71.3C(r=0.99901)和y=6.30+9.47E-9C(r=0.988)。对该电极的重现性研究表明,RSD为1.38%。在选择性实验研究中,以磺胺二甲基嘧啶和二甲硝咪唑为假分子对克伦特罗进行竞争结合,检测电极的峰电流值没有明显的变化。
【学位授予单位】:浙江工商大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S859.84

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