收藏本站
《安徽工程大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

高产柚苷酶菌株的选育及发酵过程研究

潘方  
【摘要】: 中国是产柑桔大国,每年柑桔产量超过1000万吨,名列世界第三。柑桔的果实中含有多种营养成份,因此开展柑桔加工和综合利用,很有必要。而果汁在加工过程中,容易产生苦味,分解苦味物质柚皮苷的柚苷酶(脱苦酶)就能较好的解决这些问题。同时,柚皮苷的代谢产物,也是重要的生理活性物质,在医药、食品、日化、石油各领域都发挥着重要作用。本文就选育一株高产柚苷酶菌株并对其进行优化培养做出探索研究。主要研究成果如下: 1以桔皮粉为诱导底物,采用富集培养的方式从堆积腐烂桔皮的泥土中筛选出一株产柚苷酶(Naringinase)的生产菌株WP-108,其摇瓶发酵培养测定其酶活力达910.1U/mL,同时其继代培养稳定性良好。通过对菌株的培养特征,形态特征的观察,初步鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger)。 2对黑曲霉原生质体进行紫外诱变,研究菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间、酶解温度等对柚苷酶生产菌株黑曲霉WP-108原生质体形成与再生的影响。结果表明,培养72h的菌丝体,配制蜗牛酶、纤维素酶、溶菌酶的质量浓度1%,按1:1:1体积比混合,在32℃以0.7 mol/LKCl作为渗透压稳定剂酶解3.5小时效果最佳。紫外诱变,进一步筛选出一株正向突变的高产柚苷酶生产菌株WP-108-45,酶活力达1470.1U/ml,是出发菌株的1.6倍。显著提高产柚苷酶能力,酶活遗传性状稳定。 3采用响应面方法对一株能够高产柚苷酶的黑曲霉菌株的发酵产酶培养基进行了优化。通过考察不同碳源、氮源、无机盐对产酶的影响,在此基础上通过Plackett-Burman设计法对发酵培养基主要因子进行筛选,确定主要影响因子为蔗糖、蛋白胨、氯化钾。用最陡爬坡实验逼近以上三因素最优水平,并用中心组合设计以及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度。在优化培养条件下,发酵液中酶产量从1470U提高到了1843U,增加了25.4%。 4在节约成本的前提下,对黑曲霉进行固体发酵,采用单因素试验和响应面相结合的方法对产柚苷酶黑曲霉的固态发酵培养基进行了研究。以啤酒糟为主要碳源,添加桔皮粉作为诱导底物,考察不同氮源、无机盐对产酶的影响,对发酵培养基主要因子进行筛选,确定最佳培养条件为:啤酒糟3.202g、桔皮粉0.407 g、NaNO3 0.831 g、(NH4)2SO41.0 g、固液比2:7,加入(NH4)2SO41.0g、K2HPO4 0.5g、NaCl0.3g,此时酶活最高可达到110967.89U/g。
【学位授予单位】:安徽工程大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S182

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陶玉贵,项驷文;啤酒糟固态发酵生产生物农药条件的优化[J];安徽工程科技学院学报;2002年02期
2 潘方;魏胜华;余俊;裘曦;史善甫;;高产柚苷酶菌株的筛选研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年04期
3 程骥,洪文荣,苏建章,叶荔榕;黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合研究[J];福州大学学报(自然科学版);2003年01期
4 钟世安;李维;乔蓉;袁周率;;分光光度法测定柚皮中黄酮类化合物[J];光谱实验室;2007年04期
5 褚以文;微生物培养基优化方法及其OPTI优化软件[J];国外医药(抗生素分册);1999年02期
6 张晨;刘志伟;郑彦彤;蔡植松;;产柚苷酶菌株B04的分离及产酶特性研究[J];工业微生物;2007年05期
7 李荷迪;金志华;张海光;金花;;纳他霉素产生菌原生质体的制备、再生及紫外诱变[J];工业微生物;2008年03期
8 戴启广,陈国平,王幸宜;新型甜味剂—二氢查尔酮衍生物[J];精细化工中间体;2004年03期
9 吴萍;李正鹏;侯玮玮;;一株霉菌产木聚糖酶固态发酵培养基的优化及酶学性质研究[J];激光生物学报;2008年06期
10 陈玲;涂国全;;透明圈法筛选柚苷酶高产菌株[J];江西科学;2007年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐涛,潘见,袁传勋,金日生,开桂青;液相色谱法制备山柰酚单体[J];安徽化工;2005年02期
2 付俐;刘婧;何黎琴;王效山;洪梅;毕昱;;乙酰水杨酸苦参碱的合成[J];安徽化工;2011年01期
3 潘方;魏胜华;余俊;裘曦;史善甫;;高产柚苷酶菌株的筛选研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年04期
4 郭泉;孙延标;;复方白带片中补骨脂素、异补骨脂素的含量测定[J];中医药临床杂志;2008年04期
5 王晓明,徐汉文,王在贵,何瑞国;日粮中复合添加剂水平对鸡肉中胆固醇含量的影响[J];安徽农业科学;2005年10期
6 徐国胜;潘利华;杨阳;宛雯;汪杨;;β-环糊精对柑橘类果汁脱苦效果的研究[J];安徽农业科学;2006年20期
7 任鸿远;贾志宽;韩清芳;;紫花苜蓿产量与气候因子的相关性分析[J];安徽农业科学;2007年03期
8 严赞开;;电导法测定橙皮甙[J];安徽农业科学;2007年09期
9 蓝松;;高效液相色谱法测定柚叶中柚皮苷的含量[J];安徽农业科学;2007年33期
10 赵永彬;冯春梅;陈海平;莫云彬;潘晓飚;;不同栽培密度对黄岩小芥菜生产的影响[J];安徽农业科学;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖仔君;钟瑞敏;唐辉;;黑曲霉柚苷酶粗酶液酶学特性的初步研究[A];广东省食品学会第六次会员大会暨学术研讨会论文集[C];2012年
2 韩建宏;梁建;娄宗科;;层布式混杂纤维混凝土在渠道衬砌中的应用研究[A];灌区及水工建筑物防渗抗冻胀技术专刊[C];2009年
3 张全国;荆艳艳;岳建芝;王毅;;超微生物质秸秆产氢能力响应面法优化研究[A];中国农业工程学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 于洋;郝素锋;王超;陈树君;;基于响应面法的TC3钛合金点焊工艺参数优化[A];第十六次全国焊接学术会议论文摘要集[C];2011年
5 张玲改;董翠霞;陈历俊;;香蕉调味乳的开发研究[A];中国奶业协会年会论文集2009(下册)[C];2009年
6 殷钟意;郭育铭;郑旭煦;闻学政;;柚皮渣发酵脱除柠檬苦素菌种筛选和工艺研究[A];重庆市化学化工学会2009学术年会论文集[C];2009年
7 胡浩斌;郑尚珍;郑旭东;;东紫苏挥发油化学成分的研究[A];西北地区第三届色谱学术报告会暨甘肃省第八届色谱年会论文集[C];2004年
8 常亚飞;陈守文;喻子牛;;苏云金素发酵培养基的优化[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
9 朱峰;吴厚玖;郭辽朴;;柑橘种子活性物质的提取与利用研究进展[A];中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会论文集[C];2007年
10 张崇玉;王景成;;酿酒业副产品饲用价值分析及应用技术研究进展途径[A];2007山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 贺春燕;施肥对枸杞产量和品质的影响及效应研究[D];甘肃农业大学;2009年
2 帅学宏;山豆根多糖提取工艺及免疫学活性研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 陈云松;转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件优化及安全性评价[D];中国海洋大学;2010年
4 赵祺;冻土细菌新种和冰缘植物内生细菌新种的特征和多相分类学研究[D];兰州大学;2010年
5 孟凡涛;酒明串珠菌不对称合成手性醇及其反Prelog脱氢酶的酶学特性研究[D];江南大学;2010年
6 王进;岩白菜素的人体与动物药代动力学及对I_(GABA)的作用研究[D];山东大学;2010年
7 黎继烈;金橘活性物质提取及生物活性研究[D];中南林业科技大学;2007年
8 田玉庭;辅酶Q_(10)高产菌株选育及发酵过程优化研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 付江;棉纺环锭假捻集聚纺纱技术及其纱线结构与性能[D];东华大学;2010年
10 赖庆辉;链式纸钵育苗甜菜自动高速移栽机关键技术研究[D];吉林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 贺波;苎麻叶黄酮的提取、分离纯化、结构及抗氧化活性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 黄吉星;集中型槽孔轮式油菜精量排种器设计及其破碎率试验研究[D];华中农业大学;2010年
3 莫耽;机械损伤对锦橙汁品质的影响[D];华中农业大学;2010年
4 罗均;柚皮纤维素的制备、琥珀酸酐改性及其对重金属离子的吸附性能研究[D];华中农业大学;2010年
5 侯玮玮;纳他霉素产生菌的发酵工艺优化[D];华中农业大学;2010年
6 吴婕;多拉菌素产生菌的诱变育种及培养条件的优化[D];华中农业大学;2010年
7 谢宙;刺糖多孢菌对剪切力抗性的初步研究[D];华中农业大学;2010年
8 王诗然;漆酶高产菌株的选育及其酶学性质研究[D];安徽工程大学;2010年
9 李巧连;海绵放线菌抑菌活性菌株的筛选及HVG 29菌株代谢产物的分离与结构鉴定[D];辽宁师范大学;2010年
10 周胜男;马铃薯中酚类物质的提取、纯化及检测方法研究[D];安徽农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陶玉贵;生物农药固态发酵条件的研究[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2001年01期
2 李祥锴,安志东,朱非;林肯链霉菌双亲灭活原生质体融合的研究[J];氨基酸和生物资源;2001年04期
3 萧伟祥,王勇,李纯,宛晓春;茶黄色素及其抗氧化活性的研究[J];安徽农学院学报;1991年02期
4 宛晓春,汤坚,丁霄霖;β-葡萄糖苷酶产酶菌种的选育[J];安徽农业大学学报;1997年01期
5 李平,宛晓春,丁霄霖,陶文沂;黑曲霉β-葡萄糖苷酶的活力测定和酶学性质[J];安徽农业大学学报;1998年03期
6 乔海鸥,丁晓雯,张庆祝,李干红;柑桔类果汁的脱苦技术[J];包装与食品机械;2003年05期
7 吴厚玖;柚苷和新橙皮苷氢化条件的研究[J];中国南方果树;1996年02期
8 吴厚玖,焦必林,孙志高;我国和世界柑桔加工业展望[J];中国南方果树;1997年05期
9 杨翔华,洪新;产木聚糖酶菌株的筛选及其产酶特性[J];辽宁石油化工大学学报;2004年04期
10 秦建侯;邓勃;王小芹;;分析测试中的试验设计和优化方法——四、单纯形优化法[J];分析试验室;1986年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 龙建友;秦岭链霉菌开发利用的前期基础研究[D];西北农林科技大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖崇德,蔡华静,夏海林,施孝活,刘金国,涂国全;一株产柚苷酶菌株黑曲霉的分离及菌种鉴定的初步研究[J];江西农业大学学报;2005年05期
2 张璟晶;袁敏;管远红;涂国全;;不同温度、pH和无机离子对黑曲霉A66菌株产柚苷酶活力影响的初步研究[J];江西农业大学学报;2006年03期
3 文蓉;黎继烈;崔培梧;杨杰;黄凌;;柑桔类果汁的酶法脱苦研究进展[J];北方园艺;2009年03期
4 李志坚;谭兴和;单杨;李高阳;;复合诱变选育柚苷酶高产菌株的研究[J];湖南农业科学;2010年03期
5 谭兴和,甘霖,李大志,李清明,郭时印,王锋;酶在果品加工中的应用与其固定化[J];保鲜与加工;2003年06期
6 崔培梧;黎继烈;文蓉;黄凌;杨杰;;紫外线诱变青霉P-M1选育柚苷酶高产菌株研究[J];北方园艺;2009年02期
7 陈玲;涂晓嵘;涂国全;;柚苷酶产生菌的抗药性UV诱变筛选[J];江西农业大学学报;2007年02期
8 陈玲;涂晓嵘;涂国全;;NTG诱变筛选高产柚苷酶抗药性突变株[J];江西农业大学学报;2007年04期
9 蒋治国,王士长,何飞燕;植酸酶的研究进展及其在饲料中的应用[J];广西农学报;2005年04期
10 李秀珍;薄泉;杨平平;王燕;;利用原生质体诱变筛选植酸酶高产菌株[J];饲料工业;2007年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赖晓霞;何晓磊;刘四新;李从发;;黑曲霉CICC40273固态发酵产聚半乳糖醛酸酶,木聚糖酶和纤维素酶条件的优化[A];2011年海南省微生物学会学术年会论文汇编[C];2011年
2 姜晓云;王家德;;纤维素酶及其在废木质纤维素制可还原糖中的应用[A];2009全国可再生能源—生物质能利用技术研讨会论文集[C];2009年
3 李艳丽;许少春;柳永;许尧兴;;微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的最适条件研究[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
4 张铁鹰;刘志伟;黄玉亭;孙杰;陈志伟;;植酸酶在肉仔鸡消化道内环境下活性变化的体外研究[A];首届饲料酶制剂应用技术论坛暨饲料酶制剂大会论文集[C];2009年
5 王在贵;何瑞国;钱世钧;刘朝良;;特异腐质霉纤维素酶的酶谱分析[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
6 杨欣伟;柯崇榕;吴松刚;黄建忠;;黑曲霉EIM-6果胶裂解酶基因的克隆与表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年
7 叶明;;黑曲霉发酵泔水生产饲料蛋白的研究[A];第五次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2009年
8 陈颖;;G915黑曲霉生产果胶酶动力学研究[A];'96全国方便食品加工与包装技术交流会论文集[C];1996年
9 谢必峰;王水顺;;黑曲霉SL2-111酸性蛋白酶的纯化及其酶学特性[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
10 张金祥;李颖;毛志辉;袁红莉;王华明;王敖全;唐国敏;;黑曲霉ku80基因的缺失可显著提高DNA的同源重组频率[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 施慧;帝斯曼公布黑曲霉基因组DNA序列[N];中国化工报;2007年
2 中国WTO TBT-SPS中心供稿;加拿大修改食品生产中使用菌黑曲霉和派生磷脂酶临时营销许可[N];中国国门时报;2009年
3 广东省农科院植保所 王璧生 刘景梅 研究员;芒果病虫害的防治[N];广东科技报;2003年
4 ;青贮饲料时如何促进乳酸发酵[N];中国畜牧兽医报;2008年
5 李富伟 汤海鸥 汪勇;非定义因素对酶制剂酶活检测结果的影响分析[N];中国畜牧兽医报;2009年
6 ;蛋白酶[N];中国畜牧兽医报;2008年
7 刘菲;健康人服蜂胶等同无病吃药[N];保健时报;2004年
8 肖宇;高科力与华南理工开创纳米涂料新时代[N];中国房地产报;2004年
9 陆文清;饲用非淀粉多糖酶高产菌种选育及固态发酵技术通过鉴定[N];中国畜牧报;2004年
10 中国农业大学 陆文清博士;评价饲料酶质量的5种指标[N];中国畜牧报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张怡;福建特产柚子加工及综合利用技术的研究[D];福建农林大学;2009年
2 葛向阳;菊芋发酵生产L-乳酸的研究[D];江南大学;2009年
3 顾丰颖;α-半乳糖苷酶碳源诱导机制研究及复合酶制剂的开发[D];浙江大学;2013年
4 彭远义;植酸酶产生菌的选育及高表达工程菌的构建研究[D];西南农业大学;2004年
5 陈凤莲;小麦麸皮中低聚木糖的生物制备技术研究[D];东北林业大学;2006年
6 郑腾;黑曲霉产酶特性研究及其酶制剂在猪饲料中的应用[D];南京农业大学;2006年
7 李剑芳;黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究[D];江南大学;2007年
8 舒正玉;黑曲霉脂肪酶的酶学性质、基因克隆与表达及结构预测[D];华中科技大学;2007年
9 苏玉春;木聚糖酶的酶学特性及基因克隆表达研究[D];吉林农业大学;2008年
10 朱汇源;木聚糖诱导条件下黑曲霉特异基因表达分析及高表达碱性木聚糖酶产黄青霉菌株构建研究[D];山东大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 潘方;高产柚苷酶菌株的选育及发酵过程研究[D];安徽工程大学;2010年
2 李志坚;柚苷酶产生菌的选育及其酶的应用研究[D];湖南农业大学;2010年
3 丁涛;柚苷酶发酵放大技术及酶制剂的研究[D];集美大学;2011年
4 崔培梧;Penicillium sp.1523液态发酵生产柚苷酶及酶的固定化研究[D];中南林业科技大学;2009年
5 陈月龙;棘孢曲霉JMUdb058柚苷酶的结构及其水解柚皮苷的特性研究[D];集美大学;2012年
6 文蓉;柚苷酶生产菌株的选育及其酶学性质的研究[D];中南林业科技大学;2009年
7 陈华根;产柚苷酶的黑曲霉菌株的筛选、产酶特性及高产菌株选育的研究[D];集美大学;2009年
8 姚辉;产柚苷酶菌株的选育及柚子汁酶法脱苦工艺的研究[D];福建农林大学;2009年
9 郭育铭;柚皮渣发酵脱苦工艺实验研究[D];重庆工商大学;2009年
10 郭倩;产柚苷酶高产菌株的筛选、鉴定及产酶特性研究[D];四川农业大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026