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《安徽农业大学》 2010年
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耐高渗(高糖)酵母菌株的选育

赵硕  
【摘要】: 浓醪发酵是酒精工业生产的新趋势,这种发酵工艺所生成的酒精浓度较高,同时醪液中的糖度也高。这样发酵醪液的渗透压较高,引起细胞内水分活度、细胞质组成发生显著变化,酵母的细胞膜和菌体内的酶受到破坏,从而抑制酵母的生长和发酵。国内外已有很多选育耐高浓度酒精酵母菌的筛选,但耐高糖酵母菌的筛选却少见。若要选育出耐高糖酵母菌,可以很好的为酒精工业的生产服务。鉴于此,本文进行了以下研究:酵母菌的耐高糖驯化;对驯化出的优良菌株进行原生质体菌悬液的制备研究,并做原生质体紫外诱变,以选育出耐高糖酵母菌株;利用选育出的耐高糖酵母菌进行酒精发酵试验。 主要研究结果有: 1.利用逐步提高培养基糖浓度的方法对初始酵母菌进行耐高糖驯化。结果表明,酵母菌驯化后,能在30%糖浓度的培养基中生长发酵良好。 2.驯化出的优良酵母菌株培养到对数期,经β-巯基乙醇-EDTA-PB溶液预处理,蜗牛酶溶液酶解后,生孢培养基双层平板培养,长出菌落后计数,计算原生质体分离率和原生质体再生率。结果表明,原生质体分离率97.9%;原生质体再生率19.8%。 3.以驯化出的优良菌株为出发菌株,进行原生质体紫外诱变。对诱变时间和诱变距离优化。结果表明,原生质体紫外诱变最佳条件为:诱变时间为18s,诱变距离20cm。诱变后通过初筛和复筛后选育出的菌株YB-23在40%糖度下产气几乎充满整个发酵杜氏小管,在65%糖浓度下仍能起酵。并且在发酵力、产酒精能力、残留还原糖浓度等方面都优于出发菌株。菌落、细胞形态良好。稳定性试验表明稳定性良好。 4.利用选育出的酵母菌进行酒精发酵试验,包括小瓶发酵单因素试验,正交试验设计设计优化发酵工艺条件,10L发酵罐小试试验。结果表明:最佳发酵工艺条件为:水料比1.5,初始pH4.5,糖化酶用量120U/g,酵母接种量14%。发酵罐小试试验表明效果良好,发酵72h产酒精量为16.0%(v/v),发酵性能明显优于出发菌株。原始菌株发酵72h产酒精量为15.1%(v/v)。筛选出的菌株酒精产量比原始菌株提高5.96%。
【学位授予单位】:安徽农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q933

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