收藏本站
《安徽农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PRRSV安徽株的分离鉴定及感染仔猪病理学的研究

姚雪静  
【摘要】: 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种传染病,该病的主要特征是引起母猪繁殖障碍、仔猪和育肥猪呼吸系统疾病,并有较高的死亡率。1987年,该病在美国首次暴发,2006年夏秋季开始在我国大部分地区爆发流行,给我国的养猪业带来极大的经济损失。为了研究PRRSV流行毒株的来源和变异原因,探索相关的防控措施,本研究对2008年从安徽地区两个发病猪场采集疑似猪繁殖与呼吸综合征病料,进行PRRSV流行毒株的分离鉴定,并对其Nsp2、ORF7基因进行克隆与序列分析;同时用分离毒株接种健康仔猪,进行病理组织学的观察,并采用间接免疫组化法,分析PRRSV抗原的在感染仔猪体内和分布情况,为安徽省PRRSV流行株的来源、分子流行病学和变异情况等提供科学依据,为进一步研究病毒在动物体内的持续感染状况和阐明PRRSV的致病机奠定理论基础。 2008年从安徽地区两个发病猪场采集疑似猪繁殖与呼吸综合征病料,在Marc-145细胞上盲传4-5代,发现有明显细胞病变。用PRRSV (Nsp2 1594~1680变异株)RT-PCR检测试剂盒可扩增出目的片断;用间接免疫荧光试验可观察到特异性荧光;通过电镜观察可见直径50~80 mm的有囊膜的病毒粒子。证实分离到两株猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为HS08株和ZJ08株。 用RT-PCR扩增两个分离毒株HS08株和ZJ08株的Nsp2和ORF7基因,进行克隆和序列分析。结果表明这两个分离毒株核苷酸同源性99.0%;在Nsp2基因上,这两个分离毒株均发生30个氨基酸的不连续缺失,它们与CH-1a株之间核苷酸同源性分别为80.7%和80.2%;在ORF7基因上,它们与2007年国内高致病性蓝耳病毒株HuN核苷酸同源性较高,达到98.4%和99.5%,且ORF7基因均存在K46→R46,H109→Q109,V117→A117氨基酸突变。这些信息显示这两个安徽分离株属美洲型毒株,具有高致病性特征,与国内高致病性毒株位于同一基因群。 将6头60日龄的PRRSV抗原与抗体均为阴性健康仔猪随机分为3组,每组各两头。A、B两组经鼻腔接种分离株HS08株和ZJ08株的第12代细胞培养物2 mL/头,C组为对照组。试验组的仔猪在攻毒后第一天,体温就升高到41℃,并持续高热,最高时可达42.3℃,攻毒后第6天,就可以检测到PRRSV抗体,第10天抗体水平达到最高。通过对临床症状、剖检病变、病理切片的观察发现攻毒组猪只的各脏器眼观病变均轻于临床剖检所见,肺脏主要呈间质性肺炎,肺泡间隔明显增厚,大量炎性细胞浸润;肝脏淤血,肝细胞变性,炎性细胞浸润;肾脏、脾脏、淋巴结出血;免疫组化检测到肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结、扁桃体中均有不同程度的阳性反应,其中肺脏阳性最强。
【学位授予单位】:安徽农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.28

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱良强;王非;占松鹤;刘华;王军;何长生;江定丰;郑举;;安徽省猪蓝耳病疫苗临床免疫效果调查[J];安徽农业科学;2009年27期
2 仇华吉,童光志,周彦君,郭宝清,张绍杰,王柳,王云峰,刘宝全;猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株糖蛋白基因的遗传变异分析[J];病毒学报;2000年04期
3 黄金海,丁伯良,王东;猪主要繁殖障碍病的流行现状及其防制对策[J];动物医学进展;2002年02期
4 周绪斌;赵亚荣;蔡少阁;;猪繁殖与呼吸综合征的实验室诊断方法[J];动物医学进展;2006年04期
5 王非;占松鹤;刘华;王军;何长生;曹晋蓉;朱良强;;安徽省部分规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学调查[J];动物医学进展;2009年12期
6 王隆柏;魏宏;陈少莺;车勇良;庄向生;陈仕龙;林长光;周伦江;黄梅清;;猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗安全性和免疫原性测定[J];福建农业学报;2007年02期
7 贺仲兵;杨仁斌;唐文华;邹勇;;Fenton试剂处理猪场废水的研究[J];黑龙江畜牧兽医;2009年02期
8 苏晓鸥;乔俊文;赵德明;杨利峰;周向梅;尹晓敏;杨建民;;猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立[J];中国农业大学学报;2009年02期
9 刘书亮,王红宁;PRRS的病原学和免疫学研究进展[J];四川畜牧兽医;2000年S1期
10 丁宝君,肖一红,刘思当;猪繁殖障碍与呼吸综合征[J];动物科学与动物医学;2003年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 桑传兰;PRRSV 感染的仔猪体内病毒抗原分布和临床、病理变化研究[D];新疆农业大学;2002年
2 严安;猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因和ORF5基因变异分析[D];中国农业大学;2004年
3 张平英;免疫组化检测PRRSV方法的建立及其应用于PRRSV感染仔猪后病毒在各器官分布定植规律的研究[D];四川农业大学;2005年
4 宋志军;欧洲型PRRSV的分离与鉴定及其ORF5基因变异分析[D];西北农林科技大学;2006年
5 苏贵成;新疆株PRRSV的NSP2和ORF5基因变异分析[D];新疆农业大学;2008年
6 王伟;猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与特性研究[D];福建农林大学;2008年
7 张妙红;猪高致病性蓝耳病病理学研究[D];湖南农业大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 连京华,秦卓明,黄波;鸡传染性支气管炎研究进展[J];山东农业科学;2000年01期
2 钱凤芹,刘长梅,任红梅,李爱芹,庄文忠;鸡新城疫病毒山东分离株F蛋白基因的克隆与鉴定[J];山东农业科学;2001年03期
3 吴家强,颜世敢,胡北侠,任素芳,黄艳艳,张秀美;细胞培养对PRRSV-SD分离株滴度的影响[J];山东农业科学;2002年06期
4 东野传现;史玉颖;黄中利;刘玉山;亓丽红;傅剑;;“禽喘康颗粒冲剂”对鸡人工感染新城疫病毒临床效果的研究[J];山东农业科学;2007年02期
5 李子剑;李云龙;陈苏;艾武;宋敏训;李玉峰;;鸭肠炎病毒US2基因的序列测定与分析[J];山东农业科学;2008年03期
6 李祥辉;黄大鹏;黄玉兰;;鸡抗小鹅瘟病毒IgY提取方法的比较试验[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年23期
7 张小飞,潘孝成,汪秀娟,赵瑞宏,蒋书东;绩溪县浩寨兔病毒性出血症的诊断[J];安徽农业科学;2002年02期
8 金光明,杨倩;猪繁殖与呼吸综合症免疫学研究[J];安徽农业科学;2003年01期
9 沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡传染性法氏囊病病毒冻干保护剂热稳定性研究[J];安徽农业科学;2004年01期
10 沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡新城疫病毒耐热冻干保护剂的研究[J];安徽农业科学;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄金秋;梅建国;沈志强;;赤羽病病毒检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 庄金秋;梅建国;沈志强;;犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 冷超粮;安同庆;田志军;;猪繁殖与呼吸综合征病毒中和抗体的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 孔宁;高继明;马玉萍;赵钦;王承宝;肖一红;周恩民;;高致病性PRRSV感染处于不同细胞周期Marc-145细胞的比较分析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
6 陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
8 程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
9 赵东升;盖新娜;孙栋;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎灭活疫苗的制备及小鼠免疫研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
10 方忠意;崔保安;;动物基因工程疫苗研究进展[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 毛慧娟;新型血液净化方式治疗多器官功能障碍综合征及其对免疫功能影响的实验和临床研究[D];南京医科大学;2009年
2 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
3 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
4 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
5 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
6 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
8 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
10 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋飞;猪圆环病毒2型(WH株)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合感染致病性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
3 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
4 李燕;猪干扰素刺激基因ISG20的克隆、真核表达及其对PRRSV增殖的影响[D];华中农业大学;2010年
5 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
6 肖犟;PRRSV对断奶仔猪生产性能和免疫力相关指标的影响[D];华中农业大学;2010年
7 王艳伟;PRRSV感染激活RANTES产生的信号通路研究[D];华中农业大学;2010年
8 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
9 丁烨;骨髓间充质干细胞对白血病细胞生长影响的研究[D];南京医科大学;2009年
10 许莹;H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究[D];南京医科大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金光明,杨倩;猪繁殖与呼吸综合症免疫学研究[J];安徽农业科学;2003年01期
2 姜平,陈溥言,姜志华,蔡家利,董永毅,蔡宝祥;我国两个不同地区猪繁殖和呼吸综合征病毒分离株ORF5基因序列比例[J];病毒学报;2000年01期
3 方六荣,肖少波,江云波,牛传双,张辉,陈焕春;表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5的重组伪狂犬病毒TK~-/gG~-/GP5~+的构建及其生物学特性初步探讨[J];病毒学报;2004年03期
4 高志强,郭鑫,陈艳红,查振林,杨汉春;猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-1(sh)/2002株全基因组分子特征分析[J];病毒学报;2004年03期
5 秦晓光;金宁一;沈国顺;尹荣兰;庄天中;郑敏;马鸣潇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白实验性核酸疫苗的构建及其免疫原性的初步研究[J];病毒学报;2006年05期
6 刘光清;云涛;王根荣;倪征;;猪生殖与呼吸综合征病毒的基因组及致病的分子基础[J];病毒学报;2007年01期
7 周俐梅,王嘉玺;病毒抗感染免疫应答的防御机制[J];病毒学报;1998年03期
8 颛锡良;;专家分析猪高致病性猪蓝耳病流行特点[J];北方牧业;2007年13期
9 刘国信;;高致病性猪蓝耳病的综合防治[J];北京农业;2007年22期
10 韦海涛;赵景义;李栋梁;赵浩军;李秀敏;姚学军;;浅谈高致病性猪蓝耳病的特点及其防控[J];北京农业;2007年24期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 徐引弟;宋念华;张厚芝;马力;胡智斌;李德学;谢军;;猪繁殖与呼吸综合征血清学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
2 罗才文;周作红;钟细苟;龚冬尧;李丕洪;;江西省猪繁殖与呼吸综合征血清学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 桑传兰;PRRSV 感染的仔猪体内病毒抗原分布和临床、病理变化研究[D];新疆农业大学;2002年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高云,何少瑜;猪繁殖与呼吸综合症研究概述[J];福建畜牧兽医;2000年04期
2 邱昌庆;用PRRSV分离株制备抗原与抗血清反应[J];畜牧兽医科技信息;1998年02期
3 张婉华,叶向阳,祁贤,朱永军,陆鑫芳;PRRSV-S_A株在组织培养上增殖及某些生物学特性[J];上海畜牧兽医通讯;2002年05期
4 王居平,向瑞平,吴玄光,唐兆新;猪繁殖与呼吸综合征的诊断和防制[J];中国兽医杂志;2005年01期
5 乐敏,陈焕春,邱德新,钱平;猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2004年03期
6 李凯年;用位点杂交检测细胞培养物和组织中的PRRSV[J];畜牧兽医科技信息;1997年12期
7 邱昌庆;猪PRRSV美国株的结构多肽[J];畜牧兽医科技信息;1997年20期
8 BongK,徐涤平,姜天童;用PRRSV大、小空斑变异株双重感染新生和三周龄仔猪的试验[J];湖北畜牧兽医;1998年02期
9 仇华吉,童光志;猪病研究新进展<一>[J];畜禽业;2002年10期
10 李凯年;用位点杂交法检测自然感染仔猪肺中PRRSV核酸[J];畜牧兽医科技信息;1999年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王金凤;张岭岭;王娇;赵泽坤;孙继国;袁万哲;;高致病性PRRSV河北地方株的分离鉴定及部分Nsp2基因变异分析[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
2 韩庆安;朱振荣;张永辉;张子佳;刘红;尹克勇;杨刚;王玉清;;2004~2008年河北省规模猪场PRRSV感染情况调查[A];2010畜牧业与低碳经济科技论文集[C];2010年
3 文明;毛君婷;史开志;周碧君;王开功;;贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年
4 夏平安;李艳伍;张红英;杨霞;崔保安;卢中华;;猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR诊断方法的建立及应用[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
5 蒋文明;姜平;李玉峰;吴胜昔;许家荣;;由减毒沙门氏菌介导的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的口服免疫应答[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
6 张冲;赵钦;孔宁;黄柏成;杜永坤;张昂克;孙鹏;刘洪亮;高继明;姬鹏超;王向鹏;周恩民;;新型PRRSV细胞受体阻断蛋白在猪体内阻断作用初探[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 陈义平;刘秀梵;;PRRSV的免疫生物学特性[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
8 姜平;;猪繁殖与呼吸综合征防制研究新动态[A];现代化养猪企业经营管理研讨会论文集[C];2004年
9 韩先杰;王金宝;王宏伟;;猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)TCID_(50)的测定[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年
10 黄良宗;王淑敏;陈伟强;邓伟立;顾万军;;酶标鸡抗猪IgY在PRRSV间接ELISA检测中的应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 农业部动物疫病诊断与流行病学中心主任 崔尚金博士;猪呼吸与繁殖综合征流行特点、危害状况及防制策略[N];中国畜牧兽医报;2005年
2 中牧;PRRSV活疫苗的使用[N];农民日报;2005年
3 瑞普(保定)生物药业有限公司 李建丽;猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的特点及免疫机制[N];中国畜牧兽医报;2009年
4 余木;PRDC和疫苗的效果[N];中国畜牧报;2005年
5 ;怎样让新购仔猪不得病[N];吉林农村报;2005年
6 梁久梅;养猪新法:离地笼养仔猪[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;2007年
7 刘万珍;春季如何养好仔猪[N];湖北科技报;2008年
8 祈东;仔猪的春季饲养[N];大庆日报;2008年
9 记者 张文;我市仔猪价格大幅上涨[N];巴彦淖尔日报(汉);2008年
10 江东洲 江焰;中国首批性别控制仔猪在广西诞生[N];科技日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蔡锦顺;PRRSV GP5与M蛋白重组犬2型腺病毒的构建及其免疫特性研究[D];吉林大学;2010年
2 周铁忠;辽宁省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查及免疫防制研究[D];吉林大学;2010年
3 李广明;靶向PRRSV及其PAM细胞病毒受体基因shRNA重组腺病毒的构建与抑制PRRSV复制研究[D];南京农业大学;2009年
4 刘永宏;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病理学研究及其病毒的序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
5 蔡雪辉;PRRSV流行毒株NSP2遗传变异分析及其活疫苗的安全性评价[D];吉林大学;2012年
6 邢凤;猪抗PRRSV相关基因的鉴定及功能分析[D];山东农业大学;2011年
7 张磊;感染PRRSV GD株强弱毒株Marc145细胞的差异表达基因筛选及调控研究[D];西北农林科技大学;2011年
8 方莹;激活NF-κB信号通路的高致病性PRRSV非结构蛋白的筛选及其作用机制研究[D];华中农业大学;2012年
9 杨永倩;HP-PRRSV HuN4株感染仔猪发病过程中蛋白质分子演化网络的系统生物学研究[D];西北农林科技大学;2012年
10 郝晓芳;甘肃省猪繁殖障碍性疾病病毒性病原的分子流行病学调查及HP-PRRSV DNA疫苗的研究[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 荣福龙;高致病性PRRSV在仔猪体内动态分布和体外增殖特性的研究[D];东北农业大学;2010年
2 姚雪静;PRRSV安徽株的分离鉴定及感染仔猪病理学的研究[D];安徽农业大学;2010年
3 王美君;临床健康猪群中PRRSV的分离与鉴定[D];山东农业大学;2010年
4 宫大庆;高致病性PRRSV HuN4株感染仔猪过程中淋巴结蛋白质组学研究[D];黑龙江八一农垦大学;2011年
5 李珈莹;PRRSV GP4、GP5基因的克隆及原核表达[D];延边大学;2010年
6 曹永芝;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的气溶胶传播机制[D];山东农业大学;2010年
7 赵泽坤;高致病性PRRSV的RT-PCR鉴别诊断方法的建立及应用[D];河北农业大学;2010年
8 张冲;野猪源PRRSV Shaanxi-2株分离鉴定、全基因测序及遗传进化分析[D];西北农林科技大学;2010年
9 邱洪凯;蓝耳病病毒克隆测序、单克隆抗体制备及唾液酸粘附素的克隆表达[D];山东农业大学;2010年
10 王娇;两株PRRSV结构蛋白基因变异分析及M基因的表达[D];河北农业大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026