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《安徽农业大学》 2001年
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玉米对生基因的SCAR分子标记及其标记片段序列分析研究

谢传晓  
【摘要】: 本研究通过构建适合的玉米对生性状显性基因近等基因系及其后代群体,用 RAPD方法在近等基因系混合池间进行了RAPD标记筛选工作,对稳定的RAPD标 记在F_2群体中进行了扩增与连锁分析,把紧密连锁的RAPD多态性标记进行了 SCAR标记转化,成功地获得了与两个玉米对生显性基因连锁的SCAR标记,并对 克隆的SCAR片段进行了相关序列分析,结果表明: 1、构建的H14D对生系与H53互生系间,在对生性状表现上存在两对显性基因差 异,且两基因独立并具有互补作用; 2、利用167个十碱基随机引物,筛选H14D与H53近等基因系建立的对生池与互 生池,共获得S312、S218、S360等11个稳定的多态性引物; 3、通过11个多态性引物在F_2群体的251个单株分别进行RAPD扩增及连锁分析, 结果显示:RAPD_S312、RAPD_S218与对生显性基因Opp_1紧密连锁,其连锁 图距分别为3.0cM和5.2cM;S360与对生显性基因Opp_2紧密连锁,其连锁图 距为5.2cM。 4、11个标记之间的连锁关系分析表明:RAPD_S312与RAPD_S218两标记本身也 存在连锁,两标记的连锁图距为8.7cM,位于同一连锁群上对生显性基因Opp_1 的两侧;RAPD_S360与RAPD_S312和RAPD_S218位于不同连锁群。这三个 标记分别与玉米对生性状两个不同的显性基因连锁,其中用RAPD_S312与 RAPD_S218定位区域能包含对生显性基因Opp_1。 5、成功地将RAPD_S312、RAPD_S360分别转化成SCAR标记CBJ312和CBJ360, 并对对生玉米亲本池、互生池、F_2单株进行了SCAR标记检测,在对生池和F_2 的RAPD_S312阳性单株中CBJ312的阳性率为100%,F_2的RAPD_S312阴性单 株没有检测到CBJ312扩增;在对生池和F_2的RAPD_S360阳性单株中CBJ360 的阳性率为100%,F_2的RAPD S360阴性单株没有检测到CBJ312扩增。 6、通过Database搜寻,发现CBJ312序列与大鼠微管结合蛋白tau蛋白的mRNA 及氨基酸序列同源性非常高,其第126至375号碱基之间的序列核苷酸序列与 tau蛋白序列同源性达92%,相应序列的可能氨基酸序列同源性达99%。最长可 能ORF也位于上述区域。CBJ360与水稻、人、果蝇等多种生物基因组的已知序 列具有很高的同源性,其中CBJ360序列的第11号至第588号共578个碱基与水 稻第一条染色体上的PAC克隆(AP002873)中第61至第638号578个碱基序列 同源性达100%。这些信息的获得有助于进一步了解这两个克隆片段的功能。 综上所述,本研究在对生玉米显性基因的分子标记上取得了重要的进展,筛 选获得了与两对显性基因紧密连锁的RAPD标记,并在国内首次成功地把玉米的 IUpD标记转化成 SCAR标记,分别获得了对gf:ll’T’两对显性基因 Oppl、仲p丁 的沈AR标记CBJ3 12与CBJ360。这些研究成果将为对生玉米的分子标记辅助选择。 对生基因的定位及图位克隆奠定了良好的基础。
【学位授予单位】:安徽农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S513

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【共引文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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10 张晓黎;番茄耐贮藏基因标记开发及辅助自交系选育[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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4 罗维真;王雅春;孙东晓;张毅;俞英;张沅;;结合MOET技术的奶牛标记辅助选择方案研究[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
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3 苏爱莲;一个新的抗小麦白粉病基因的RAPD标记及在育种中进行标记辅助选择的研究[D];甘肃农业大学;2000年
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5 李积友;标记辅助选择(MAS)在甘肃滩羊选育中的应用研究[D];甘肃农业大学;2003年
6 王瑞飞;番茄抗病基因Ty-3的分子标记及其在辅助选择中的应用[D];河北科技大学;2013年
7 吴玲;基于表达序列标签的玉米单核苷酸多态性标记开发[D];四川农业大学;2010年
8 赖云松;Bt抗虫三系杂交稻保持系的分子标记辅助选育[D];浙江大学;2008年
9 韩璀璇;番茄抗病基因Ty-1的分子标记及其在辅助选择中的应用[D];河北科技大学;2011年
10 郑燕;稻瘟病抗性基因Pi-2(t)紧密连锁的SSR标记的筛选及其应用[D];福建农林大学;2004年
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