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《安徽农业大学》 2002年
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应用虫生真菌防治天牛的研究

徐金柱  
【摘要】: 为了更好的应用昆虫病原真菌防治森林害虫,充分发挥其在森林害虫综合治理中的作用,本文研究了真菌的一种新剂型—无纺布菌条制剂的制作及应用,包括绿僵菌菌株Ma83无纺布菌条制作的一些工艺参数的确定和无纺布菌条在林间防治松墨天牛和光肩星天牛的应用方法,为林间更好地应用昆虫病原真菌提供参考依据。 绿僵菌Ma83液体摇瓶试验确定了液体种子的培养基参数。以生物量为指标,通过液体摇瓶试验确定了绿僵菌Ma83液体种子培养参数,对不同的氮源(蛋白胨、黄豆粉、酵母粉、蚕蛹粉、尿素、NaNO_3)、碳源(白砂糖,葡萄糖,蔗糖,马铃薯,麸皮)、氮源浓度(1%,2%,2.5%,3%,3.5%)和碳源浓度(2%,3%,4%,6%,10%)的进行单因素分析,确定最佳液体培养的营养条件。此外还研究了初始pH对该菌株液体培养的影响,确定液体培养的最佳酸碱度。结果表明,绿僵菌Ma83液体种子培养最佳营养条件为4%黄豆粉+2%白砂糖;培养基初始酸碱度试验表明,培养液过酸或过碱对菌丝的生长不利,在pH6.3—6.5该菌生长的最佳酸碱值。 无纺布菌条的培养过程中,营养因子和环境因子均影响无纺布单位面积的产孢量,因而直接影响无纺布菌条的质量。以无纺布菌条单位面积的产孢量为指标,通过L16(4~4)正交试验,从不同碳源(白砂糖、葡萄糖、马铃薯、麸皮)、氮源(黄豆粉、酵母粉、蛋白胨、尿素)及不同碳、氮源浓度中筛选出无纺布菌条培养的最佳营养组合,并通过单因素试验确定蛋白胨和琼脂对产孢量的影响。结果表明,2%葡萄糖+4%黄豆粉为绿僵菌Ma83菌株菌条培养的最佳营养组合,但用2%白砂糖替代葡萄糖对其产孢量无明显影响,而生产成本可大幅度降低,因此筛选出生产用培养基为2%白砂糖+4%黄豆粉。在培养基中添加0.6%蛋白胨可以明显提高菌条的单位面积的产孢量,而琼脂的含量在平铺式培养中对产孢量无明显影响。 单因素试验确定了最佳的培养温度、湿度及pH。结果表明RH 95%和25℃条件下最有利于该菌的产孢,起始pH对菌条的产孢有一定的影响,但影响不如液体培养大,在供试的pH4.5-8.0范围内,菌条均可产孢,其中以 pH6N6.5产抱最好,产抱量可达 3.6占.7 xM抱子/cmZ。 从野外采集的菌株中选择毒力较强、产抱量高的8株绿僵菌和一株白僵 菌,对45龄的松墨天牛(M ahernatUs)幼虫进行生物测定,每个重复喷雾 接种 IX 108抱子/ml的抱子悬浮液 lml,每个处理 3个重复,接种后在 25土1 oC恒温箱中饲养,每天检查天牛死亡及感染情况,以天牛的死亡率及感染率 及致死中时(LT50)为指标综合评价不同菌株,筛选供试菌株中对松墨天牛 幼虫毒力最强菌株。结果筛选出表明对松墨天牛幼虫的毒力最强的两菌株一 Ma83和Bb202,其致死中时分别为4,57d,4.86d,感染率分别为85.2%,84刀%。 将Ma83和Bb202两菌株培养制作成无纺布菌条,并应用于林间防治松 墨天牛成虫。选择三块立地条件一致的试验地,分别设置为白僵菌(Bb202) 处理区、绿僵菌(Ma83)处理区和不处理的对照区。在松墨天牛羽化初期, 在试验地内的每个树上于树干高2.sin处环挂一条无纺布菌条,当年冬天调查 放菌区和对照区松树的虫株率和死树率,并结合样木解析对试验区进行效果 调查,比较不同菌株的防治效果。结果表明,所用的两个菌株对松墨天牛成 虫均有一定的防治作用,白僵菌处理区、绿僵菌处理区和对照区的虫株率分 别为1.31%、3刀5%和5.37%,死树率分别为085%、2.71%、和4.59%,虫株 率及死树率均有所下降,放菌区与对照区间经方差分析差异显著,说明所用 菌剂对天牛的防治起一定的作用。两菌株相比,白僵菌处理区的防治效果好 于绿僵菌区。 林间带菌量及分生抱子在无纺布菌条上宿存检测表明,林间空气中带菌 量和无纺布菌条的单位面积带菌量在放菌后前半个月内下降很快,半个月后 的下降速度明显减缓,放菌后一个月,白僵菌和绿僵菌无纺布菌条的带菌量 仍达1.155X108/cmZ和 0.922X108/cmZ,活抱率分另达至55.45%和44石%。 引诱剂和无纺布结合防治松墨天牛的试验结果表明,应用这种放菌方式 与规模放菌的防治效果相近,两种处理间差异不显著,是一种值得进一步研 究的无纺布应用策略。除了能有效减少菌条的用量和挂无纺布的用工量,还 能利用小蠢等其它昆虫的携播作用,在林间对真菌起到有效的传播作用。 应用日本生产的布氏白僵菌菌条(产品名为 BioLisa Kamim叫通过挂 笼进行林间防治光肩星天牛试验,探讨不同的放菌方式(悬挂无纺布菌条和 喷雾放菌)对光肩星天牛成虫死亡率、产卵量及真菌活泡率的影响,结果表 明悬挂无纺布菌条放苗对成虫的杀伤力明显高于喷粉放菌,尤其是在放菌后 17 的3—7天,成虫的死亡率和感染率经Duncan新复极差检验达显著水平,成 虫的产卵量也显著低于喷雾放菌。结果说明无纺布菌条处理对当代成虫及下 代虫口均起一定的抑制作用。不同放菌方式对抱子活力的影响试验表明,无 纺布菌条上抱子的活率明显高于喷雾组,10天后无
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