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《安徽农业大学》 2002年
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葛属植物RAPD分析

唐俊  
【摘要】: 从72个随机引物中筛选出了18个引物在13个不同的种和类型的葛资源中具有RAPD多态性。扩增出的片段分子量在0.3~3kb之间,条带数在1~16条之间,共扩增出171个标记,样品间相同的标记有20个,多态性标记有151个,多态性标记达80%。计算了它们之间的遗传距离,用类平均法进行了聚类,并讨论了它们之间的亲缘关系。 从聚类图可以看出,在遗传距离0.53处,可以明确聚成5组,即Ⅰ组:材料1,3,12,13,7,2;Ⅱ组:材料8,9,10;Ⅲ组:材料5,6;Ⅳ组:材料4;Ⅴ组:材料11。其中,组Ⅰ和组Ⅱ又可分为亚组。 材料1和3均为野葛(P.lobata)且分别来自美国的不同州,材料12和13为野葛(P.lobata)且均产于安徽潜山县,材料5和6也同为野葛(P.lobata)且均产于陕西宝鸡市。它们首先分别聚到了同一亚组或组中。材料8,9和10均来自广东的不同地区,亲缘关系较近而聚到了同一组中,同时材料8和9均为粉葛(P.thomsonii),所以在更近的遗传距离处又聚到了同一亚组。材料11为越南葛(P.montana),它与其它材料间的亲缘关系较远,故单独成组且在较远的遗传距离处与其它材料聚在一起。材料4为从美国引进的野葛(P.lobata),在中国安徽栽培,它与同一个种的其它美国葛亲缘关系相距较远,我们认为在很大程度上是由于受安徽当地生态环境的影响较大,基因型改变较大,因而在聚类图上也单独成组。材料7原产地在陕西,为野葛(P.lobata),它与原产地为其它地区的野葛聚在同一组,所以它们很可能是起源较早时期的某一相同地区。 总之,不仅葛属植物不同种之间具有丰富的遗传多样性,而且葛种质资源的各种各样的变异还与地理上的分布呈一定的相关性。我们发现,外界环境条件和长期的自然选择作用对葛资源的基因组成和遗传变异影响较大。
【关键词】:葛属 RAPD 类平均聚类法 茶园生物防治
【学位授予单位】:安徽农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:Q943
【目录】:
  • 中文摘要4-5
  • 英文摘要5-7
  • 前言7-15
  • 1. 国内外研究进展7-13
  • 1.1 葛属植物研究概况7-8
  • 1.2 RAPD技术8-13
  • 1.2.1 RAPD技术的原理9
  • 1.2.2 RAPD的应用9-13
  • 1.3 聚类分析13
  • 2. 研究目的和意义13-14
  • 3. 研究内容14-15
  • 材料与方法15-23
  • 1. 材料15
  • 2. 仪器与试剂15-16
  • 2.1 主要仪器设备15-16
  • 2.2 主要试剂16
  • 3. 方法16-23
  • 3.1 葛叶片基因组DNA的提取、纯化及检测16-18
  • 3.1.1 基因组DNA的提取16-17
  • 3.1.2 基因组DNA浓度的检测17
  • 3.1.3 基因组DNA纯度和分子量大小的鉴定17
  • 3.1.4 基因组DNA的纯化17-18
  • 3.2 基因组DNA的扩增18-23
  • 3.2.1 引物的选择18-20
  • 3.2.2 RAPD条件的优化20-21
  • 3.2.3 扩增反应体系的建立21
  • 3.2.4 扩增产物的电泳21-22
  • 3.2.5 凝胶的拍照22
  • 3.2.6 数据统计与处理22-23
  • 结果与分析23-42
  • 1. 葛叶基因组DNA的提取23
  • 2. RAPD扩增产物的电泳23-33
  • 3. 原始数据的记录33-37
  • 4. 数据统计37-39
  • 5. 样品间遗传距离的计算39
  • 6. 聚类分析39-42
  • 讨论42-46
  • 1. 基因组DNA的提取42
  • 2. 基因组DNA的纯化42-43
  • 3. 基因组DNA的定量43
  • 4. RAPD的优点43
  • 5. RAPD的可靠性研究及扩增体系的优化43-46
  • 5.1 模板DNA纯度43
  • 5.2 模板DNA浓度43-44
  • 5.3 MgCl_2浓度,dNTP浓度和引物浓度44
  • 5.4 Taq聚合酶44
  • 5.5 PCR反应体积44
  • 5.6 扩增反应循环数44-45
  • 5.7 预变性时间45
  • 5.8 变性温度和退火温度45-46
  • 结论46-47
  • 参考文献47-51
  • 致谢51-52
  • 作者简介52

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 韩萍;常爱武;李娟;王旗;朱明君;;高效液相色谱法建立野葛根指纹图谱的研究[J];河南工业大学学报(自然科学版);2006年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 段理清;大别山野葛生长过程中植物化学物及主要营养成分变化规律的研究[D];郑州大学;2006年
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【参考文献】
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10 庄炳昌,王玉民,徐豹,惠东威,顾京,陈受宜;中国不同纬度不同进化类型大豆的RAPD分析[J];科学通报;1994年23期
【共引文献】
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3 张晗;高永超;沙伟;李汝玉;戴双;;紫萼藓科植物DNA提取及遗传多样性的分析[J];山东农业科学;2006年01期
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5 丁照华;吴洪飞;刘治先;汪黎明;孟昭东;杨菲;张发军;;山东省主要审(认)定玉米杂交种种质分析[J];山东农业科学;2008年06期
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7 孟昭东,郭庆法,汪黎明,刘治先;热带、亚热带玉米种质引用研究[J];山东农业科学;1998年06期
8 李占东;童存铭;蒋美俊;张韬;林英任;;针叶树生散斑壳属部分种内及近似种间的RAPD分析[J];安徽农学通报;2006年12期
9 葛秀秀;关雪莲;沈红香;田晔林;于建军;张妍;郭蕾;;四种耐寒植物的RAPD分析[J];安徽农学通报;2007年04期
10 张鹤山;刘洋;;葛资源利用现状及发展前景[J];安徽农学通报;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 李新海;李晓辉;高文伟;李明顺;田清震;;DNA分子标记在玉米品种纯度鉴定中的应用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
3 李玉玲;王延召;吕德彬;陈绍江;汤继华;;爆裂与普通玉米自交系间的遗传关系及杂种优势预测研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
4 张仁和;薛吉全;毛建昌;马国胜;杨引福;;DNA分子标记与玉米种质研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
5 程颖;解超杰;倪中福;彭惠茹;聂秀玲;杨作民;刘志勇;孙其信;;小麦品种贵农21抗条锈病基因的SSR标记[A];中国作物学会2005年学术年会论文集[C];2005年
6 刘炜;李自超;史延丽;王坚;马洪文;张洪亮;;利用SSR标记进行粳稻品种的遗传多样性研究[A];2005年全国作物遗传育种学术研讨会暨中国作物学会分子育种分会成立大会论文集(二)[C];2005年
7 番兴明;陈洪梅;张建华;谭静;刘峰;段鸿飞;米艳华;杨晓洪;张培高;徐春霞;吕宏斌;汪燕芬;;云南地方品种与玉米多样性中心群体主要农艺性状配合力分析[A];中国作物学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 丁玉梅;杨正安;周晓罡;张绍松;孙茂林;;Bt基因转入烟草叶绿体获得转化植株的研究[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
9 余传元;赵志刚;陈平;江玲;翟虎渠;万建民;;利用CSSL群体研究水稻籼粳亚种间杂种的育性[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集(下册)[C];2006年
10 高志红;章镇;姚泉洪;刘雪兰;张玉明;;花梅几个类型的代表品种RAPD指纹图谱初探[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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2 张升祥;家蚕气味结合蛋白基因的研究[D];山东农业大学;2009年
3 刘永刚;基于微卫星DNA标记的马铃薯桃蚜不同种群遗传分化研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 林荔辉;应用分子和常规技术通过籼粳交选育亲籼型水稻雄性不育系[D];福建农林大学;2010年
5 刘成;多年生簇毛麦基因组新重复序列的分离及其在小麦抗病新种质鉴定中的应用[D];电子科技大学;2010年
6 关正君;樱桃番茄的HBsAg基因转化及其突变体特性研究[D];西北大学;2011年
7 王玉山;侧柏种源遗传多样性与地理变异规律研究[D];山东农业大学;2011年
8 管延安;甜高粱遗传图谱的构建及能源相关性状的QTL定位[D];山东农业大学;2011年
9 张逢春;肿瘤标志物检测方法及药用植物羊蹄品质生态学研究[D];吉林大学;2011年
10 戚晓利;拟南芥花异常株系AFDL的花发育及基因表达分析[D];东北林业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李良;湖北省油茶优良单株遗传多样性及品质初步分析[D];华中农业大学;2010年
2 姜珍;小麦根渍水形成通气组织过程中细胞壁降解与Ca~(2+)相关研究[D];华中农业大学;2010年
3 高伟;四倍体棉种的遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
4 闫小丹;八倍体小偃麦与天蓝偃麦草杂交后代的分子细胞遗传学研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
5 王庆专;小麦骨干亲本碧蚂4号及其姊妹系遗传差异分析[D];山东农业大学;2010年
6 杜斌;小麦芒长抑制基因B1近等基因系的鉴定及遗传分析[D];山东农业大学;2010年
7 王京梅;叶籽银杏叶生雌性生殖器官发育相关基因的克隆与序列分析[D];山东农业大学;2010年
8 杨培浩;不同小麦品种的细胞遗传学研究及SSR遗传多样性分析[D];安徽农业大学;2010年
9 王新新;~(60)Coγ射线辐照毛竹种子的生物学诱变效应[D];安徽农业大学;2010年
10 蒋玮;不同类型啤酒大麦品种遗传多样性及遗传差异的SSR分析[D];甘肃农业大学;2010年
【同被引文献】
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4 王晃,李梦龙,覃洁萍,刘仲义;建立中药指纹图谱 保证中药产品质量[J];成都中医药大学学报;2002年03期
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1 秦丹;葛根采后主要成分及生理生化指标变化初探[D];湖南农业大学;2002年
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【二级引证文献】
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3 韩萍;裴兰英;李娟;张蕾;张洪权;许东;;葛根粗提物、葛根素对肺癌H446细胞增殖的抑制作用及其机制[J];山东医药;2008年15期
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中国硕士学位论文全文数据库 前5条
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10 陈洪,朱立煌,杨靖,薜国雄;RAPD技术在异精激发方正银鲫比较研究中的应用[J];科学通报;1994年07期
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10 曾明,郑水庆,张汉明,苏中武;葛属药用植物的资源利用研究概况(摘要)[J];药学实践杂志;2000年05期
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1 黄胜阳;;葛属植物综合开发利用的研究[A];中国自然资源学会全国第二届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1997年
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 唐俊;葛属植物RAPD分析[D];安徽农业大学;2002年
2 刘改霞;葛根异黄酮的发酵提取工艺及其抗氧化性研究[D];南京农业大学;2010年
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