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《安徽医科大学》 2011年
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冠心病患者外周血中ER-α基因启动子区异常甲基化及其mRNA表达的研究

靳松  
【摘要】:目的:心血管疾病是现代社会严重威胁人类健康的主要疾病,冠状动脉粥样硬化及其并发症在心血管疾病中占了相当大一部分比例。有关动脉粥样硬化发病机制的学说很多,但至今仍有许多细节机制有待阐明。近年来研究认为表观遗传学机制特别是特异基因的异常甲基化在冠状动脉粥样硬化的发生和发展中亦起着重要的作用,成为研究的热点。本研究分别采用甲基化特异性PCR(MSP)方法和实时荧光定量RT-PCR方法检测冠状动脉粥样硬化患者和没有发现动脉粥样硬化的健康人的外周血中雌激素受体-α(ER-α)基因的甲基化状态和mRNA的表达水平,通过结合相关临床资料探讨ER-α基因启动子异常甲基化与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。 方法:纳入2009年11月至2010年3月在安徽省立医院心内科就诊的经冠脉造影确诊为冠心病患者共40例作为试验组,同时纳入20例年龄相当的经冠脉造影和颈动脉超声检查均未发现动脉粥样硬化的健康人作为对照组,试剂盒提取基因组DNA,经过亚硫酸氢盐处理后,应用甲基化特异性PCR(MSP)方法和实时荧光定量RT-PCR了解ER-α基因启动子CpG岛甲基化的状况及其基因mRNA表达的关系,并结合相关临床资料分析该基因甲基化程度与临床参数之间的关系。 结果:(1) 40例冠心病组患者和20例对照组成员的外周血液标本中ER-α基因甲基化阳性的共有42例,占总人数的70%;其中冠心病组患者血液标本的甲基化阳性人数为31人,其甲基化阳性率为77.5%;对照组成员血液标本的甲基化阳性人数为11人,其甲基化阳性率为55%,两组甲基化阳性率比较有统计学意义(P0.05)。(2)对于ER-α基因的mRNA表达水平来说,所有甲基化阴性的标本中mRNA表达水平是甲基化阳性标本的4.5倍,而冠心病组和对照组间mRNA表达量的差别倍数为2.57。(3) ER-α基因甲基化阳性率在年龄大于等于60岁的人中明显高于小于60岁的人群,差异有统计意义,而对于性别,吸烟,相关病史的比较中没有发现显著性差异。 结论:在冠状动脉粥样硬化患者外周血中ER-α基因的异常高甲基化是导致其mRNA表达缺失的主要原因,其在动脉粥样硬化的发生、发展中可能起到重要的推动作用。本研究在一定程度上探讨了冠脉粥样硬化发生的表观遗传学机制,将可能为以后的分子生物学研究提供一定的参考价值。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R541.4

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【参考文献】
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