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盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠早期肝脏血管内皮细胞和肝损伤变化及其相关性研究

赵浩东  
【摘要】:目的:本实验采用大鼠盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,动态观察脓毒症大鼠早期肝脏细胞功能变化与肝脏血管内皮细胞损害情况,初步探讨两者是否具有一定的相关性及其可能机理。 方法:SD大鼠66只,雌雄不拘,随机分为3组:(1)正常对照组(n=6),动物于麻醉后,称重,经腹主动脉采血,采用酶联免疫分析法检测血清鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT),血清可溶性E-选择素(sE - selectin),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。大鼠处死,采取少许肝窦组织行电镜观察血管内皮细胞(VEC)损伤情况,用电子秤称量肝脏湿重,于80℃烤箱留存48h后,称量肝脏干重。并计算肝水含量;(2)假手术组(n=30),动物麻醉后行盲肠探查术后关闭腹腔,分别于术后3,6,12,24和48h五时点行与正常对照组相同的操作步骤,每时相点6只大鼠;(3)脓毒症组(n=30),动物行盲肠结扎穿孔(CLP)术后3,6,12,24和48h五时点行与正常对照组相同的操作步骤,每时相点6只大鼠。 结果:1.脓毒症组在CLP术后3h血清OCT水平即升高(5.9805±0.07u/l),与正常对照组和假手术组相比差异有统计学意义(P0.05),且逐步升高,在24小时以后,扔保持较高的水平。2.血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于正常对照组与假手术组(P0.01),在24h达峰值(390.94±27.70 pg/ml),随后有下降趋势,但仍显著高于正常对照组和假手术组(P0.01)。3.CLP术后3h血清sE - selectin水平开始升高(1.6292±0.01ng/ml),高于正常对照组与假手术组(P0.05),且随着时间的推移,一直保持较高的水平。4.肝脏水含量在CLP3小时以后逐渐增加,但直到伤后12h才出现明显变化(P0.05)。5.电镜下观察肝脏血管内皮细胞(VEC)在脓毒症发展过程中损害逐渐加重,且根据《黎鳌烧伤学》血管内皮超微结构损伤评分标准,内皮细胞损伤程度随时间推移分值逐渐增高。6.所有数据以“均数±标准差”表示,采用SPSS 13.0统计软件包进行分析,样本均数间的比较采用t检验;OCT和sE - selectin,TNF-α和sE - selectin的相关性分析采用Spearman等级相关分析。OCT和sE– selectin;TNF-α和sE - selectin具有显著正相关,Spearman相关系数分别0.947和0.781,均为P0.01。 结论:1.在脓毒症致急性肝损伤发病过程中,肝脏巨噬细胞参与了肝损伤的发生和发展,TNF -α是诱导sE - selectin上调的重要因子。2.肝脏血管内皮细胞损伤与肝脏功能的损伤具有显著正相关,提示肝脏血管内皮细胞在肝损伤过程中可能发挥重要作用。3.sE - selectin含量随着病情的加重而升高,早期检测sE - selectin,结合临床的功能指标,有助于提示器官功能损害和病程进展,及时针对治疗。


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