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《安徽医科大学》 2014年
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5种miRNA在肝癌患者血清中的表达变化情况及其诊断价值研究

孟凡龙  
【摘要】:目的:探讨肝癌组织及或细胞系中表达异常的5种miRNA(miR-155、miR-106b、miR-490-3p、miR-24、miR-335)在肝癌患者血清中表达情况,并探讨其与肝癌临床病理资料的关系及在肝癌诊断中的价值。 方法:收集2012年3月至2013年3月安徽医科大学附属省立医院普外科收治的肝癌患者67例作为肝癌组,同期体检中心体检结果正常且自述无肿瘤相关病史的体检者46例作为正常对照组,同期感染科收治的慢性乙型肝炎或肝硬化患者31例作为慢性肝病组。随机抽取所有入组实验对象中15例肝癌患者及15例正常人组成筛选实验,应用反转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其血清中5种miRNA的相对表达量,筛选出表达异常的miRNA作为目标miRNA,继续检测目标miRNA在剩余肝癌患者、慢性肝病患者及正常人血清中的表达情况。综合所有病例分析目标miRNA在肝癌患者血清中的表达情况及其与肝癌患者临床病理特征的相关性。应用受试者工作特征(ROC)曲线计算目标miRNA及AFP在诊断肝癌时的ROC曲线下面积(AUC)、诊断临界值、敏感度及特异度。采用并联方法分析目标miRNA及AFP单独与联合检测在肝癌诊断中的价值。 结果:筛选实验发现在5种miRNA中, miR-106b及miR-24在肝癌患者血清表达较对照组均升高,差异有统计学意义(均P0.05),其他三种miRNA表达量在两组间未见明显差异(P0.05),因此选择miR-106b和miR-24作为候选miRNA继续验证。综合所有实验对象的检测数据发现血清miR-106b及miR-24表达水平在肝癌患者分别为5.469×10-3(2.880×10-3,10.446×10-3)、7.044×10-2(4.255×10-2,10.758×10-2),在慢性肝病患者中分别为2.332×10-3(1.318×10-3,3.780×10-3)、5.024×10-2(3.542×10-2,7.445×10-2),在正常对照组分别为1.923×10-3(1.243×10-3,3.381×10-3)、4.452×10-2(2.813×10-2,7.082×10-2),血清miR-106b及miR-24表达量在肝癌组较慢性肝病组及正常对照组差异均有统计学意义(P0.05),而在慢性肝病组与正常对照组间差异均无统计学意义(P0.05)。其中miR-106b表达水平与肿瘤分化程度、血管侵犯、TNM分期等临床病理特征显著相关(均P0.05),miR-24表达水平则仅与肿瘤血管侵犯有关(P0.05)。血清AFP浓度在肝癌组、慢性肝病组及正常对照组分别为84.45(14.26,649.38)ng/ml、12.14(6.81,27.02)ng/ml、4.63(3.23,8.63)ng/ml,三组间比较均有显著性差异(P0.05)。血清miR-106b、miR-24及AFP用于肝癌诊断时的AUC分别为0.808(与miR-24差异有统计学意义,与AFP差异无统计学意义)、0.665(与AFP差异有统计学意义)、0.836,敏感度分别为64.18%、58.21%、67.16%,特异度分别为89.61%、68.83%、90.91%。分别以miR-106b+miR-24、miR-106b+AFP、miR-24+AFP及miR-106b+miR-24+AFP作为联合诊断组合时,诊断敏感度分别为80.60%、85.07%、82.09%、91.04%,而特异度分别为61.04%、87.01%,63.64%、59.74%。 结论:(1)5种miRNA中,miR-106b和miR-24在肝癌患者血清中表达异常升高。(2)肝癌患者miR-106b、miR-24表达量与肝癌部分预后不良病理特征有关,提示这两种miRNA可能与患者预后有关,可能成为肝癌术后预后与预测复发的重要指标。(3)miR-106b是良好的肝癌辅助诊断指标,而miR-24在辅助诊断肝癌方面的价值较为有限。miR-106b联合AFP在诊断肝癌时,在显著提高敏感度的同时,维持了较好的特异性,是较好的诊断组合,可以考虑用于临床上肝癌的筛查与诊断。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R735.7

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