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《安徽医科大学》 2017年
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碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶与整合子的研究

张琪  
【摘要】:目的了解淮北市人民医院临床患者标本中分离的鲍曼不动杆菌分布特点及其对临床上常用抗菌药物的耐药情况;了解对碳青霉烯类抗菌药物耐药的鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶与整合子产生及携带情况;探讨鲍曼不动杆菌的耐药率与整合子的产生是否有相关性,为临床合理使用抗菌药物提供指导和帮助。材料与方法收集淮北市人民医院2013年1月至2013年12月临床标本中分离的鲍曼不动杆菌共65株,分析细菌的感染分布特点;采用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)检测鲍曼不动杆菌对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、米诺环素等15种抗菌药物的耐药情况。使用EDTA双纸片协同法初步筛查耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌金属酶产生情况;用改良Hodge试验初步检测碳青霉烯酶。采用PCR方法扩增碳青霉烯酶基因型(OXA-23,KPC-2,IMP-1等),并对碳青霉烯酶全编码基因进行克隆测序分析。转移结合试验检测碳青霉烯酶耐药基因的转移性,质粒提取并进行DNA分析,对碳青霉烯酶耐药基因进行定位。PCR扩增和产物序列分析鲍曼不动杆菌整合子的分布情况,并分析整合子与细菌耐药表型的相关性。结果从标本类型特点上看,以呼吸道标本最多(73.8%),其次为外科伤口分泌物(10.8%),其它类型标本只占少数。从感染科室情况来看,重症监护病房最多(47.7%),其次为神经内科(23.1%)和呼吸内科(18.5%),存在明显的科室集中趋势。65株鲍曼不动杆菌对哌拉西林的耐药率为93.8%,头孢他啶和头孢吡肟的耐药率分别为72.3%、73.8%,头孢哌酮/舒巴坦为41.5%,米诺环素为7.7%,亚胺培南和美罗培南分别为47.7%和52.3%。根据药敏试验筛选出的34株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,其改良Hodge试验结果有28株为阳性,EDTA协同试验结果全部阴性。改良Hodge试验阳性的菌株其基因扩增结果为:OXA-23阳性25株,KPC-2阳性13株。阳性菌株全编码基因TA克隆测序结果表明:OXA-23和KPC-2均未见突变。34株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中I类整合子阳性率为61.8%(21/34),碳青霉烯类敏感菌株阳性率为16.1%(5/31)。比较I类整合子阳性株与阴性株耐药表型发现,除了对哌拉西林耐药率均较高,两者之间的差异无统计学意义外,对其余14种检测的抗菌药物耐药率均有显著性差异(P0.05)。结论鲍曼不动杆菌可以从呼吸道、外伤伤口等多个部位中分离出,但以下呼吸道感染为主;淮北人民医院临床分离鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药率最低的是米诺环素,其次是头孢哌酮/舒巴坦,并且对碳青霉烯类的耐药率维持在相当高的水平;淮北人民医院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物主要耐药机制之一是产OXA-23型和KPC-2型碳青霉烯酶,未检测到OXA-24型、OXA-58型碳青霉烯酶和IMP、VIM型金属酶;碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌I类整合子阳性率明显高于碳青霉烯类敏感株;除哌拉西林外,I类整合子阳性菌株与阴性菌株对其余各抗菌药物耐药率均有显著性差异。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R446.5

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