收藏本站
《安徽医科大学》 2002年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

ELISA捕获HCMV pp65特异性IgM抗体检测病毒活动性感染

詹以森  
【摘要】: 目的:建立ELISA抗体捕获法用于检测HCMVpp65特异性IgM,以确定感染状态, 为HCMV活动性感染诊断试剂盒的研发提供理论和实验依据。方法:将HCMV AD169株感染HF细胞,粗提HCMV抗原;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 和Western-blotting筛选出HCMVpp65抗原,测定pp65抗原效价及其和特异性抗 体的亲和力:用辣根过氧化物酶(HRP)标记HCMVpp65单克隆抗体(McAb)。 通过抗人μ链包被微量滴定板,先后加待检血清和pp65抗原-酶标McAb复合物, 建立ELISA捕获HCMVpp65特异性IgM抗体方法学。用该法检测30份儿童、30 份孕妇和28份免疫缺陷者的临床血清样本,并用DIESSE公司酶免疫HCMV IgM 检测试剂盒同步检测。结果:制备的HCMV-pp65抗原PAGE胶上位于65KD Marker 处,呈单一条带,抗原效价为1:100;HRP-MCAb免疫双扩效价为1:32;检测系 统各反应物的最佳稀释度为抗人μ链0. 75μg/孔,待检血清为1:100,HCMV抗 原为1:100,HRP-McAb 1:20:两种方法的各组阳性率分别为6. 7%、13. 3%、10. 7% 和10%、13. 3%、14. 3%,总符合率为91%。结论:首次建立了简便、快捷、特异 性和敏感性均较高的ELISA捕获HCMV pp65特异性IgM抗体法,其检测结果与 DIESSE公司酶免疫HCMV IgM检测试剂盒的总符合率为91%。可用于儿章、孕 妇和免疫力低下者,诊断HCMV活动性感染,适宜向基层医院推广。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R446.61

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 杨波,彭京红,李刚,孙正芸,李雪波;母乳中巨细胞病毒检测的意义[J];临床医学;2001年04期
2 郭春祥,郭锡琼;介绍一种简单、快速、高效的辣根过氧化物酶标记抗体的过碘酸钠法[J];上海免疫学杂志;1983年02期
3 龚镇奎,黄鹤,骆林,肖红雨,龚睿;ToRCH系列酶标诊断试剂的研制[J];中国病毒学;1999年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 崔林开;叶华智;;3种ELISA法检测Bt杀虫蛋白的比较研究[J];安徽农业科学;2005年11期
2 冯挺财;邵谱;胡珩;杨正涛;张乃生;;牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立[J];安徽农业科学;2008年18期
3 张军峰;马肖兵;詹瑧;;泽漆体外抗单纯疱疹病毒活性研究[J];安徽农业科学;2008年19期
4 王细宏;;池州地区63例智力低下儿童的细胞遗传学分析[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年04期
5 钟汉燊;3477例血清甲胎蛋白酶标电泳测定报告[J];癌症;1989年01期
6 王成明,陈傅言,蔡宝祥;抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立[J];安徽农师院学报;1993年01期
7 肖真,曹守箴,张忠广,刘涛,余姣;斑点酶联免疫吸附试验检测阴道毛滴虫抗体的研究[J];青岛医学院学报;1992年01期
8 纪静;苯中毒病人外周血淋巴细胞DNA损伤的检测[J];青岛大学医学院学报;2003年02期
9 赵新东;焦飞;吴春梅;谭齐贤;卢伟;;急性白血病9号染色体微卫星复制错误的研究[J];青岛大学医学院学报;2008年04期
10 于永仁,韩慧民,贾补年,张喜明,王大庸,高云,吴玉林,杨广平,吴威;水貂病毒性肠炎的防制研究——Ⅰ.病毒的分离和鉴定[J];病毒学报;1985年02期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 鄢玲;陈宜斌;;中药洗剂对外阴阴道假丝酵母菌的体外实验研究[A];第十一次全国中医妇科学术大会论文集[C];2011年
2 吴青平;李雯;;先天性智力低下儿童69例临床、皮纹及细胞遗传学研究[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
3 刘鹏;白静;陈峰;傅松滨;;医学遗传学生物技术实验教学现状与改革[A];高等院校遗传学教学改革探索[C];2010年
4 袁肇凯;黄献平;王东生;卢芳国;胡志希;姚湘玲;郭志华;魏经汉;;心血瘀阻证遗传倾向的调查分析[A];中华中医药学会中医诊断学分会2007’年会论文集[C];2007年
5 丁建祖;王越;陈军虎;干小仙;沈慧英;沈丽英;闻礼永;;斑点金免疫渗滤法检测肺吸虫抗体的评价[A];浙江省医学科学院建院55周年院庆论文专辑[C];2005年
6 沈丽英;干小仙;丁建祖;沈慧英;樊晋江;;金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究[A];浙江省医学科学院建院55周年院庆论文专辑[C];2005年
7 张子彬;张玉传;;心力衰竭的新概念及诊疗新进展[A];第四届全国心功能学术研讨会论文摘要集[C];1994年
8 池贤凤;沈志强;;简述新城疫载体的研究进展[A];第五届中国畜牧科技论坛论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王丽萍;冠心病血瘀证遗传特征及其体质影响的研究[D];湖南中医药大学;2011年
2 刘柳;1、应用多个X-连锁基因多态性位点对骨髓增殖性肿瘤和骨髓增生异常综合征进行克隆性检测的研究 2、骨髓增生异常综合征有核红细胞糖原染色的意义[D];北京协和医学院;2011年
3 杨国兴;遗传性先天性白内障致病基因的定位和突变分析[D];北京协和医学院;2011年
4 卢超霞;糖原累积症的致病基因突变研究先天性皮肤松弛症的致病基因突变研究[D];北京协和医学院;2009年
5 张焕萍;面向基因表达数据的致病基因挖掘方法研究[D];南京航空航天大学;2009年
6 杨萍;腺病毒载体中介Bcl-2基因转染对周围神经再生修复的影响[D];第三军医大学;2002年
7 邱广斌;1.喉癌相关新基因MTLC的克隆及特性分析  2.hTERT cDNA片段的克隆、表达、单抗制备及应用研究[D];中国医科大学;2003年
8 张淑坤;固醇携带蛋白2与胆固醇结石关系的研究[D];天津医科大学;2003年
9 邢艳;hCG对人卵巢癌3AO细胞增殖凋亡的影响及其与LH/hCG受体的关系的研究[D];四川大学;2003年
10 毛以林;冠心病血瘀证与ACE、FⅦ基因多态性的相关性研究[D];湖南中医学院;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李子平;牛附红细胞体特异性抗原制备及双抗体夹心ELISA诊断方法的建立[D];中国农业科学院;2010年
2 李博;布鲁氏菌PCR检测方法的应用与分子分型研究[D];新疆农业大学;2010年
3 刘峰;新城疫免疫程序的优化[D];湖南农业大学;2010年
4 赵江丽;福氏志贺氏菌2a 301株效应蛋白IpaH9.8功能研究[D];吉林大学;2011年
5 姚毅;四株宋内氏志贺菌的比较研究[D];西南大学;2011年
6 黄熙琳;FISH技术检测流产组织染色体异常的临床应用研究[D];暨南大学;2011年
7 张婕;PAX9和MSX1基因在新疆维吾尔族先天缺牙患者中的表达[D];新疆医科大学;2011年
8 陈健;泌尿系草酸钙结石与89例患者中医体质分析[D];南京中医药大学;2011年
9 郭家敏;儿童原发性心内膜弹力纤维增生症71例临床分析与随访[D];山东大学;2011年
10 郑鑫;脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白NspA基因的克隆与原核表达[D];长春理工大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 黄鹤,龚镇奎,肖红雨,徐又农;抗-HBc检测试剂制备中3种预包被方法的效果比较[J];湖北预防医学杂志;1995年04期
2 詹发先,龚镇奎,王玉娥;两种方法提纯的抗-HBe单克隆抗体及其酶结合物的比较[J];湖北预防医学杂志;1995年04期
3 郭锡琼;郭春祥;董丽英;侯杰;;酶免疫法检测乙型肝炎e抗原[J];上海医学;1982年10期
4 闵福援,吴昊,王健,林秀玉,汪俊韬;用ELISA法检测丙型肝炎病毒IgM抗体试剂盒的研究[J];中华实验和临床病毒学杂志;1994年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张广民,王明丽,俞发舟,史百芬,李京培;自在昆明召开的全国小儿血液研究学术会议(第七次、1995)──一、特发性血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的初步研究[J];中国小儿血液;1996年05期
2 章子豪;张耀娟;史志明;申克飞;刘力田;胡志刚;Willy F.Piessens;;卫氏并殖吸虫活动性感染的诊断[J];南京医科大学学报(自然科学版);1996年03期
3 姜宏,闻良珍,凌霞珍,陈素华;检测人巨细胞病毒晚期mRNA在诊断子宫内活动性感染的价值[J];中华妇产科杂志;1999年06期
4 ;其他[J];中国医学文摘.计划生育和妇产科学;2001年04期
5 钱春艳;余传信;宋丽君;殷旭仁;王玠;许永良;张伟;;6株抗日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3单克隆抗体的鉴定及初步应用[J];中国血吸虫病防治杂志;2011年01期
6 崔君兆;我国人群弓形体感染和弓形体病的评价[J];中国公共卫生;1991年07期
7 马章亮;邵济钧;;活动性人类巨细胞病毒感染的实验室诊断[J];预防医学情报杂志;1993年03期
8 许桦,夏家珍,谢华贞,沈毓娟,程云英;673例妊娠妇女巨细胞病毒活动性感染的调查[J];铁道医学;1995年02期
9 姜凌云,周丛乐,刘景城,王颖,黄建萍,冯琪,刘纪川,那晓元,戚豫;人巨细胞病毒活动性感染的研究[J];宁夏医学杂志;1997年03期
10 王慧燕,陈素华;妊娠早期巨细胞病毒活动性感染患者可溶性白细胞介素-2受体水平与病毒宫内感染的关系[J];中国妇幼保健;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 许多荣;刘俊茹;邹外一;;动态定量检测CMV-IgM可预测白血病造血干细胞移植术后CMV活动性感染的进展[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
2 冯子敬;赵日光;王德新;;柯萨奇病毒感染和多发性硬化复发[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
3 张美英;高玉林;何俊瑛;李震中;;人巨细胞病毒相关性缺血性脑血管病患者头MRA检查分析[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
4 何荣新;严世贵;吴立东;;全髋置换治疗髋关节感染继发骨性关节炎[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年
5 马伟杭;杨美芳;范骏;周琳;;肝移植受体巨细胞病毒活动性感染与补体C3、C4变化的研究[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
6 郑晓群;张信良;陈益平;卢朝升;;尿液上皮细胞中巨细胞病毒载量预测婴儿巨细胞病毒激活感染的价值[A];2009年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2009年
7 张旋;范骏;陈晓明;高海女;杨美芳;赵宏;马伟杭;;肝移植术后糖尿病与人巨细胞病毒活动性感染及术前HBV感染初步研究[A];2008年浙江省感染病、肝病学术年会论文汇编[C];2008年
8 朱见文;何俊瑛;高玉林;李震中;;巨细胞病毒活动性感染与进展型缺血性卒中相关性研究[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
9 李忆农;冯修高;徐向进;陈频;张胜利;;大剂量地塞米松冲击治疗难治性类风湿关节炎[A];中华医学会全国风湿病学年会论文汇编[C];2003年
10 余钟声;沈征;邹朝春;郑季彦;尚世强;赵正言;;巨细胞病毒感染婴幼儿的临床表现和实验室检查(英文)[A];2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 彭龙开;肾移植术后要防巨细胞病毒感染[N];大众卫生报;2007年
2 瑞金医院器官移植中心 周佩军 副教授;肾移植的适应症和手术时机[N];上海科技报;2008年
3 陈路增;多极射频消融治疗肝转移性肿瘤[N];中国医药报;2004年
4 陈路增;多极射频消融治疗肝转移性肿瘤[N];中国医药报;2004年
5 刘华;四季当防“带状疱疹”[N];农村医药报(汉);2007年
6 主持人 陆志城;索拉非尼:首个获准上市的多靶点靶向治疗药物[N];医药经济报;2006年
7 第四军医大学西京医院耳鼻喉科教授 黄维国吴一福 整理;鼓膜成形术把握关键环节[N];健康报;2007年
8 主任医师 马潞林;哪些肾病会发展成尿毒症[N];卫生与生活报;2007年
9 栗占国 吴卫红;生物制剂治疗类风湿关节炎[N];健康报;2006年
10 刘少卿;带状疱疹怎么治[N];健康报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 王素霞;山桔颗粒对人巨细胞病毒活动性感染抑制作用的研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
2 赵平;中国人群HLA特异的HCMV串联表位腺病毒核酸疫苗的制备及免疫效果评价[D];山东大学;2009年
3 张文卿;HCMV pp150表达及E1-pp65慢病毒载体刺激T细胞免疫应答的研究[D];山东大学;2006年
4 王建宁;动态监测肾移植术后HCMV载量及HCMV性肺炎抢先治疗的临床研究[D];山东大学;2009年
5 杨丽珍;山桔颗粒对先天性巨细胞病毒感染抑制作用的研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李法锦;尿路上皮癌患者人巨细胞病毒活动性感染特异性细胞免疫状态变化的研究[D];安徽医科大学;2012年
2 孙虹;人巨细胞病毒感染对围着床期子宫内膜容受性[D];华中科技大学;2006年
3 汪国宏;人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究[D];安徽医科大学;2008年
4 李迎伟;人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性研究[D];安徽医科大学;2009年
5 张美英;人巨细胞病毒感染相关脑梗死患者头颅MRA及颈动脉超声检查分析[D];河北医科大学;2007年
6 白剑;人巨细胞病毒感染的实验室检测及其与淋巴细胞亚群分类的关系[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
7 詹以森;ELISA捕获HCMV pp65特异性IgM抗体检测病毒活动性感染[D];安徽医科大学;2002年
8 张冬娜;肾移植受者人巨细胞病毒pp65抗原及抗体检测对其活动性感染的诊断价值[D];吉林大学;2008年
9 桂敏;再生障碍性贫血骨髓组织HCMV活动性感染的研究[D];华中科技大学;2008年
10 崔寰;系统性红斑狼疮患者白细胞中HCMV分离鉴定与UL83序列特征分析[D];安徽医科大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026