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《安徽医科大学》 2003年
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黄芪总提物的抗肿瘤作用及其机理研究

许杜娟  
【摘要】:黄芪是肿瘤临床的常用中药,现代医学表明,黄芪及其某些有效组分有免疫增强及抗肿瘤作用,但其制剂仍属粗放。黄芪总提物(Total Astragalus Extract, TAE)是从黄芪中提取的有效部位群,主要由黄芪总苷(AST)与黄芪多糖(APS)组成。鉴于目前肿瘤的治疗尚不尽人意,寻找新型抗肿瘤药仍是当务之急。据此,我们采用体内、外相结合的方法,分别从整体、细胞、分子水平上,研究了TAE的抗肿瘤作用及其作用机理。主要内容概括如下: 1.对动物移植性肿瘤的抑制作用 采用小鼠肝癌(HepA)和肉瘤(S180)的实体型以及小鼠Ehrlich腹水癌。每一种瘤株的实验均重复三批。三批实验结果表明,TAE低、中、高3个剂量(15,50和150mg·kg~(-1),ig,d1-d11)治疗小鼠HepA实体型的平均抑瘤率分别为40.8%,45.8%和43.0%。治疗小鼠S180实体型的平均抑瘤率分别为57.1%,54.5%和45.9%。对Ehrlich腹水癌小鼠的生存期,TAE中、高剂量可使存活20天以上的小鼠数明显增加,20天存活率分别为54.5%和69.7%。提示TAE不仅对小鼠HepA与S180的实体型有明显的抑制作用,而且对Ehrlich腹水癌小鼠的生存期亦有一定的延长作用。对TAE两个主要部位——AST和APS的抗肿瘤作用的研究表明,AST低、中、高3个剂量(3,10和30mg·kg~(-1),ig,d1-d11)治疗小鼠 2003年安徽医科大学博士学位论文 HePA实体型的平均抑瘤率分别为35 .2%,40.8%和43.6%;治疗小鼠5180实体型 的平均抑瘤率分别为44.6%,502%和54.1%。APS低、中、高3个剂量(12、40 和120mg’k梦,ig,dl一dll)治疗小鼠HePA实体型的平均抑瘤率分别为41.3%, 53.6%和45.3%。说明AST和APS均为TAE抗肿瘤作用的活性部位。 2.免疫调节作用 用环磷酞胺(CyeloPhosphamide,CTX)或5一氟尿喀陡(5一Fluorouraeil,5一Fu) 制备正常及荷瘤小鼠的免疫抑制模型,通过体内给药和体外检测的方法,观察 TAE的免疫调节作用,实验结果表明,TAE中、高剂量均可明显升高CIX降低正 常或荷5180小鼠的胸腺指数。TAE与5一Fu合用,可使5一Fu降低的HePA小鼠胸 腺指数和血清IL-2含量上升。本文结果还表明,TAE3个剂量(15,50, 150mg’kg一1,19,d1一dll)与cTx合并治疗荷5180小鼠不仅可减轻cTx对荷瘤 小鼠脾细胞COnA增殖反应及IL一2诱生的抑制作用,还可对CTX降低腹腔巨噬细 胞产生TNF一。有明显的提升作用。体外实验结果表明,TAE(25mg·L一’)可明显促进 亚适量ConA诱导正常小鼠脾细胞增殖反应以及IL一2的产生,还可促进亚适量 LPS诱导正常小鼠腹腔巨噬细胞产生r1NF一Q。提示TAE不仅能上调正常和荷瘤小 鼠低下的免疫功能,而且对二类免疫细胞的增殖和/或分泌均有增强作用。 3.对化疗药抗肿瘤的增效作用 TAE3个剂量(10,20和40mg’kg一,,19,dl一dll)分别与cTX3个剂量 (5,10和20mg·kg,ip,dl,4,7,10)联合治疗小鼠5180实体型,或分别与 5一Fu3个剂量(5,20和Zomg·kg一,,ip,dl,4,7,10)联合治疗小鼠HepA实 体型,实验结果经药物相互作用动力学软件分析,Q值均在一1一1之间,提示TAE 与CTX或5一Fu合用均有相加作用。 2003年安徽医科大学博士学位论文 4.对肿瘤化疗药降低外周血白细胞的减毒作用 实验结果表明,TAE3个剂量(15,50和1 somg·kg”,19,dl一dll)与 cTx(80mg’kg一l,iP,d6与d7)合用于正常小鼠,可明显提升cTx降低的外周血 白细胞。此外,TAE3个剂量(15,50和1 somg·kg”,19,dl一dll)与eTx (somg·kg一,,ip,d一,4,7,10)合并治疗荷5150小鼠,在保持eTx疗效的同 时,对其降低外周血白细胞数,亦有明显的提升作用。提示TAE对CTX降低正常 与荷瘤小鼠外周血白细胞有明显的减毒作用。 5.抗肿瘤作用的机理 TAE不仅有抗肿瘤作用和免疫调节作用,而且有增效与减毒作用,符合生物反 应调节剂(BRM)的要求。实验也提示AST与APS均是TAE的活性部位。那 么,TAE及其活性部位是如何发挥抗肿瘤作用的呢?采用MTT比色法或护H]TdR 渗入法分别检测了TAE、AST和APS体外对人肝癌Bel一7404细胞株、人宫颈癌 HeLa细胞株和人白血病K562细胞株生长的影响。结果显示,TAE(10,20,40, 50,160或32omg·L一,)对Bel一7404细胞、HeLa细胞和K562细胞均有明显的抑制 作用。AsT(10,20,40,50,160或32omg·L”)对Bel一7404细胞、HeLa细胞和 K562细胞的生长亦有剂量依赖性的抑制作用,但APS(10、20、40、80、160或 320mg’L一’)对Bel一7404细胞、HeLa细胞和K562细胞的生长均没有直接抑制作 用。APS(160,320,640mg·L一’)与小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞分别共培养的两种上 清,对Bel一7404细胞的生长均有显著的抑制作用。用小鼠IFN一Y ELISA试剂盒和 TNF一Q放免药盒检测培养上清,实验结果表明,随着APS浓度的增加,APS分别 增加腹腔巨噬细胞培养上清中TNF一a的含量和脾细胞培养上清中IFN一Y的含量。 提示APS通过促进IFN一Y和TNF一Q的分泌等免疫反应而实现其抗肿瘤作用。 TAE和AST是如何直接抑制肿瘤细胞的生长?本文采用流式细胞术检测和分 析了TAE和AST对Bel一7404细胞和HeLa细胞周期的影响,结果显示,TAE与 2003年安徽医科大学博士?
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R73-36

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【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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8 于国英;朱莉;韩志武;;鲐鱼消化道中蛋白酶提取条件的研究[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
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10 司红丽;王建娜;胡延春;王建华;;狗舌草总黄酮对L_(1210)细胞的体外作用研究[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年
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9 张子臻;益气升陷活血方治疗慢性充血性心力衰竭的研究[D];天津大学;2009年
10 吴秋玲;水蛭、斑蝥对肿瘤血管生成及VEGF、MMP表达的影响[D];湖北中医药大学;2011年
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2 张晓伟;N,N'-双(N-羟乙基氨丙基)草酰胺桥联多核配合物的合成、晶体结构及与DNA相互作用研究[D];中国海洋大学;2010年
3 王三荣;心脑通络液对局灶性脑缺血急性期大鼠血浆HCY和FIB含量的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 冯贵仁;石榴皮对大肠湿热证模型小鼠IL-1β、IL-6及sIgA等影响的实验研究[D];新疆医科大学;2010年
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6 王晓筱;益气养阴方在非小细胞肺癌综合治疗中的应用和疗效分析[D];山东中医药大学;2010年
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8 李家曌;肺抑瘤合剂配合厄洛替尼治疗肺腺癌的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
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10 赵海宁;大黄多糖的分离纯化及结构研究[D];华东理工大学;2011年
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1 王家晓,荣震,薛庭新;健脾益气中药对晚期肿瘤脾虚病人生活质量的影响[J];中医药临床杂志;2004年01期
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4 田作明,高尚伟,李永海,王维芝,寇振茹,杨金霞;灵芝及其相关制剂对癌症康复作用的调查分析[J];长春中医学院学报;2004年02期
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9 高冬,高永琳,白平,刘如玉;白花蛇舌草对宫颈癌细胞钙信号的影响[J];福建中医学院学报;2002年04期
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1 张沂平;;晚期大肠癌的内科治疗[A];肿瘤化学治疗新进展学习班资料汇编[C];2007年
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1 路景涛;复方黄芪提取物的保肝作用及其机理研究[D];安徽医科大学;2003年
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【二级参考文献】
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7 闫茂才;齐墩果酸衍生物的设计、合成与生物活性研究[D];沈阳药科大学;2008年
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8 舒奇;瑞香素抗肿瘤及免疫调节作用研究[D];南昌大学;2009年
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