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《安徽医科大学》 2006年
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血管紧张素Ⅱ及其受体在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

张泓  
【摘要】:研究背景 肾素-血管紧张素系统(RAS)与血管内皮损伤过程密切相关,其主要效应分子血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)有显著的促血管内皮炎性损伤作用。感染是急性肺损伤(ALI)最常见的病因,已知革兰阴性(G~-)菌内毒素(LPS)在严重感染时可致肺微血管内皮通透性增高,进而形成肺水肿;同时LPS还激活循环和肺组织的RAS,导致Ang Ⅱ水平升高,据此我们推测Ang Ⅱ可能参与LPS致ALI的发生、发展过程。在各种原因所致ALI中,肺微血管内皮细胞(PMVEC)的损伤首先出现,为进一步阐明Ang Ⅱ对PMVEC的作用机制,我们探讨Ang Ⅱ受体在大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)的分布及调控特征,并进一步研究Ang Ⅱ及其受体在大鼠内毒素性ALI病理过程中的作用。 研究内容 本研究分两个阶段。实验第一阶段在体外成功分离、培养RPMVEC的基础上进行,内容包括:(1) 采用RT-PCR、Western blot和放射性配基结合分析法,分别检测Ang Ⅱ受体的mRNA、蛋白表达水平以及受体的结合活性;(2) 观察以LPS/Ang Ⅱ干预RPMVEC之后,Ang Ⅱ受体mRNA和蛋白表达水平的变化。 实验第二阶段分别在大鼠的内毒素性ALI模型以及RPMVEC中进行,内容包括:(1) 测定内毒素性ALI大鼠肺组织中Ang Ⅱ水平;(2) 在LPS致大鼠ALI模型上以①肺组织湿/干重比;②组织病理学检查;③伊文思蓝(EB)荧光定量的方法,分别观测LPS和/或Ang Ⅱ对大鼠肺组织微血管内皮通透屏障的影响,以及Ang Ⅱ受体拮抗剂的干预作用;(3) 在RPMVEC单层水平上分别观察LPS和/或Ang Ⅱ对单层通透性的影响,以及Ang Ⅱ受体拮抗剂的干预作用;(4) 应用流式细胞仪和
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R563.8

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