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《蚌埠医学院》 2011年
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IFN-γ干预轮状病毒肠道外感染的乳鼠与NF-κB表达相关性的研究

杨梅  
【摘要】:目的:1.建立轮状病毒肠道外感染的BALB/C乳鼠模型,检测肠道外感染RVBALB/C乳鼠肝脏的NF-κB水平,以及IFN-γ干预后的肝脏NF-κB水平。探讨NF-κB表达与IFN-γ的相关性。2.观察BALB/C乳鼠感染RV后的肝脏病理变化,以及IFN-γ干预后的肝脏病理变化。3.肝脏病理变化联合NF-κB水平变化来探讨不同剂量IFN-γ在干预RV感染过程中的作用。4.通过监测Th1/Th2失衡中IFN-γ起到的作用,探讨IFN-γ是否能为临床治疗轮状病毒肠炎提供一种新的方法。 方法:猴轮状病毒SA-11株,分装,-80℃保存备用。实验动物选用1-2日龄的清洁级BALB/C乳鼠,将40只BALB/C乳鼠随机分成5组,每组8只,其中空白组为腹腔注射0.1ml无菌生理盐水组,并记为第一天,于第二天使用无菌生理盐水0.1ml在BALB/C乳鼠背部进行皮下注射三天。肠道外感染对照组为腹腔注射0.1mlSA-11株病毒并记为第一天,于第二天使用无菌生理盐水0.1ml在BALB/C乳鼠背部进行皮下注射三天。IFN-γ干预组为腹腔注射0.1ml SA-11株病毒并记为第一天,于第二天使用大中小剂量(2ug,0.2ug,0.02ug)IFN-γ在BALB/C乳鼠背部进行皮下注射三天。感染病毒后,各组进行隔离饲养。接种病毒后观察BALB/C乳鼠的活动情况、饮食情况、毛色、体型、大便变化情况。于第五天处死BALB/C乳鼠,留取肝脏,免疫组化法检测NF-κB水平及RV抗原并苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察肝脏的形态学改变。 结果:1.肠道外感染组BALB/C乳鼠表现为食欲不振,体重不增,活动减少,体毛蓬松,嗜睡等。干预组中的中等剂量组的BALB/C乳鼠活动情况,食欲情况较好,体重略有增加,大剂量干预组和小剂量组BALB/C乳鼠体重不增,活动减少。2.BALB/C乳鼠的病理改变:空白对照组肉眼下小鼠肝脏色泽鲜红,富有光泽。光镜下肝脏组织未见病理改变。肝细胞呈多面体形,胞核大而圆,常染色质丰富,有1至数个核仁。肠道外感染组肉眼下小鼠肝脏色黯红、肿大,光镜下可见肝脏细胞胞质疏松,线粒体肿胀,大量脂肪变空泡变性。肝细胞周围大量淋巴细胞中性粒细胞浸润,细胞点状坏死可见核分裂象。IFN-γ小剂量干预组肝脏肉眼肿大较肠道外感染组无明显变化,光镜病理改变较病毒感染组稍有减轻。IFN-γ中等剂量干预组肝脏肉眼肿大较病毒感染组明显减轻,光镜下可见肝脏线粒体肿胀,脂肪变空泡变性明显减轻。部分炎症细胞浸润,可见少量点状坏死和少量核分裂象。IFN-γ大剂量干预组肝脏肉眼肿大较病毒感染组加重,光镜下可见肝脏线粒体肿胀,脂肪变空泡变性明显严重。大量炎症细胞浸润,可见多量点状坏死和核分裂象。3.肠道外感染组可见多数活化的NF-κB表达于细胞核中,呈棕黄色颗粒。大中小剂量干预组细胞核中的染色范围及强度较病毒感染组均增加。4.RV感染后的各组肝细胞胞质中可见棕黄色染色颗粒。 结论:1.肠道外RV感染引起BALB/C乳鼠肝脏病理改变,表现为脂肪变性,炎症细胞浸润,细胞点状坏死。三种不同剂量IFN-γ干预后,中等剂量组肝脏病理损伤较肠道外感染组有所减轻,大剂量组肝脏病理损伤较肠道外感染组有所加重,小剂量组肝脏病理损伤较肠道外感染组无明显变化。2.肝脏NF-κB的检测显示三种不同剂量干预组的NF-κB表达均较肠道外感染组增加,但是三组中大剂量干预组的表达增加更为明显。3.肝脏NF-κB表达显示,IFN-γ能刺激NF-κB的表达。NF-κB表达在适当范围内增加会对抵抗RV起到积极作用,但是超过一定的限度则会损伤肝脏。4.Th1-Th2混合反应中Th1分泌的促炎因子IFN-γ,在合适的剂量对机体抵抗RV感染起良好作用,过高的剂量则会损伤机体。
【学位授予单位】:蚌埠医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R725.1

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