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《安徽师范大学》 2010年
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多花黄精微卫星标记的开发和利用

程文娟  
【摘要】:多花黄精(Polygonatum cyrtonema)属于黄精属,为多年生草本植物,主要分布于长江流域。其干燥根茎可作为黄精药材入药。最近研究还发现从多花黄精中提取的挥发油可以抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粘红酵母、人工培养条件下非小细胞肺癌癌细胞的生长。此外多花黄精外形优美,具有较高的观赏价值。然而由于人类不合理的开发利用,多花黄精野生资源急剧减少。研究多花黄精野生种群内及种群间的遗传变异将有助于我们理解多花黄精的演化进程和制定合理的保护策略。 简单重复序列或微卫星DNA是指基因组中由1-6 bp碱基重复单位组成的串联重复。由于微卫星分子标记具有高多态性、共显性遗传、结果稳定可靠、在基因组中分布广泛等特点,因此成为目前最为常用的分子标记,广泛的用于遗传图谱的构建、研究物种进化与亲缘关系、种群遗传学和保护生物学等研究领域。 我们利用磁珠富集法构建了多花黄精微卫星富集文库,挑取了110个阳性克隆测序,并根据测序结果设计合成了55对引物。通过PCR筛选,得到22对能稳定扩增出特异性产物的引物。对1个居群的23个个体,8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,12对引物的PCR产物呈现长度多态性。通过此方法我们首次开发出12个多态性微卫星分子标记。每个位点含2-11个等位基因,期望杂合度和观察到的杂合度分别为0.268-0.865和0.273-0.727。这12个引物在其它四种黄精属植物中跨种扩增的结果显示9对引物有较好的通用性。这些多态性微卫星分子标记将为多花黄精以及多花黄精近缘物种的种群遗传学、种质保存和保护等研究提供有利工具。
【学位授予单位】:安徽师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S567.239

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【参考文献】
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