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黑斑蛙Sox基因与Dmrt基因的研究

季代丽  
【摘要】:Sox 基因家族与Dmrt 基因家族是参与生物个体发育的两个基因家族,在分子水平对其研究,对于弄清其成员的分子进化及其具体担负的生物功能有重要意义。Sox 基因含有一个能与DNA 特异结合的高度保守基序HMG-box,调节动物的性别决定与分化过程,并参与多种器官的发育。Dmrt基因家族是一类新发现的含有DM 保守盒的转录调控因子,以锌指结构与特异DNA 序列结合,参与调节动物的性别决定与分化、器官的发育及功能维持。本文综述部分对Sox 基因家族的特点、分类、功能及分子进化四个方面进行概述,对Dmrt 基因的研究经过、特点及功能进行概述。 本文研究报告中,参照人SRY 基因HMG-box 保守区序列,设计一对兼并引物,采用PCR 技术扩增了黑斑蛙Sox 基因,在雌雄黑斑蛙个体中均扩增出一条大小约为220bp 的条带,对扩增产物进行克隆,阳性克隆采用SSCP分析,筛选不同基因片段。进一步对筛选的不同基因进行DNA 测序,结果获得了四个不同的Sox 基因,与GenBank 联机,采用BLAST 方法与人类相应SOX 基因进行序列比对,发现其与人类相应SOX 基因的DNA 序列一致性分别为86%、83%、82%、89%,与相应SOX 蛋白的氨基酸序列一致性分别为94%、93%、78%、98%,显示出该基因在分子进化上具有高度的保守性。根据黑斑蛙(Rana nigromaculata)的拉丁文名,按习惯将其命名为rn Sox3、rn Sox21、rn Sox4、rnSox11。 本文参照不同物种DM 结构域设计了另一对兼并引物,采用PCR 技术扩增了黑斑蛙Dmrt 基因,结果在雌雄个体中均扩增出一条带,长约140bp。对扩增产物进行克隆,阳性克隆采用SSCP 分析筛选不同基因片段,进一步对筛选的不同基因进行了DNA 测序。结果获得三个不同的Dmrt 基因,与GenBank 联机,采用BLAST 方法与人类相应DMRT 基因进行序列比对,发现与人类相应DMRT 基因的氨基酸序列一致性分别为:89% 、93%、89% ,显


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