收藏本站
收藏 | 论文排版

半夏细胞悬浮培养及其人工种子技术研究

毛春娜  
【摘要】:半夏Pinellia ternata Berit.为天南星科多年生草本药用植物,以块茎入药,是传统的中药材。半夏因病毒而引起的品种退化常导致种源不足、产量与品质严重下降,这已成为半夏生产上的主要障碍之一,通过茎尖分生组织脱除病毒培养的半夏苗和试管块茎等生物技术手段是生产上提供人工种子和提高产量品质的重要解决途径。本文主要通过不同植物生长物质对愈伤组织诱导的影响,通过对半夏悬浮细胞同步化的研究为人工种子的制作提供大量同步的小块茎材料,并对半夏人工种子技术进行了一定的研究,为半夏人工种子的生产和应用提供理论和技术基础。主要研究结果如下: (1)以半夏叶柄为外植体,采用正交设计研究2,4-D、NAA、毒莠定和KT 4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。结果表明:2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA的诱导效果次之诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS + 2,4-D 0.5 mg·L~(-1) + NAA 1.0 mg·L~(-1) +毒莠定1.0 mg·L~(-1) + KT 1.5mg·L~(-1)。 (2)以三叶半夏疏松愈伤组织为材料,转接到MS + 6-BA 0.5 mg·L~(-1) + 2,4-D 1.0 mg·L~(-1) + CH300 mg·L~(-1)的液体培养基中进行培养3-4次,然后测其悬浮细胞的生长周期,第15-21 d为半夏悬浮细胞的指数生长期,此时为培养细胞的最佳继代时间。 (3)通过不同植物生长调节物质配比对半夏悬浮细胞培养的影响研究表明,最佳的悬浮液体培养基为MS + 2,4-D 0.5 mg·L~(-1) +6-BA 0.5 mg·L~(-1)。 (4)采用正交试验设计方法研究低温处理对半夏悬浮培养细胞同步化的影响,并对所得数据进行极差分析和方差分析。结果表明低温处理后,细胞分裂指数均有不同程度的提高,其中,温度为8℃时细胞分裂指数大于其他两组温度处理后细胞的分裂指数,而在8℃低温条件下,处理24 h,恢复36 h,同步化效果最好,分裂指数可达11.3%。 (5)以同步化后的半夏悬浮细胞为材料,设计正交试验L_9(3~4),研究不同浓度的6-BA、KT、NAA和2,4-D对细胞团分化小块茎的影响,筛选出最适合分化出小块茎的液体培养基为MS + 6-BA0.5 mg·L~(-1) + NAA0.5 mg·L~(-1) + 2,4-D 0.25 mg·L~(-1) +蔗糖30 g·L~(-1)。 (6)利用悬浮培养分化得到的半夏小块茎为包埋材料,研究不同浓度的壳聚糖、聚乙二醇、多菌灵和苯甲酸钠对制作的半夏人工种子的萌发率和成苗率的影响,结果表明,半夏人工种皮为3%海藻酸钠+ 2% CaCl_2 + 0.05 % CoCl_2 + 0.05% CuCl_2 + 0.1 mg·L~(-1) GA_3 + 4 %壳聚糖+ 2 %聚乙二醇+ 0.4 %苯甲酸钠为最好,萌发率达到85%;筛选的半夏人工种皮为3%海藻酸钠+ 2% CaCl_2 + 0.05% CoCl_2 + 0.05% CuCl_2 + 0.1 mg·L~(-1)GA_3 + 4 %壳聚糖+ 4 %聚乙二醇+ 0.2 %多菌灵,成苗率高达95%。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 高日;朴炫春;于晓坤;金星爱;廉美兰;;人参细胞悬浮培养中蔗糖和无机盐对皂苷生产的影响[J];延边大学农学学报;2011年02期
2 李雅丽;杨英;付春华;余龙江;;胀果甘草细胞悬浮培养流变特性分析[J];食品科技;2011年08期
3 冀爱青;吴国良;;果树体细胞胚胎发生研究进展[J];北方园艺;2011年13期
4 敬碧;毛拉艾麦提·阿不都卡迪尔;王芳;唐雪梅;;新疆紫草毛状根愈伤组织诱导及其生长条件研究(Ⅰ)[J];新疆农业科学;2011年07期
5 杨春霞;黄丽莉;章挺;朱培林;;苦豆子愈伤组织培养及其药用成分含量测定[J];中国农学通报;2011年18期
6 赵学丽;王洪梅;周志军;;超低温保存技术在木本植物种质资源保存中的应用[J];林业勘查设计;2011年02期
7 张健;王颖;吴坤鑫;陈雄庭;;白木香组织培养研究进展[J];中国园艺文摘;2011年06期
8 申轮;谭洲;李戈;朱秋融;贾旺旺;;西洋参种胚离体组织培养研究[J];陕西农业科学;2011年04期
9 王雅英;林小华;洪璇;;金线莲外植体筛选及愈伤组织诱导研究[J];亚热带植物科学;2011年03期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈智钦;张振凌;张宏伟;王娜;;半夏炮制原理研究进展[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
2 郭文义;赖钟雄;白永富;陈学军;李天飞;;植物人工种子的研究进展[A];第二届全国植物组织培养、脱毒快繁及工厂化生产学术研讨会论文集[C];2004年
3 周耀;丰来;;显齿蛇葡萄细胞悬浮培养研究[A];低碳农业与湖南经济发展论坛论文集[C];2010年
4 唐巍;欧阳藩;;马铃薯微型薯和微芽的诱导与人工种子研制(摘要)[A];中国马铃薯学术研讨文集(1996)[C];1996年
5 杨春霞;黄丽莉;朱培林;;药用植物苦豆子细胞悬浮培养体系的建立[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年
6 熊福银;陈昭烈;刘红;刘兴茂;;采用细胞悬浮培养技术扩殖脐血干/祖细胞[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
7 白永富;卢秀萍;;植物人工种子研究进展及在烟草上的应用前景[A];云南省作物学会2004—2006年优秀论文选集[C];2006年
8 魏臻武;武自念;耿小丽;姚喜红;甘欣;;苜蓿花药的细胞悬浮培养[A];第四届(2011)中国苜蓿发展大会论文集[C];2011年
9 纵瑞收;李华;李锋;;植物克隆技术及其在农业上的应用探析[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
10 赵俊;吴虹丽;马林;;鸡屎藤愈伤组织诱导及细胞悬浮培养条件的建立[A];2009中国植物学会植物细胞生物学学术年会论文摘要集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘永红;半夏块茎与细胞培养体系的建立及主要生物碱的代谢调控研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 李春斌;银杏组织、细胞悬浮培养及银杏黄酮和萜内酯的提取、纯化和检测方法研究[D];大连理工大学;2002年
3 张毅;大蒜细胞培养及其超氧化物歧化酶SOD积累的研究[D];华南理工大学;1993年
4 夏启中;棉花悬浮细胞系的建立及其培养细胞的程序性死亡的观察研究[D];华中农业大学;2005年
5 郑穗平;玫瑰茄细胞悬浮培养过程的动力学研究[D];华南理工大学;1998年
6 罗焕亮;胡桐细胞培养生产红厚壳素的细胞工程研究[D];华南理工大学;2003年
7 李斌;剑麻组织和细胞培养诱导蛋白酶的研究[D];华南理工大学;1998年
8 武利勤;天山雪莲与其内生真菌相互作用的研究[D];中国协和医科大学;2005年
9 李志勇;大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶的动力学研究[D];华南理工大学;2000年
10 刘佳佳;高产黄酮苷和萜内酯银杏细胞系选育及黄酮苷积累调控的研究[D];华南理工大学;1999年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 毛春娜;半夏细胞悬浮培养及其人工种子技术研究[D];淮北师范大学;2011年
2 王丽;半夏肝毒性“量—时—毒”关系研究与毒性影响因素探讨[D];山东中医药大学;2010年
3 陶文婷;半夏醇制减毒及工艺研究[D];南京中医药大学;2012年
4 史闰均;生姜对半夏所致刺激性炎症反应的影响[D];南京中医药大学;2011年
5 张敏;模拟不同环境条件下药用植物半夏的形态与生理反应研究[D];西南大学;2011年
6 曹书立;半夏多糖对希罗达干预下小鼠腺癌MHC-Ⅱ分子表达的增效作用[D];第二军医大学;2010年
7 黄永亮;毒性中药半夏、川乌有关炮制与“麻舌”评价的初探[D];成都中医药大学;2011年
8 刘彩莲;半夏一步成苗技术体系及生理生化研究[D];四川农业大学;2010年
9 郭文义;烟草人工种子的研究[D];福建农林大学;2004年
10 周丽艳;甘薯组织培养和人工种子的研究[D];河北农业大学;2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 茆琛;人工种子实生苗繁育新法 有望缓解胡杨林衰败现状[N];人民日报海外版;2001年
2 天津财经学院 刘北辰 教授;培育生物新品种的方法[N];中国食品质量报;2003年
3 田地 编译;藉蝙蝠“种子雨”拯救森林[N];大众科技报;2007年
4 本报通讯员 王承鼎 程传宏;保康牡丹野生原种亟待抢救[N];中国绿色时报;2008年
5 本报记者 何小唐;花卉繁育 搭乘生物技术快车[N];中国花卉报;2003年
6 维宣 周晗;优邦生物“四喜临门”[N];扬州日报;2009年
7 ;张许科:创新成就未来[N];中国畜牧兽医报;2011年
8 邵华;张玲琪;李俊梅;铁皮石斛研究探讨[N];中国医药报;2004年
9 封立君 洪光荣;蓝天生态观光园通过审定[N];上饶日报;2007年
10 郭云龙 徐罡  ;加紧“孵化”科技新成果 [N];中国花卉报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978