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《厦门大学》 2001年
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植物内生真菌抗真菌抗肿瘤活性的研究

李桂玲  
【摘要】: 植物内生真菌是一个庞大的特殊真菌类群,次生代谢产物非常丰富,包括杀虫、抗菌、抗肿瘤等活性物质,是人们寻找新型抗菌、抗肿瘤药物的重要资源。本课题的工作主要包括南方红豆杉、三尖杉及香榧内生真菌的分离;内生真菌抗真菌、抗肿瘤活性菌株的筛选;以及对抗肿瘤高活性菌株H18-036的活性物质的初步研究。 从采集自福建省沙县、武夷山等地的三尖杉(Cephalotaxus Fortunei)、南方红豆杉(Taxus mairei)及香榧(Torreya grandis)的内皮层和韧皮部中,分离到172株植物内生真菌。抗真菌活性检测结果表明,90株内生真菌对一种或多种植物病原真菌——红色面孢霉(Neurospora Sp.)、木霉(Trichoderma sp.)、镰刀菌(Fusariumsp.)等有抑制作用,占供测真菌总数的52.3%。来自三尖杉、南方红豆杉和香榧的内生真菌的抗真菌活性菌株比例分别为40%,54.2%及57.1%。其中抑菌圈直径大于15mm的高抗菌株有35株。按Ainsworth等鉴定系统和方法进行鉴定,具有抗真菌活性的内生真菌主要分布于拟青霉属(Paecilomyces)、镰孢菌属(Fusarium)等17个属中。 利用抗肿瘤体外细胞毒筛选模型(MTT法)对内生真菌进行活性检测。结果表明,共有25株内生真菌(占总分离菌株的14.5%)对KB(人口腔上皮癌)或HL-60(人白血病)细胞具有显著的抑制活性。三尖杉、南方红豆杉及香榧内生真菌的抗肿瘤活性菌株占各供测菌株的3.3%,19.6%和8.6%。其中7个菌株的细胞毒ID_50在1,000以上,占总供测菌株的4.1%。菌株的初步鉴定结果显示,抗肿瘤活性菌株主要分布在拟青霉属及头孢霉属(Cephalosporium)中。 在抗肿瘤高活性菌株中,菌株H18-036对KB及HL-60细胞有明显抑制作用,初步鉴定为一种拟青霉(Paecilomyces sp.)。对其发 摘要-11- 酵液活性物质进行分离纯化,得到一个结晶及5个纯度较高的组分。 该结晶与*-036发酵液有机抽提所得结晶布雷菲德菌素A具有相 同的Rr值、显色反应,初步判定为布雷菲德菌素A。5个纯度较高的 组分经薄层层析检测及官能团显色反应,初步断定为生物碱类物质或 含有氨(胺)基且易被氧化物质。MTT测定结果显示,至少有3个组 分对HL-60细胞具有较高的抑制活性,其ID。。分别为800,>2,000, 800,具有深入研究的价值。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R73-3

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