收藏本站
《厦门大学》 2001年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

中国鲎鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化作用与机理研究

欧阳高亮  
【摘要】:应用从中国鲎血液中分离提取的小分子多肽——中国鲎鲎素处理人肝癌SMMC-7721细胞,以分化诱导剂HMBA处理为平行对照,并应用鲎素与HMBA组合进行处理,运用细胞生物学、免疫生物学、生物化学与分子生物学等手段,观察鉴定中国鲎鲎素对人肝癌细胞的生物学效应,并进一步研究鲎素对人肝癌细胞的作用机理。 实验结果表明,3.0ug/mL鲎素、5.0mmol/L HMBA和1.5ug/mL 鲎素+2.0mmol/L HMBA均能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖活动,细胞生长受到抑制,分裂指数下降,集落形成能力降低。生化测定、细胞化学与免疫细胞化学观察显示,经鲎素、HMBA及其组合处理后的SMMC-7721细胞甲胎蛋白和增殖细胞核抗原表达均明显降低,γ-GT和碱性磷酸酶活性明显减弱,而TAT酶活性显著增强。光镜、扫描电镜和透射电镜观察显示经鲎素、HMBA及其组合处理后的SMMC-7721细胞趋于扁平铺展状态,细胞体积增大,核质比例减小;核形状较为规则,核仁数量减少、体积变小,核内常染色质增多而异染色质减少;细胞质内线粒体数量增多、线粒体嵴发达,高尔基体较为典型,粗糙型内质网增多,多聚核糖体减少而游离核糖体增多;细胞表面微绒毛较少,边缘丝状伪足减少而片状伪足增多,表现出明显不同于对照组细胞而与正常细胞相似的形态与超微结构特征。光镜、共聚焦显微镜与免疫荧光观察显示SMMC-7721细胞经鲎素、HMBA及其组合处理后,细胞骨架排列较为有序,微丝减少而微管、中间纤维增加;细胞核骨架纤维排列有序,通过核纤层与中间纤维一起形成贯穿细胞核质的完整的致密网状骨架体系。流式细胞仪检测显示SMMC-7721细胞经鲎素、HMBA及其组合处理后,S期细胞均明显减少,Go/Gl期细胞明显增多,细胞被阻滞于G/G1期。免疫细胞化学与核酸原位杂交检测显示,鲎素、HMBA及其组合均能不同程度地上调SMMC-7721细胞p21WA/:I/CIPl、p16蛋白表达并增强p21WAFI/CIPl mRNA表达,下调突变型p53、Cyclin D1、CDK4、Rb、c-myc蛋白含量并降低c-myc mRNA表达,同时也能有效降低NF-K B、PKC、p185蛋白表达,对bc1-2蛋白表达也具有微弱的下调作用,但不影响TGF-p RⅡ蛋白表达。 研究结果表明,鲎素与分化诱导剂HMBA一样能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞恶性增殖活动,改变人肝癌细胞代谢相关酶活性和肿瘤相关抗原表达,逆转人肝癌细胞的恶性形态与超微结构特征,改变人肝癌细胞骨架与核骨架的构型特征,并将肝癌细胞停滞于G/G,期,从而对人肝癌细胞具有显著的诱导分化作用。 其诱导肝癌细胞分化的作用机理与其调节和干预突变型p53、c-myc等癌基因、 p21“”“”’小l6等抑癌基因的表达、调控受体酪氨酸激酶P185蛋白介导的RTK干肪 信号传导通路以及G蛋白介导的DG-PKC磷脂酞肌醇等细胞信号传导通路具有密切 关系。同时低浓度的HMBA与低浓度的鲨素联合应用,可有效降低鲨素或HMBA 的作用浓度,并增强其对人肝癌细胞的诱导分化效应。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R735.7

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董荣春,周荣华,吕发度,陶文照;SMMC-7721人体肝癌细胞株的建立及其生物学特性的初步观察[J];第二军医大学学报;1980年01期
2 王哲,黄高升;HMBA对K562巨噬细胞样分化过程中细胞周期的影响[J];第四军医大学学报;2000年04期
3 高冬,黄海江,高永琳;环六亚甲基双乙酰胺对胃癌细胞MGc80-3增殖分化的影响[J];福建医科大学学报;1997年04期
4 何艳,林德馨,叶庆林;全反式维甲酸对人肝细胞癌细胞生长的影响[J];福建医科大学学报;1998年04期
5 王兴旺,胥彬;BEL-7404人肝癌细胞甲胎蛋白基因表达的原位杂交与免疫细胞化学研究[J];中国组织化学与细胞化学杂志;1997年03期
6 张春义,范云六;在大肠杆菌中表达具有抗黄曲霉活性的鲎素[J];高技术通讯;1999年01期
7 单长民,李娟,李璞;肝癌的分子遗传学研究[J];国外医学.遗传学分册;2000年03期
8 回爱民,幕内雅敏;细胞周期G_1期调节机制异常与肝癌的发生[J];国外医学(肿瘤学分册);1999年06期
9 吴孟超,沈锋;肝癌研究的现状和展望[J];国外医学(肿瘤学分册);2000年01期
10 欧阳高亮,李祺福,洪水根;细胞凋亡与肿瘤的发生发展和治疗[J];国外医学(肿瘤学分册);2000年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周红宁;抑癌研究进展[J];癌变.畸变.突变;1992年02期
2 陈治文,夏俊,胡守芬,马栋柱,王丽;三氧化二砷诱导恶性黑色素瘤A_(375)和B_(16)细胞凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2002年04期
3 陈治文,王丽,夏俊,马佳;三氧化二砷对恶性黑色素瘤A_(375)细胞端粒酶活性的抑制作用[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
4 陈华,王志红,汪家梨,陈铁辉,薛常镐;姜黄水提液抗氧化与抑瘤作用的初步研究[J];癌变.畸变.突变;2004年06期
5 刘量,周守标,郑维发;木蹄层孔菌乙醇提取物对肿瘤细胞的抑制作用[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
6 李红卫;吴坤;;α-生育酚琥珀酸酯抗小鼠Ehrlich氏腹水癌作用的研究[J];癌变.畸变.突变;2006年05期
7 沈业寿;郑立军;王正亮;顾利平;;桑黄胞内多糖抗肿瘤效应的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
8 郑一凡,朱心强,黄幸纾;β-胡萝卜素和叶绿酸对DMBA诱发大鼠乳腺癌的影响[J];癌变.畸变.突变;1997年02期
9 秦燕军;姚日生;;喜树碱内酯环前药的研究进展[J];安徽化工;2007年05期
10 王家晓;中药治疗原发性肝癌的机理研究进展[J];安徽中医临床杂志;2002年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李红卫;;α-生育酚琥珀酸酯延长Ehrlich氏腹水癌小鼠生存期的实验研究[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
2 ;Effects of Hexamethylene Bisacetamide on Proliferation and Gene Expression of Human Hepatocarcinoma Cells[A];第十三届中国科协年会第6分会场-绿色经济与沿海城市可持续发展战略研讨会论文集[C];2011年
3 曾聪;白岚;;改善用药方法增强TNF抗肿瘤作用[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
4 谭宇蕙;朱丽红;刘小东;李杰芬;;吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制及诱导凋亡作用[A];中医药生物化学与分子生物学通讯[C];2008年
5 张锦林;倪美鑫;刘继斌;沈康;张一心;;补康灵对Lewis肺癌小鼠化疗疗效及免疫功能的影响[A];2010年江苏省药学大会暨第十届江苏省药师周大会论文集[C];2010年
6 周双林;江乃澄;张立飞;;海洋动物的药用研究及应用[A];动物学专辑——上海市动物学会2000年年会论文集[C];2000年
7 薛颖;;中国产蔬菜抗促癌作用的研究[A];21世纪人类食品面临的新问题学术论文集[C];2001年
8 阮君山;;小春花对小鼠二阶段皮肤乳头状瘤的抑制作用[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
9 曹波;王淑萍;张静泽;毕文超;杨再鑫;陈虹;;新的微管抑制剂YB-13诱导SKOV3细胞凋亡和体内抗肿瘤作用[A];2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集[C];2008年
10 黄美珍;李志棠;;海洋生物技术在水产养殖生物病害防治中的应用[A];第二届全国海珍品养殖研讨会论文集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈冠豪;黄芪注射液对肺癌小鼠模型作用机制初探[D];山东中医药大学;2010年
2 刘旭东;RNAi-Rac1对胆管癌治疗的实验研究[D];吉林大学;2011年
3 单延红;姜黄素联合人类细胞因子诱导的杀伤细胞对卵巢癌细胞增殖的抑制及机制的研究[D];吉林大学;2011年
4 于明安;微波消融联合过继免疫预防肝癌术后复发的实验及临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
5 刘顺芳;癌基因DJ-1在人肝细胞癌中的作用及其机制研究[D];华中科技大学;2011年
6 王春玲;和厚朴酚与青蒿素协同抗鼻咽癌细胞的作用及其机制研究[D];广州中医药大学;2011年
7 李姵萱;疏肝清毒汤诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡及其机制的实验研究[D];广州中医药大学;2011年
8 李汛;甲胎蛋白影响乙肝相关性肝癌发生的分子作用机制[D];兰州大学;2010年
9 陈文芳;磁场对不同细胞的生物效应与磁场增强抗癌药物杀伤不同肿瘤细胞的机制初探[D];陕西师范大学;2011年
10 张国强;癌基因PPO在恶性黑色素瘤中表达的意义及其体内外实验研究[D];河北医科大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蔚利纳;HL-60白血病细胞诱导分化后NS基因表达变化与NF-κB和CyclinD1、A关联性的研究[D];郑州大学;2010年
2 史志如;汉黄芩素对人乳腺癌细胞胰岛素样生长因子-1的影响[D];辽宁师范大学;2010年
3 张晓伟;N,N'-双(N-羟乙基氨丙基)草酰胺桥联多核配合物的合成、晶体结构及与DNA相互作用研究[D];中国海洋大学;2010年
4 李娜;败酱有效部位PHEB抗肿瘤作用及其作用机理的研究[D];浙江中医药大学;2010年
5 兰海滨;白附子混悬液对H_(22)荷瘤小鼠端粒酶活性及p16和bcl-2基因表达相关性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 杨丹;平调饮对原发性肝癌患者AFPmRNA、MAGE-1mRNA表达影响的研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
7 冯兵;中药罗勒胶囊抑制大鼠移植性肝癌TACE术后肿瘤侵袭和复发的作用机制研究[D];山东中医药大学;2010年
8 肖晏婴;竹节参茎叶中脂溶性成分的研究[D];武汉工业学院;2010年
9 赵冰;中药联合驱虫斑鸠菊注射液治疗白癜风肝肾阴虚证的临床观察[D];成都中医药大学;2010年
10 侯菊花;KLF6基因在舌癌细胞诱导分化过程中的作用研究[D];桂林医学院;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 秦锁富,李志文,查锡良,陈惠黎;视黄酸和亚硒酸钠对人肝癌细胞生长和DNA合成抑制的相加作用[J];癌症;1992年01期
2 何志巍,陈南岳,刘新光,赵明伦;全反式维甲酸对 CNE-2Z 细胞增殖的影响及凋亡诱导[J];癌症;1997年03期
3 吴乔,郑耘,张晓坤;全反式视黄酸对癌细胞凋亡的诱导[J];癌症;1998年03期
4 马文彬,宋长春,马兴元,徐景达;应用流式细胞光度计研究人参单体Rh_1和Rh_2对小鼠S180肉瘤细胞周期移行的影响[J];白求恩医科大学学报;1991年06期
5 蔡玉晖,谷钰之,张嘉庆,卢平,周庆环;人体胃癌细胞系BGC-823的建立[J];北京医科大学学报;1986年02期
6 王洛权;乙型肝炎病毒基因转基因鼠的肝脏肿瘤癌基因及生长因子[J];北京医科大学学报;1995年06期
7 董荣春,周荣华,吕发度,陶文照;SMMC-7721人体肝癌细胞株的建立及其生物学特性的初步观察[J];第二军医大学学报;1980年01期
8 阎庆国,王文亮,黄高升;促凋亡基因bax在胆管癌中的表达与意义[J];第四军医大学学报;1997年02期
9 陈汉;中晚期肝癌的综合治疗[J];肝胆胰外科杂志;1998年04期
10 雷薇,吴旻;维甲酸对增殖分化调节的分子机制[J];国外医学(分子生物学分册);1994年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 洪水根,陈菲,李祺福,胡友川,叶军,欧阳高亮,李长友,李筱泉,乔玉欢,陈福;中国鲎鲎素T-1抗人早幼粒白血病HL-60细胞活性研究[J];厦门大学学报(自然科学版);1999年03期
2 廖永岩,叶富良,洪水根;鲎,一种珍贵的海洋药用动物[J];中国海洋药物;1998年04期
3 李祺福,欧阳高亮,鲍仕登,洪水根;中国鲎鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用[J];中国海洋药物;2002年02期
4 王艾琳,李坚,张惠;HMBA对人和小鼠3种红白血病细胞生长及分化的作用[J];基础医学与临床;2004年05期
5 谷善青,粱云燕,王代树;白龙片与HMBA对人胃癌不同周期细胞内两条信号通路调节的共性研究[J];中国医药学报;2000年03期
6 陈小芳;汪亚君;丁航;张海涛;;鲎素的抗菌作用[J];时珍国医国药;2009年05期
7 张海涛;伍俊;汪亚君;郭黠;;鲎素诱导HL-60细胞凋亡的机制探讨[J];华中科技大学学报(医学版);2008年02期
8 王艾琳,李坚,许卫东;HMBA诱导红白血病细胞分化作用的研究[J];北华大学学报(自然科学版);2003年04期
9 张海涛;伍俊;汪亚君;郭黠;;鲎素激活FAS途径促使HL-60细胞凋亡的实验研究[J];中国海洋药物;2008年04期
10 杨端,王正新,张龙翔;中国鲎凝集素的分离纯化及性质研究[J];中国生物化学与分子生物学报;1990年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李祺福;李长友;欧阳高亮;叶军;洪水根;;中国鲎鲎素对人胃癌BGC-823细胞的生物效应[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
2 代建国;谢海伟;金刚;郭勇;;鲎素的抗菌靶点初探[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
3 陈字;王钦红;谢彦晖;谢毅;;六亚甲基二乙酰胺诱导HL-60细胞分化的实验研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
4 李祺福;赵春红;马宗源;;HMBA诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化与核基质蛋白的表达[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
5 罗克;林树根;吴翊钦;钟秀容;陈文列;;中国鲎早期胚胎发育的光镜和电镜观察(Ⅰ)[A];第八次全国电子显微学会议论文摘要集(Ⅰ)[C];1994年
6 洪水根;倪子绵;薛如;孙涛;刘桂杰;韩俊雁;;中国鲎精子发生的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
7 吴翊钦;陈莲云;陈文列;罗克;林树根;;中国鲎早期胚胎发育的光镜和电镜观察(Ⅱ)[A];第八次全国电子显微学会议论文摘要集(Ⅰ)[C];1994年
8 郑伟;韩文瑜;韩俊友;张钫;雷连成;乔红伟;;中国鲎(Tachypleustridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其抗菌活性研究[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
9 韩艳;韩文瑜;雷连成;冯新;程福亮;;中国鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅰ基因克隆和原核表达载体构建[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
10 陈兰英;杨海波;李祺福;;HMBA诱导人肝癌细胞分化过程中核基质蛋白表达的变化[A];中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 鲍娜;厦门大学致力开发中国鲎经济价值[N];中国渔业报;2009年
2 梁思奇;中国鲎实现规模繁育[N];新华每日电讯;2006年
3 杨兵;中国鲎人工育苗获突破[N];科技日报;2006年
4 记者 马顺;北海为“中国鲎”开辟通道[N];新华每日电讯;2000年
5 何书彬;厦金联手保护白海豚中国鲎[N];厦门日报;2007年
6 记者 李敏;保护中华白海豚和中国鲎[N];汕头日报;2006年
7 ;2005十大消费典型案例[N];厦门日报;2006年
8 胡伟民;活化石“中国鲎”全人工育苗成功[N];农民日报;2009年
9 许国 杨映乔;汕头:“放流”鱼苗“增值”渔业[N];中国特产报;2005年
10 许国 杨映乔;汕头首次增殖放流南方鲎[N];中国渔业报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 欧阳高亮;中国鲎鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化作用与机理研究[D];厦门大学;2001年
2 郑伟;中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究[D];吉林大学;2005年
3 赵扬;坛紫菜转鲎素基因研究[D];厦门大学;2005年
4 冯新;重组鲎素的规模化制备及其体内外生物学效应与作用机制[D];吉林大学;2011年
5 王玮;细胞周期抑癌基因p21、p27、p16、p15基因克隆联合STI571治疗慢粒的实验研究[D];第四军医大学;2004年
6 于良民;环境友好型丙烯酸树脂的合成及其在海洋防污涂料中的应用研究[D];中国海洋大学;2004年
7 王钦红;细胞周期G1期调控分子在白血病细胞、淋巴瘤细胞以及CD34~+细胞增殖、分化、凋亡中的作用[D];复旦大学;2004年
8 谢贤和;中药紫龙金对人胃癌BGC—823细胞生长、增殖、侵袭及相关基因表达的作用[D];福建医科大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 田长海;中国鲎鲎素对人肺腺癌SPC-A-1细胞作用的研究[D];厦门大学;2001年
2 王永煜;中国鲎鲎素对人胃腺癌BGC-823细胞的联合诱导分化研究[D];厦门大学;2001年
3 张钫;中国鲎抗菌肽polyphemusinⅡ基因的改造、克隆及原核表达[D];新疆农业大学;2005年
4 程文;中国鲎的胚胎发育及温度和盐度对一期幼体代谢的影响[D];华中农业大学;2007年
5 韩艳;中国鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅰ原核表达及其多克隆抗体的制备[D];吉林大学;2007年
6 董磊;辣素和吲哚衍生物的合成及其在防污涂料中的应用研究[D];中国海洋大学;2004年
7 高宇;鲎素—人溶菌酶毕赤酵母表达、大规模发酵条件优化及生物学活性分析[D];吉林大学;2012年
8 黄大川;僧帽牡蛎低分子活性肽组分BPO-L对人肺腺癌A549细胞的诱导分化作用研究[D];厦门大学;2002年
9 李鹏;僧帽牡蛎天然活性肽组分BPO-1诱导人胃腺癌BGC-823细胞凋亡作用与机理研究[D];厦门大学;2002年
10 侯菊花;KLF6基因在舌癌细胞诱导分化过程中的作用研究[D];桂林医学院;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026