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两株海洋真菌活性物质的初步研究

肖永堂  
【摘要】: 本文对采集自浙江舟山海域底泥的72株海洋真菌、福建省九龙江口及云霄县红树林的116株红树林共附生真菌,进行了杀小杆线虫、杀卤虫和乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性的初步研究。对筛选出具有较强AChE抑制活性的#229真菌和抗菌活性的C-3-5-9真菌的代谢产物进行了初步的研究。 我们对188株真菌粗提物的杀小杆线虫活性进行测试,结果表明,对小杆线虫有一定的毒杀作用。在0.5mg/mL的浓度下,毒力级别达到A级的菌株数占1.60%;而致50%以上死亡率菌株数占43.1%。经复筛,#164真菌粗提物具有较强的杀小杆线虫活性,0.5mg/mL浓度下处理24h,小杆线虫死亡率为96.67%。对188株真菌粗提物的杀卤虫活性进行研究,其中#122真菌粗提物的活性较强,在0.5mg/mL浓度下,处理2h后卤虫死亡率就达到了100%。另外,#13、#45、#83、#123、#305等6株真菌粗提物对卤虫具有较强的毒杀作用。在0.5mg/mL浓度下,被测试卤虫24h死亡率均在85%以上。进一步考察上述6株真菌粗提物浓度梯度与杀卤虫活性关系。结果表明,#305真菌粗提物杀卤虫活性最强,在100μg/mL的浓度下,处理24h,卤虫死亡率高达90%,其LC50仅为75μg/mL。从188个粗提物中筛选到#229真菌和#170真菌粗提物具有较强的AChE抑制活性,IC50分别是30μg/mL和25μg/mL。进一步实验结果表明,#229真菌和#170真菌很可能是同一个菌种,因为它们代谢产物的TLC结果完全相同。对具有AChE抑制活性的#229真菌的代谢产物进行活性跟踪分离,从中分离出具有高效AChE抑制活性的化合物territrem B,即土震素B。另外,从该真菌的代谢产物分离到了具有抗真菌活性的聚酮类化合物palitantin,该化合物对白色假丝酵母(Candida albicans)的MIC值为62.5μg/mL。 对初筛具有抗菌和杀卤虫活性的C-3-5-9真菌的代谢产物进行分离。从中分离到了具有较强肿瘤细胞毒活性的化合物gliotoxin和acetylgliotoxin。Acetylgliotoxin对MG-63细胞株的IC50小于0.75μg/mL,对B淋巴瘤Raji细胞的IC50介于1μg/mL和2μg/mL之间,2μg/mL时,对肝癌细胞HEPG的抑制率达95%,表现出较强体外细胞毒活性。此外,对白色假丝酵母的MIC小于19μg/mL,对黑曲霉的MIC小于39μg/mL。该化合物对枯草杆菌、大肠杆菌和


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